Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

نهج جديد لرصد الفساد نيوفاسكولاريزيشن في اللثة البشرية

Published: January 12, 2019 doi: 10.3791/58535

Summary

ويدخل هذه الدراسة وضع بروتوكول لقياس دوران الأوعية الدقيقة في الغشاء المخاطي الشفوي البشري بليزر البقع واللطخ التباين التصوير. رصد التئام الجروح بعد تعرض فيستيبولوبلاستي جنبا إلى جنب مع طعم الكولاجين إكسينوجينيك على حالة سريرية.

Abstract

ليزر البقع واللطخ التباين التصوير () طريقة جديدة لقياس التروية الدموية سطحية على مساحات واسعة. أنه غير الغازية وتجنب الاتصال المباشر مع منطقة المقاسة، ومناسبة لرصد تغيرات تدفق الدم أثناء التئام الجروح في مرضى البشرية. فيستيبولوبلاستي جراحة اللثة إلى دهليز الفم، تهدف إلى استعادة العمق الدهليزية مع التوسع المتزامن من لثة الكيراتينيه. في هذه الحالة السريرية الخاصة، تم رفع رفرف سمك انقسام في بريمولار العليا الأولى ومصفوفة الكولاجين إكسينوجينيك تم تكييفها للسرير المتلقية الناتجة. لسسي استخدمت لرصد re-ونيوفاسكولاريزيشن الاختلاس والأغشية المخاطية المحيطة بها لمدة سنة واحدة. هو عرض بروتوكول للتعديل الصحيح لقياس دوران الأوعية الدقيقة في الغشاء المخاطي الشفوي، تسليط الضوء على الصعوبات وحالات الفشل المحتملة.

دراسة الحالة السريرية المقدمة بينت أن – يتبع البروتوكول المناسب — لسسي هو أسلوب مناسب وموثوق بها لمتابعة دوران الأوعية الدقيقة في شفاء الجرح في الغشاء المخاطي الشفوي البشري ويعطي معلومات مفيدة عن التكامل الاختلاس.

Introduction

رصد التغيرات الطويلة الأجل لدوران الأوعية الدقيقة اللثة البشرية في حالة سريرية موضوع ساخن في جراحة الفم واللثة. ومع ذلك، يمكن تقييم موثوق لنضح صعبة. هناك فقط عدد قليل من الطرق التي لا إينفاسيفيلي لقياس التغيرات في الدورة الدموية في الغشاء المخاطي البشري. اثنان من هذه تستخدم ليزر شعاع1،2،،من34، ولكن بطريقة مختلفة. ليزر دوبلر flowmetry (LDF) يجعل من دوبلر استخدام المفتاح shift في ليزر شعاع5،6، بينما على النقيض من البقع واللطخ الليزر التصوير () أسلوب يعتمد على نمط البقع واللطخ ضوء الليزر المستطار لقياس سرعة الدم الحمراء 7من الخلايا.

LDF التدابير إلا في نقطة واحدة، واستنساخه بتوحيد موقف أجهزة الاستشعار مهمة مرغوب فيه لكن من الصعب. وهناك مشكلة أخرى أن التحقيق LDF صغيرة قطرها (1 مم2). قياس في نقاط محددة سلفا قبل جراحة محددة جداً، وقد يكون أعمى لتغييرات الدورة الدموية بعد الجراحة، بينما ذمة أو إزالة الأنسجة، وحركة الأنسجة أو الاختلاس مزروع يسبب تغييرات هامة في الهندسة بعد العملية الجراحية للمتضررين الأنسجة اللينة. قياس المسافة من LDF هو أقل من 1 مم، الذي يحظر استخدام على جبيرة الأسنان مع وجود ثقب محددة سلفا للتحقيق في حالة التغير الحجمي للأنسجة. لسسي لا تتطلب أي أدوات خاصة للتعريب ويمكن قياسها في مجالات عدة سم2. كنتيجة لذلك، يمكن أن يتبع التئام الجروح في جميع أنحاء موقع الجراحية. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن عرض لسسي التروية الدموية في الصور المرمزة في جزء صغير من الثانية، بدقة تصل إلى 20 ميكرو.

يستخدم الجهاز لسسي المعروضة في هذه الورقة معظمها لتطبيقات البحوث الحيوانية حيث دقة عالية في مجالات قياس صغير هو المطلوب. ومع ذلك، نظراً لهيكل وعلم الأنسجة البشرية الغشاء المخاطي الشفوي مختلفة من منطقة إلى منطقة (المرفقة اللثة، اللثة الهامشية، والأغشية المخاطية الدهليزية)، الدورة الدموية هو أيضا غير متجانسة8. ولذلك، قد عالية الدقة بميزة كبيرة على القرار العادي الذي يستخدم عادة في التجارب البشرية.

وتوظف الصك لسسي ليزر غير مرئي (الطول الموجي 785 nm). وتباينت الشعاع هو لإلقاء الضوء على مجال القياس، إنشاء نمط البقع واللطخ. صور كاميرا CCD نمط البقع واللطخ في المنطقة المضاءة. الكاميرا CCD المستخدمة في هذا النظام منطقة تصوير نشطة 1386 x 1034 بكسل وقرارها بين 20-60 ميكرومتر بيكسل تبعاً للحجم من مجال القياس، وعلى الإعداد للبرنامج (منخفضة، متوسطة، عالية). يمكن أن يستغرق الصور بسرعة 16 الإطارات في الثانية، أو حتى أكثر، ما يصل إلى 100 من الإطارات في الثانية، إذا كان يتم تقليل حجم الصورة. ويحسب بالبرنامج المدمج التروية الدموية. أنه يقوم بتحليل التغيرات في نمط البقع واللطخ ويوضحها التباين. التمويه الناجم عن ذلك لون ترميز لإنتاج صورة التروية. ووفقا للنتائج السابقة، يقيم لسسي التروية الدموية للثة مع التكرار وإمكانية تكرار نتائج جيدة9. وهذا يعني أنها أداة موثوقة لرصد التغيرات في دوران الأوعية الدقيقة في الغشاء المخاطي الشفوي في تجارب قصيرة الأجل، بل أيضا أثناء الدراسات الطويلة الأجل لتتبع تطور المرض أو الجرح الشفاء10.

