Summary
Anastomotiske lækage eller opdeling efter kirurgi er en væsentlig årsag til postoperativ morbiditet og mortalitet. Vores kirurgi til at skabe en Colon anastomose er en pålidelig og reproducerbar metode til at studere anastomoser helbredende mekanismer.
Abstract
Tarm anastomoser er almindeligvis udføres i både elektiv og emergent operationer. Selv så, Anastomotiske lækager er et stærkt frygtede komplikationer af Colon kirurgi og kan forekomme i op til 26% af kirurgiske anastomoser med dødeligheden er op til 39% for patienter med sådan en lækage. I øjeblikket er der stadig en mangel på data, der beskriver de cellulære mekanismer af Anastomotiske healing. Udarbejde forebyggende strategier og behandlingsmodaliteter for Anastomotiske lækage kunne være stærkt forstærkede ved en bedre forståelse af passende Anastomotiske healing.
En murine model er ideel som tidligere undersøgelser har vist, at den murine anastomose er den mest klinisk ligner den menneskelige tilfælde sammenlignet med andre dyremodeller. Vi tilbyder en let at reproducere murine model af Colon anastomose i mus, der giver mulighed for yderligere illustration af Anastomotiske healing.
Introduction
En meget frygtede komplikation af kirurgisk anastomose af tarmen er Anastomotiske opdeling eller lækage. Anastomotiske lækage, som medfører spild af intraluminal indholdet i bughulen, er livstruende og kan hurtigt føre til intra-abdominalt sepsis; chok satser varierer fra 0,3% til 5,5% efter tyndtarmen anastomoser, og stige til mellem 0,5% og 26% for Colon anastomoser1,2. Dødelighed efter utætheder kan være så højt som 39% på grund af sepsis og hurtig progression til døden efter intraabdominal forurening3hurtig symptomdebut. Forebyggende strategier og behandlingsmodaliteter er i øjeblikket baseret på Patofysiologi, der ikke er fuldt forstået.
I øjeblikket, er Anastomotiske healing ofte sammenlignet med de mere bredt studerede kutant sår healing, som viser sig for at være en relativt dårlig faksimile. Helbredelse forekommer i en serie af overlappende faser, begyndende med den første mellemliggende fase. I løbet af dage 0-4 efter oprettelsen af tarm anastomose, er den mellemliggende fase defineret ved en akut inflammatorisk reaktion, der rydder såret af celleaffald. Dernæst over dage 3-4, kendetegner fibroblastic spredning og produktion af kollagen fibrophasia fasen. Endelig, efter dag 10, en langvarig periode med kollagen remodellering er kendt som modning fasen. Det er vigtigt at bemærke, at Anastomotiske styrke er ganske lav og afhænger af den ydre støtte af kirurgisk indsatte hæfteklammer eller sutur indtil kollagen er deponerede4. Forståelse af rollen og timing hvert lag af tarmvæggen spiller i Anastomotiske sårheling og inddragelse i inflammatoriske-medieret celletyper såsom makrofager, samt informative surrogat markører til at forudsige Anastomotiske fiasko eller succes kunne i høj grad reducere sygelighed, dødelighed og sundhedspleje udgifter efter kolon operationer5.
Den murine model har vist i tidligere undersøgelser at være nyttige i efterligne menneskelige anastomose6. Mens der er populære, gennemprøvet og velundersøgte eksempler på den murine Colon Anastomotiske model, navnlig den metode beskrevet af Komen et al. 7, disse modeller favor ileocecal eller stigende colocolonic Anastomotiske teknikker8. Tidligere undersøgelser af menneskelige patienter har påvist signifikant forskel i læk priser mellem ileocecal, colocolonic og kolorektal anastomoser, fremhæver behovet for yderligere eksperimentelle modeller på forskellige anatomiske steder. Yderligere, populært anvendes metoder har til formål at udvikle en model, som med vilje skaber en Anastomotiske lækage i stedet for belyse de cellulære mekanismer, der kræves til normal Anastomotiske sårheling9. Rotte modeller har været forsøgt i fortiden men har satser af Anastomotiske opspringning og/eller tegn på lækage (dvs. bylder dannelse) betydeligt lavere end mennesker og mus6,7. Derudover er mere genetisk modificerede eksperimentelle linjer tilgængelige i mus end rotter. Dette gør den rotte model mindre nyttigt for en Anastomotiske model. Derudover har svin og hunde modeller havde