في هذه الورقة، نقدم تقرير حالة سريرية لإثبات أن عالية الدقة المكانية لسسي يجعل من الممكن تكشف عن نمط neovascularization طعم الكولاجين إكسينوجينيك. وعلاوة على ذلك، تبين هذه الحالة أن، نظراً لموثوقيتها العالية، يمكن أن حساسية الكشف عن التباينات الفردية. وهذا مهم كتباين التشريحية محلي كبير وخلفية منهجية مختلفة بين الحالات التي تجعل من الصعب على توحيد التدخل الجراحي في التجارب السريرية لجراحة اللثة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

واستخدمت الأسلوب المبلغ عنها في تجارب سريرية التي منحت الموافقة الأخلاقية من "اللجنة الهنغارية" للتسجيل الصحي ومركز التدريب (رقم الاعتماد: عتيج/034310/2014).

1-الإعداد

  1. التبديل على جهاز الكمبيوتر وأي أجهزة طرفية.
  2. التبديل على الصك لسسي لاستخدامه مع رمز التبديل في اللوحة الخلفية.
  3. تسمح أداة الحارة لمدة 5 دقائق على الأقل. الصك جاهز للقياس عند كل المصابيح في اللوحة الخلفية قد توقفت عن الوميض.
  4. بدء تشغيل البرنامج بواسطة النقر المزدوج فوق رمز البرنامج على سطح المكتب أو من خلال قائمة ابدأ.
  5. انتهى الانتظار حتى الأصفر والمصابيح الخضراء في اللوحة الخلفية توقفت وامض، مما يشير إلى أن الليزر الحارة والتهيئة.
    ملاحظة: عند بدء تشغيل النظام، واحد أحياناً ستطالب لتنفيذ إجراءات التحقق للنظام.

2-نظام التحقق

  1. استخدم المربع المعايرة الموردة. إزالة الغطاء من مربع المعايرة والتخلص منه لتجنب الترسب في تعليق غرواني.
  2. ترك الغطاء لمدة 30 ثانية لتجنب الفقاعات.
  3. وضع الغطاء مرة أخرى على المربع المعايرة.
  4. انقر فوق متقدمة | التحقق | تحقق من أداة.
  5. حدد الروتينية التحقق | المقبل.
  6. تشغيل 90° الرأس وربط مربع المعايرة باستخدام المغناطيس المتكاملة وانقر فوق التالي.
  7. أدخل درجة حرارة الغرفة في مربع النص، حدد درجة مئوية وانقر فوق ابدأ.
  8. انتظر حتى اكتمال المعالج إجراء التحقق.
  9. بعد إجراء تحقق ناجح إغلاق المعالج بالنقر فوق إنهاء.

3-مشارك في إعداد

  1. تأكد من أن يتم إجراء القياس في غرفة التحكم في درجة الحرارة (26 درجة مئوية).
  2. وضع المريض في موقف ضعيف مريحة في كرسي أسنان ثم ضع وسادة فراغ تحت رأسه (الشكل 1).
  3. ترك المريض دون عائق لمدة 15 دقيقة قبل اتخاذ أي قياسات.

4. قياس الصورة دوران الأوعية الدقيقة

  1. في القائمة أدوات ، حدد وانقر فوق محرر المشروع. يفتح نافذة جديدة التي يمكن حفظ الإعدادات شائعة الاستخدام.
  2. في المربع المشاريع، انقر فوق جديد لإنشاء مشروع جديد. أدخل "أبجد"، وانقر فوق موافق.
  3. في المربع مواقع، انقر فوق جديد لإنشاء موقع جديد. أدخل "الأسنان 14" ثم انقر فوق موافق.
  4. تحت لوحة المحتويات 14 الأسنان إضافة "10 سم" كالمسافة المطلوبة العمل عن بعد وأدخل عرض 3 سم وارتفاع 2 سم في المربعين القياس.
  5. تعيين دقة كثافة نقطة إلى عادي ومعدل الإطارات للصور 16/s، وحدد الوقت من القائمة المنسدلة المدة إلى تعيين مدة التسجيل إلى 0:30.
  6. حدد "سجل مع لا في المتوسط" وتعيين معدل التقاط صور ملونة إلى 1 في الثانية.
  7. ثم انقر فوق "تطبيق" و "موافق" لحفظ معلمات المشروع.
  8. في القائمة ملف ، حدد وانقر فوق جديد من تسجيل. سيتم فتح "نافذة الصورة" الجديدة وسيتم عرض لوحة الإعداد.
  9. تحت الإعداد تسجيل، حدد "أبجد" المشروع و "الأسنان 14" 4.9. الموقع.
  10. فتح القائمة المنسدلة هذا الموضوع ، انقر فوق جديد في مربع الحوار تحديد الموضوع ، وقم بإدخال اسم المريض.
  11. انقر فوق موافق، ثم أدخل اسماً للتسجيل في حقل الاسم Rec : مثلاً، يوم 1 (الأيام المنقضية بعد العملية) واسم المشغل في ميدان المشغل .
  12. قبل البدء في قياس الصورة دوران الأوعية الدقيقة وضغط الدم والنبض تدبير المريض.
  13. إخلاء الهواء من وسادة الفراغ لإصلاح رأس المريض في وضع مناسب للمنطقة الخاضعة للتحقيق.
  14. أطلب من المريض أن يفتح فمه.
  15. التراجع عن الشفاه بلطف باثنين من المرايا الأسنان (الشكل 1).
  16. ضبط رئيس الصك موازية لمنطقة المقاسة اللثة. مرئية مضمنة (650 nm) مؤشر الليزر يسهل تحديد المواقع للتصوير بالنسبة إلى فم المريض.
  17. ضبط عامل المسافة إلى 10 سم بنقل الصك بالنسبة للأنسجة. تقاس المسافة باستمرار بالجهاز لسسي ويتم عرضها بالبرنامج كقيمة عامل المسافة المقاسة تحت الإعداد الصورة.
  18. الإيعاز إلى هذا الموضوع بالبقاء لا يزال خلال مدة القياس.
  19. انقر فوق الزر السجل لبدء التسجيل. الآن تغيير لون إطار الصورة إلى اللون الأحمر، مشيراً إلى أن التسجيل في التقدم. يتم استبدال لوحة الإعداد لوحة تسجيل. توقف تسجيل تلقائياً بعد 30 ثانية. عند الانتهاء من التسجيل، يتم استبدال لون التغييرات "نافذة الصورة" إلى اللون الأزرق ولوحة تسجيل فريق الاستعراض.
  20. إزالة مرايا الأسنان والسماح للمريض إغلاق فمه وابتلاع.
  21. قم بالتبديل مرة أخرى إلى الصورة الحية عن طريق الضغط على زر استئناف التسجيل .
  22. كرر الخطوات من 4.14 إلى 4.21 مرتين.
  23. قم بإغلاق الملف. يتم حفظ البيانات تلقائياً.
  24. قياس ضغط الدم والنبض بعد القياسات لسسي.

5-تحليل دون اتصال

  1. تحليل الصور لسسي باستخدام البرمجيات المضمنة. انتقل إلى طريقة عرض الصورة أو تقسيم (الشكل 2).
  2. تحديد المناطق ذات الاهتمام (ROI). ملاحظة: بلغ متوسط قيم بكسل داخل عائد نضح ويعرف قيمة العائد على الاستثمار، أعرب في قيمة عشوائية تسمى وحدة نضح البقع واللطخ الليزر () تدفق الدم.
  3. حدد الشكل عائد الاستثمار المطلوب داخل لوح أدوات دوروا على اليمين.
  4. حدد خيار تطبيق في لوح أدوات العائد على الاستثمار، الذي ينطبق على عمليات دوروا على جميع الصور من التسجيل.
  5. رسم العائد على الاستثمار عن طريق النقر والضغط على زر الماوس في الصورة كثافة والاسترسال العائد على الاستثمار إلى الحجم المطلوب، والإفراج عن الماوس زر (انقر فوق وانقر نقراً مزدوجاً فوق لحر رويس). ضبط الموضع من العائد على الاستثمار أو تغيير حجم أو تدوير، إذا لزم الأمر.
  6. كرر الخطوات من 5، 3. إلى 5.5 عدة مرات حسب العدد المطلوب من رويس (الشكل 3).
  7. تحديد فترات زمنية للفائدة (TOI). وهذا يسمح للمتوسط التروية في عائد على مدى فترة محددة من الزمن (الشكل 2).
  8. انتقل إلى طريقة عرض الرسم البياني أو انقسام. حدد الزر أداة "إضافة توعي".
  9. انقر مع الاستمرار على الرسم البياني في الموضع حيث تريد توعي البدء واسحب المؤشر إلى الموضع الغاية المنشودة. ثم حرر زر الماوس.
  10. تصدير البيانات من الجدول القيمة الوسطية لمزيد من المعالجة.
  11. إنشاء منحنيات تدفق الدم بمناسبة برمجيات المستخدمة للتحليل الإحصائي.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

فيستيبولوبلاستي جراحة اللثة إلى دهليز الفم، يهدف إلى زيادة عمق الدهليزية، منطقة اللثة الكيراتينيه وسمك الأنسجة الرخوة لجماليات المحسنة ووظيفة. انقسام واق من سمك رفرف جنبا إلى جنب مع مصفوفة الكولاجين إجراء فيستيبولوبلاستي المستخدمة بشكل متكرر. مصفوفة إكسينوجينيك الكولاجين بديل قابل للتطبيق للاختلاس اللثة الغازي لزيادة كمية اللثة الكيراتينيه11،،من1213؛ ومع ذلك، لا تتوفر بيانات عن اتجاه عودة التوعي الاختلاس وكيف يؤثر على دوران الأوعية الدقيقة للأنسجة المحيطة بها. فهم هذه الآليات قد ييسر تصميم شق في جراحة اللثة ورفرف السليم.

17 سنة ذكر مريض مع عرض غير كاف في لثة الكيراتينيه في بريمولار الأولى في الفك الأعلى عومل من فيستيبولوبلاستي، باستخدام رفرف سمك واق من انقسام جنبا إلى جنب مع مصفوفة الكولاجين. صور فموية (مأخوذة بكاميرا صور) وأخذت قياسات التدفق (BF) الدم بواسطة لسسي قبل فيستيبولوبلاستي (خط الأساس) فضلا عن 1، 2، 3، 4، 5، 7، 9، 11، 14، 21، 27 يوما و 2، 3، 4، 5، 6 و 12 شهرا بعد. وتم تقييم ضغط الدم والنبض قبل وبعد كل قياس.

أثناء التحليل دون اتصال، وقد تحددت رويس متعددة في منطقة الغشاء المخاطي المعزز؛ بعضها في منطقة الاختلاس وغيرها في الغشاء المخاطي المحيطة، تعرف بأنها مناطق 'القريبة'. كما هو مبين في الشكل 3، 'القريبة' والاختلاس كذلك تقسيم المناطق مناطق اعتماداً على المسافة من المركز للفساد مزروع، تم وضع علامة كمنطقة و في الصورة. تم تعريف مناطق A و B في المنطقة 'القريبة' ومناطق جيم ودال وهاء في منطقة الاختلاس. وكان كل من هذه المناطق محدد الجوانب الأربعة بشكل منفصل في كل من الفساد (مسيل والقاصي، قمي والاكليليه). واعتبرت كل طلقة 30 ثانية توعي (الشكل 2). تم تصدير البيانات في كل من العائد على الاستثمار وتوعي إلى برنامج جدول بيانات. وشيدت منحنيات تدفق الدم بمناسبة برمجيات المستخدمة للتحليل الإحصائي.

لم يطرأ أي تغيير كبير في متوسط الضغط الشرياني (خريطة) خلال التجربة سنة واحدة، أما في الخريطة قبل أو بعد القياسات تدفق الدم في الدورة الواحدة. ويبين الشكل 4 صور ملونة وصورة كثافة وصورة نضح للثة تعمل الممثل أيام دراستنا. وخلال الإغلاق رفرف كاملة بعد العملية الجراحية في الأسبوع الأول، طبقة سميكة من فيبرينوجين على مجال المطعمة، وحمامي خفيف وتورم في اللثة المحيطة بها كانت مرئية. وقد أظهرت الصور نضح الدم الاسكيمية في المنطقة تعمل والاحتقان في المناطق 'القريبة'. من يوم 14، كانت منطقة المطعمة سريرياً حمامية، بالتوازي مع الاحتقان الشديد لاحظت في الصور التروية الدموية. الشهر الثالث بعد إدراج الفساد، تلتئم الجرح، ونضح اللثة كانت قريبة من مستويات التداول قبل الجراحة.

يبين الشكل 5 صورة كثافة واضحة ونضح الرسم البياني للصورة بأكملها. ذروة المفاجئ في رسم بياني يشير إلى الحركة بالمريض. وكرر القياس على الفور، بعد التأكد من أن المريض في وضع مريح. وتظهر التغييرات في فرنك بلجيكي في مناطق مختلفة داخل الفساد وفي مناطق 'القريبة' في الشكل 6. ومن الشائع في جميع المنحنيات أن من الشهر الرابع، تدفق الدم لم يغير أي زيادة حتى نهاية التحقيق. تدفق الدم متوسط هذه الفترة يمكن استخدامها كقيمة تدفق دم يستريح للأنسجة الجديدة والتغير العشوائي بين النقاط الزمنية سمحت لنا بحساب عنصر الوقت على أساس الفرق لكل عائد الاستثمار على التوالي، باستخدام نموذج مختلط خطي. يمكن حساب الفرق يمكن كشفها الحد الأدنى ثم لتحديد تغيير حقيقي (مع ثقة 95 ٪) بين النقاط الزمنية خلال فترة الشفاء (قبل الشهر الرابع) لتحديد في هايبريميك والمرحلة الدماغية. الخصائص الأساسية للمنحنيات متشابهة في رويس كل داخل الاختلاس، بدءاً بمرحلة الدماغية تليها مرحلة هايبريميك. ومع ذلك، كان طول هاتين المرحلتين المختلفة (الجدول 1). الاسكيمية كانت أطول (7-9 أيام) في الوسط، وفي جميع المناطق الاكليلية، مع أواخر شظوي بدءاً من بين 11 و 27 يوما. في مناطق أخرى للاختلاس، استمر الاسكيمية فقط من 4 – 7 أيام والاحتقان بدأت في وقت سابق، بين 7 و 21 يوما.

منحنيات فرنك بلجيكي المناطق على جانبي مختلفة الاختلاس قد السمات الفريدة (الشكل 6). وكان كل أربع مناطق في الجانب قمي، المنحنيات تدفق الدم مماثلة. في الجانب الاكليلية، كان استعاد التروية في منطقة الخارجي يتجاوز في المناطق الداخلية، خلافا للجانب مسيل والبعيدة. في كلا الجانبين الأفقي، فرنك بلجيكي زاد أولاً في المنطقة ج، ثم في منطقة د، تليها زيادة فرنك بلجيكي في المنطقة ه وأخيراً في الوسط منطقة f. في المناطق للأغشية المخاطية المحيطة بها (منطقة A و B) لوحظ لا الاسكيمية كبيرة. بدلاً من ذلك، لوحظ شظوي اختلاف حجم ومدى في الجوانب المختلفة.

هناك اثنين من النقاط الزمنية عند قيمة فرنك بلجيكي لا تتطابق مع الخصائص العامة لمنحنى فرنك بلجيكي. في يوم 9، كان هناك انخفاض مفاجئ في معظم المناطق، وأساساً في مناطق 'القريبة' الجانب قمي والقاصي. أنه لا يمكن القول بيقين أن هذا كان خطأ قياس، كما أخذ القياسات لا في السابق وفي اليوم التالي. ومع ذلك، وفقا لمذكرة في تقرير القياس، تراجع حظيرة الشدقى مع الكثير من الضغوط بالمشغل، أدى إلى انخفاض في فرنك بلجيكي. وهذا يجعل الشعور بالنظر أن أساسا تداول الجانبين القاصي وقمي قد تأثرت بسحب الخد. اليوم 182 (6 أشهر)، بسبب فترات أطول بين أوقات القياس، قد نسي المريض للحفاظ على القيود المتفق عليها قبل أخذ القياس. النزيف من اللثة الهامشية على الصورة الملونة (الشكل 6) يشير إلى تنظيف الأسنان القاسية قبل القياس. وفي الوقت نفسه، المريض خضع لعلاج الأسنان، أيضا، وأنه يستخدم الأشرطة المطاطية إينتيرماكسيلاري. كل عوامل يمكن زيادة كبيرة فرنك بلجيكي14،15، حيث تكررت القياس في وقت لاحق وفي ظل الظروف التي تسيطر عليها بعناية أكبر.

Figure 1
رقم 1: إعداد المريض والإعداد "لسسي تجريبية" لقياس تدفق الدم في منطقة تديرها. يتم سحب الشفاه بمرايا الأسنان. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 2
رقم 2: تقسيم العرض (خليط من عرض الصور وعرض الرسم البياني) لتسجيل نموذجية لتدفق الدم اللثة في المنطقة المعالجة. صورة التروية (عرض الفرعي الأيمن العلوي) تمثيل مرمزة التروية الدموية في اللثة. مناطق نضح عالية تظهر باللون الأحمر بينما المناطق من انخفاض التروية الأزرق. نطاق اللون من الصور نضح يناظر 0-450؛ وكان تعيين تجانس إلى 10. يتم إنشاء صورة كثافة (عرض الفرعية اليمنى السفلي) على ضوء الليزر المستطار المجموع. أنها تتوافق تماما مع الصورة نضح ومفيدة للتوجيه وتحديد التفاصيل في الصورة التروية. يتم تعريف المناطق ذات الاهتمام (ROI) دائماً في الصورة كثافة. ويبين الرسم البياني (اللوحة اليسرى العلوية) آثار التروية الدموية في الوقت الحقيقي لكل عائد الاستثمار في التسجيل. يمكن استخدام خانات الاختيار إلى اليسار لتحديد أي آثار لإظهار. وترد ثلاثة قياسات متتالية على الرسم البياني. كل 30 واعتبرت النار s توعي. يتم عرض قيمة يعني جدول يبين قيم نضح يعني كل عائد الاستثمار وتوعي أيضا في طريقة العرض انقسام (اللوحة اليسرى السفلي). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 3
الشكل 3: المناطق ذات الاهتمام (ROI) المعرفة داخل منطقة اللثة النظر في كثافة الصورة. منطقة A و B في منطقة 'الضواحي'، بينما المنطقة جيم، دال وهاء في الاختلاس في تقليل المسافات من المركز الفساد، تم وضع علامة كمنطقة يقع "منطقة واو" على سطح الشفاه الدهليزية. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 4
الشكل 4: صور الممثل (السطر العلوي)، لسسي كثافة الصورة (خط المنتصف) ولسسي نضح صورة (الخط السفلي) اللثة تشغيلها. الصور تمثل الدولة قبل الجراحة والتروية، والجرح الشفاء ونضح 1، 4، 7، 14، 21، 27 و 98 يوما بعد. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 5
الرقم 5: تقسيم عرض التسجيل دون المستوى الأمثل. الصورة غير واضحة كثافة والقمم البعيدة في الرسم البياني نتيجة الإعداد غير صحيحة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 6
رقم 6: مؤامرة مبعثر من فرنك بلجيكي على مر الزمن في التاجي (أ)، مسيل (ب)، البعيدة (ج) قمي (د) الجانب ومن الفساد. كان يصور الجزء المركزي من الابتزاز (منطقة F) في جميع الرسوم البيانية ليكون بمثابة مرجع للمناطق الخارجية أكثر. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الجانب المنطقة نهاية الاسكيمية بدء شظوي نهاية شظوي
كرونال ج 9 27 27
كرونال د 9 21 27
كرونال ه 7 11 98
وسط و 9 11 98
مسيل ج 5 21 27
ميسيال د 5 11 61
مسيل ه 7 11 61
القاصي ج 5 11 27
القاصي د 4 7 98
القاصي ه 4 11 98
قمي ج 4 11 27
قمي د 5 11 61
قمي ه 5 11 61

الجدول 1: الإطار الزمني للمرحلة الدماغية وهايبريميك في مختلف المناطق في الفساد، في أيام

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

وكان الهدف من هذه الدراسة إدخال تقنية جديدة لرصد neovascularization من طعم في اللثة البشرية. ووفقا للنتائج السابقة، يقيم لسسي التروية الدموية للثة مع حسن التكرار وإمكانية تكرار نتائج9، عند الوفاء بالتنفيذ الدقيق لكل خطوة بروتوكول المخطط كشرط حاسم. ويعتبر لسسي تقنية نصف كمية التي تتطلب المعايرة دورياً ضمان الدقة والاستقرار. درجة حرارة الغرفة أثناء التحقق، يجب أن تقاس بأعلى دقة ممكنة، لأنه يتم استخدام هذه القيمة من قبل خوارزمية التحقق لحساب التروية.

طريقة لسسي حساسة للغاية للعمل عن بعد الإعداد وحركة القطع الأثرية، وكذلك. في هذه الدراسة، تم إصلاح العمل عن بعد في 10 سم. وكان مجال قياس 2.7 سم × 2 سم، الذي يتوافق مع منطقة واسعة اللثة أسنان حوالي ثلاثة. وكان معدل الإطار الفعال الصور 16/s و s/صورة 0.06 كما يدفع النبض الشرياني نابض التغيرات في دوران الأوعية الدقيقة اللثة9، الذي يجب أن يكون متوسط من التسجيل. قللت من خطر حركة المصنوعات اليدوية، والتصوير السريع جداً. ومع ذلك، في حالة الإعدادات غير صحيحة أو حركات المريض، التسجيل ينبغي أن توقف وتتكرر تحت الظروف المثلى.

شارك اثنين من المشغلين في كل قياس: واحد يعدل الرأس لسسي وتسيطر الكمبيوتر بينما الآخر تراجع عن لسان المريض. في هذه الدراسة، ثلاثة متكررة أجريت قياسات في كل دورة، أخذ كل 30 ثانية. منذ قياسات تنطوي دائماً على نوع ما من تهيج بالانسجة الرخوة بسبب تراجع حتمي الشفاه والخدين، التي تزعج دوران الأوعية الدقيقة للثة، تحدث زيادة في خطأ عشوائي. هذا الاختلاف بين اليوم، ولكن يمكن التقليل من بتكرار عملية قياس كامل، أي، بإعادة فتح الفم، وتراجعه الأنسجة اللينة مرة أخرى، إعادة تحديد موضع الكاميرا وإعادة تحديد رويس في البرنامج9.

وأظهرت اللثة دوران الأوعية الدقيقة عالية التباين الإقليمي8. ولذلك، أسلوب مثل الذي يقيس تدفق الدم في منطقة واسعة له ميزة كبيرة على تقنيات القياس نقطة واحدة مثل LDF. في هذه الدراسة، غطت منطقة القياس الميدان كله الجراحية. مجال قياس واسع سمح لنا بمقارنة re-أو نيوفاسكولاريزيشن في مختلف المناطق داخل منطقة الجرحى في دراستنا. خلافا لقوات الدفاع المحلية، حيث يتم إصلاح المسبار بالدعامات ملفقة قبل الجراحة، وفي حالة الأسلوب لسسي، ليست هناك حاجة لتحديد المنطقة التي سينظر فيها في وقت مبكر. الهدف الأساسي للرصد التئام الجروح في الطب شخصية هو التعرف على الأنماط غير متوقع في أي مكان حول الجرح أو رفرف. وبالإضافة إلى ذلك، التغييرات بعد العملية الجراحية في هندسة الأنسجة، والناجمة عن زيادة الأنسجة اللينة أو الصلبة وذمة سيجعل الدعامات الجاهزة عديمة الفائدة بعد الجراحة. للمساعدة في تقييم البصرية، تمهيد تشغيل أثناء التسجيل وتم تعيين قيمة تجانس إلى 10. وهذا يعني أن نضح كان بلغ أكثر من عشرة صور لمظهر الصورة نضح ومن أجل تقليل الضوضاء الخلفية. ومع ذلك، تجانس تأثير مرئي فقط ولا تؤثر على القيم الفعلية نضح مسجل.

وقد تدفق الدم اللثة اختلاف زمني عالية كذلك. وهذا قد تكون مرتبطة بالعديد من العوامل الفسيولوجية التي تصاحب الحياة اليومية، مثل التهاب اللثة16،،من1718، إيقاع circadian19،20من ضغط الدم، ودرجة الحرارة16 , 21، الضغط الميكانيكي8،22،،من2324، الأسنان الفرشاة14،،من1725 أو تقويم قوة15 . ولذلك، التوحيد وتحقيق الاستقرار لهذه العوامل إلزامية للقياسات المتابعة الناجحة.

الأساليب المستخدمة في وقت سابق للتحقيق في الفساد الأوعية الدموية الغازية عاليا، مما يعني فرض قيود كبيرة على قياس النقاط الزمنية أثناء تضميد الجراح، ولا سيما في الدراسات الإنسانية26،،من2728، 29،30،،من3132. كما أن لديها قيود من حيث قياس الاختلافات الإقليمية كمياً. لدينا9،الدراسات السابقة10 قد أثبتت بالفعل وثوقية عالية من لسسي في التجارب السريرية، وتبين أن تكون مفيدة لتحديد الوقت لشفاء الأنسجة اللينة للفرد بعد قلع الأسنان من أجل تحسين زرع تنسيب33. في هذه الدراسة، أظهرت منطقة الجرح مشمولة بطعم الكولاجين إكسينوجينيك نيوفاسكولاريزيشن ممتازة، كما في اليومال 11 بعد العملية الجراحية كافة المناطق داخل الاختلاس يتحقق مستوى تدفق الدم كحد أقصى. ومع ذلك، يمكن افتراض أن الاختلاس الكولاجين سلوغيد أو كان ريسوربيد بيوم 11 ونحن فعلا قياس عودة التوعي السرير المتلقية. بالإضافة إلى الميزة غير الغازية لها، سمة خاصة أخرى من لسسي قدرة على تميز منحنيات ضخه في مناطق مختلفة من الابتزاز خلال التأسيس على المستوى الفردي. خصائص المركزي neovascularization الفساد متشابهة إلى الملاحظات السابقة في علم الأنسجة30. وهذا يوحي بأن عودة التوعي الاختلاس يحدث ليس فقط من الضفيرة الوعائية بيريوستيل ولكن أيضا من الهامش الجرح.

وضوح التجربة المقدمة تبين أن عودة التوعي من طعم يمكن متابعتها إلى إذا اتبعت كل خطوة تماما. ومع ذلك، اليوم 182، غير متوافقة مع إعداد المريض وتعليمه أدت إلى زيادة كبيرة في فرنك بلجيكي.

لسسي يستخدم على نطاق واسع لكامل-ميدان التصوير من بنية الأوعية الدموية وما يرتبط بها من تدفق الدم في الأنسجة الأخرى، مثل في ال34،الشبكية35،7،الجلد36 و الدماغ37،38 . التطبيقات السريرية الواعدة من لسسي يتم حرق الجرح التقييم39،40، تقييم للوحات41 وتدفق الدم الدماغي الموضعية رصد42. ويبدو أن هناك قيودا خطيرة على قياسات اللثة على نطاق واسع بواسطة لسسي على البشر. هذا الأداة قوية للغاية والثقيلة. الصعوبات الرئيسية التي تنشأ فيما يتصل بالكاميرا الوثائق، التي لديها دقة منخفضة، ويقع بضعة سنتيمترات بعيداً عن الكاميرا القياس. هذه الميزات تجعل من الصعب على تحديد المناطق التي تهم مباشرة على صور ملونة. حجم رأس آلة لسسي يمنع إطلاق النار داخل تجويف الفم. ولذلك، لا يمكن قياس المجالات التي تكون غير مرئية مباشرة. لقد أظهرنا في وقت سابق أن استخدام نهج غير مباشرة مع مرآة التصوير فوتوغرافي قد تخدم ك أسلوب بديل9. ومع ذلك، باستخدام مرآة ينطوي على المزيد من القطع الأثرية الحركة ولسسي الحساسة، يجعل من الصعب أكثر لالتقاط صورة عمودي ويقلل المسافة المحورية. عندما لا يتم القبض على منطقة يقاس عمودياً، قد تكون قيمة تدفق الدم الصحيح9،39، ولكن تحديد المنطقة في الصورة ما زال معقداً بسبب التواء 3D.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgments

تم إنجاز هذا العمل في جزء من الدعم الذي يقدمه "صندوق البحوث العلمية الهنغارية" تحت K112364 عدد المنح، بالوزارة الهنغارية للقدرات البشرية، و "برنامج التميز في التعليم العالي" لجامعة سيملويس، "وحدة أبحاث العلاج"، الوطني للبحوث والتنمية والابتكار مكتب KFI_16-1-2017-0409.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
PeriCam PSI-HR Perimed AB, Stockholm, Sweden The PeriCam PSI System is an imaging system based on LASCA technology (LAser Speckle Contrast Analysis). The system measures superficial blood perfusion over large areas at fast capture rates. This makes it ideal for investigations of both the spatial and temporal dynamics of microcirculation in almost any tissue.
PIMSoft Perimed AB, Stockholm, Sweden PIMSoft is a data acquisition and analysis software, intended for use together with the PeriCam PSI System and the PeriScan PIM 3 System, for measurement and imaging of superficial blood perfusion.
Geistlich Mucograft Geistlich, Switzerland It's a unique 3D collagne matrix designed specifically for soft tissue regeneration. It's indicated for the gain of keratinized tissue and recession coverage.
Omron M4 Omron Healthcare Inc., Kyoto, Japan Blood pressure monitor, which gives accurate readings.
Nikon D5200 Nikon Corportation, Tokyo, Japan Taking intra oral photos
MS Excel Microsoft Corporation, Redmond, Washington, USA The software used for data management
IBM SPSS Statistics 25 IBM Corp., Armonk, NY, USA The software used for statistical analysis

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Nakamoto, T., et al. Two-Dimensional Real-Time Blood Flow and Temperature of Soft Tissue Around Maxillary Anterior Implants. Implant Dentistry. 21 (6), 522-527 (2012).
  2. Kajiwara, N., et al. Soft tissue biological response to zirconia and metal implant abutments compared with natural tooth: microcirculation monitoring as a novel bioindicator. Implant Dentistry. 24 (1), 37-41 (2015).
  3. Kemppainen, P., Forster, C., Handwerker, H. O. The importance of stimulus site and intensity in differences of pain-induced vascular reflexes in human orofacial regions. Pain. 91 (3), 331-338 (2001).
  4. Kemppainen, P., Avellan, N. L., Handwerker, H. O., Forster, C. Differences between tooth stimulation and capsaicin-induced neurogenic vasodilatation in human gingiva. Journal of Dental Research. 82 (4), 303-307 (2003).
  5. Riva, C., Ross, B., Benedek, G. B. Laser Doppler measurements of blood flow in capillary tubes and retinal arteries. Investigative ophthalmology. 11 (11), 936-944 (1972).
  6. Humeau, A., Steenbergen, W., Nilsson, H., Stromberg, T. Laser Doppler perfusion monitoring and imaging: novel approaches. Medical & Biological Engineering & Computing. 45 (5), 421-435 (2007).
  7. Briers, J. D., Webster, S. Laser speckle contrast analysis (LASCA): a nonscanning, full-field technique for monitoring capillary blood flow. Journal of Biomedical Optics. 1 (2), 174-179 (1996).
  8. Fazekas, R., et al. Functional characterization of collaterals in the human gingiva by laser speckle contrast imaging. Microcirculation. 25 (3), 12446 (2018).
  9. Molnar, E., Fazekas, R., Lohinai, Z., Toth, Z., Vag, J. Assessment of the test-retest reliability of human gingival blood flow measurements by Laser Speckle Contrast Imaging in a healthy cohort. Microcirculation. 25 (2), (2018).
  10. Molnar, E., et al. Evaluation of Laser Speckle Contrast Imaging for the Assessment of Oral Mucosal Blood Flow following Periodontal Plastic Surgery: An Exploratory Study. BioMed Research International. 2017, 4042902 (2017).
  11. Sanz, M., Lorenzo, R., Aranda, J. J., Martin, C., Orsini, M. Clinical evaluation of a new collagen matrix (Mucograft prototype) to enhance the width of keratinized tissue in patients with fixed prosthetic restorations: a randomized prospective clinical trial. Journal of Clinical Periodontology. 36 (10), 868-876 (2009).
  12. Nevins, M., Nevins, M. L., Kim, S. W., Schupbach, P., Kim, D. M. The use of mucograft collagen matrix to augment the zone of keratinized tissue around teeth: a pilot study. The International Journal of Periodontics and Restorative Dentistry. 31 (4), 367-373 (2011).
  13. Lorenzo, R., Garcia, V., Orsini, M., Martin, C., Sanz, M. Clinical efficacy of a xenogeneic collagen matrix in augmenting keratinized mucosa around implants: a randomized controlled prospective clinical trial. Clinical Oral Implants Research. 23 (3), 316-324 (2012).
  14. Perry, D. A., McDowell, J., Goodis, H. E. Gingival microcirculation response to tooth brushing measured by laser Doppler flowmetry. Journal of Periodontology. 68 (10), 990-995 (1997).
  15. Yamaguchi, K., Nanda, R. S., Kawata, T. Effect of orthodontic forces on blood flow in human gingiva. Angle Orthodontist. 61 (3), 193-203 (1991).
  16. Molnár, E., et al. Assessment of heat provocation tests on the human gingiva: the effect of periodontal disease and smoking. Acta Physiologica Hungarica. 102 (2), 176-188 (2015).
  17. Gleissner, C., Kempski, O., Peylo, S., Glatzel, J. H., Willershausen, B. Local gingival blood flow at healthy and inflamed sites measured by laser Doppler flowmetry. Journal of Periodontology. 77 (10), 1762-1771 (2006).
  18. Hinrichs, J. E., Jarzembinski, C., Hardie, N., Aeppli, D. Intrasulcular laser Doppler readings before and after root planing. Journal of Clinical Periodontology. 22 (11), 817-823 (1995).
  19. Svalestad, J., Hellem, S., Vaagbo, G., Irgens, A., Thorsen, E. Reproducibility of transcutaneous oximetry and laser Doppler flowmetry in facial skin and gingival tissue. Microvascular Research. 79 (1), 29-33 (2010).
  20. Sasano, T., Kuriwada, S., Sanjo, D. Arterial blood pressure regulation of pulpal blood flow as determined by laser Doppler. Journal of Dental Research. 68 (5), 791-795 (1989).
  21. Ikawa, M., Ikawa, K., Horiuchi, H. The effects of thermal and mechanical stimulation on blood flow in healthy and inflamed gingiva in man. Archives of Oral Biology. 43 (2), 127-132 (1998).
  22. Baab, D. A., Oberg, P. A., Holloway, G. A. Gingival blood flow measured with a laser Doppler flowmeter. Journal of Periodontal Research. 21 (1), 73-85 (1986).
  23. Fazekas, A., Csempesz, F., Csabai, Z., Vág, J. Effects of pre-soaked retraction cords on the microcirculation of the human gingival margin. Operative Dentistry. 27 (4), 343-348 (2002).
  24. Csillag, M., Nyiri, G., Vag, J., Fazekas, A. Dose-related effects of epinephrine on human gingival blood flow and crevicular fluid production used as a soaking solution for chemo-mechanical tissue retraction. Journal of Prosthetic Dentistry. 97 (1), 6-11 (2007).
  25. Tanaka, M., Hanioka, T., Kishimoto, M., Shizukuishi, S. Effect of mechanical toothbrush stimulation on gingival microcirculatory functions in inflamed gingiva of dogs. Journal of Clinical Periodontology. 25 (7), 561-565 (1998).
  26. Rothamel, D., et al. Biodegradation pattern and tissue integration of native and cross-linked porcine collagen soft tissue augmentation matrices - an experimental study in the rat. Head & Face Medicine. 10, 10 (2014).
  27. Schwarz, F., Rothamel, D., Herten, M., Sager, M., Becker, J. Angiogenesis pattern of native and cross-linked collagen membranes: an immunohistochemical study in the rat. Clinical Oral Implants Research. 17 (4), 403-409 (2006).
  28. Vergara, J. A., Quinones, C. R., Nasjleti, C. E., Caffesse, R. G. Vascular response to guided tissue regeneration procedures using nonresorbable and bioabsorbable membranes in dogs. Journal of Periodontology. 68 (3), 217-224 (1997).
  29. Oliver, R. C., Loe, H., Karring, T. Microscopic evaluation of the healing and revascularization of free gingival grafts. Journal of Periodontal Research. 3 (2), 84-95 (1968).
  30. Janson, W. A., Ruben, M. P., Kramer, G. M., Bloom, A. A., Turner, H. Development of the blood supply to split-thickness free ginival autografts. Journal of Periodontology. 40 (12), 707-716 (1969).
  31. Mormann, W., Bernimoulin, J. P., Schmid, M. O. Fluorescein angiography of free gingival autografts. Journal of Clinical Periodontology. 2 (4), 177-189 (1975).
  32. Busschop, J., de Boever, J., Schautteet, H. Revascularization of gingival autografts placed on different receptor beds. A fluoroangiographic study. Journal of Clinical Periodontology. 10 (3), 327-332 (1983).
  33. Fazekas, R., et al. A proposed method for assessing the appropriate timing of early implant placements: a case report. Journal of Oral Implantology. , (2018).
  34. Briers, J. D., Fercher, A. F. Retinal blood-flow visualization by means of laser speckle photography. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 22 (2), 255-259 (1982).
  35. Srienc, A. I., Kurth-Nelson, Z. L., Newman, E. A. Imaging retinal blood flow with laser speckle flowmetry. Front Neuroenergetics. 2, (2010).
  36. Choi, B., Kang, N. M., Nelson, J. S. Laser speckle imaging for monitoring blood flow dynamics in the in vivo rodent dorsal skin fold model. Microvascular Research. 68 (2), 143-146 (2004).
  37. Ayata, C., et al. Laser speckle flowmetry for the study of cerebrovascular physiology in normal and ischemic mouse cortex. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 24 (7), 744-755 (2004).
  38. Armitage, G. A., Todd, K. G., Shuaib, A., Winship, I. R. Laser speckle contrast imaging of collateral blood flow during acute ischemic stroke. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 30 (8), 1432-1436 (2010).
  39. Lindahl, F., Tesselaar, E., Sjoberg, F. Assessing paediatric scald injuries using Laser Speckle Contrast Imaging. Burns. 39 (4), 662-666 (2013).
  40. Mirdell, R., Iredahl, F., Sjoberg, F., Farnebo, S., Tesselaar, E. Microvascular blood flow in scalds in children and its relation to duration of wound healing: A study using laser speckle contrast imaging. Burns. , (2016).
  41. Zotterman, J., Bergkvist, M., Iredahl, F., Tesselaar, E., Farnebo, S. Monitoring of partial and full venous outflow obstruction in a porcine flap model using laser speckle contrast imaging. Journal of Plastic, Reconstructive & Aesthetic Surgery. 69 (7), 936-943 (2016).
  42. Hecht, N., Woitzik, J., Dreier, J. P., Vajkoczy, P. Intraoperative monitoring of cerebral blood flow by laser speckle contrast analysis. Neurosurgical Focus. 27 (4), E11 (2009).

Tags

الطب، 143 قضية، ليزر البقع واللطخ التباين التصوير، دوران الأوعية الدقيقة، وتدفق الدم، والغشاء المخاطي للفم، اللثة، جراحة اللثة، فيستيبولوبلاستي، الاختلاس إكسينوجينيك، التأسيس، والتئام الجروح
نهج جديد لرصد الفساد نيوفاسكولاريزيشن في اللثة البشرية
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Fazekas, R., Molnár, E.,More

Fazekas, R., Molnár, E., Mikecs, B., Lohinai, Z., Vág, J. A Novel Approach to Monitoring Graft Neovascularization in the Human Gingiva. J. Vis. Exp. (143), e58535, doi:10.3791/58535 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter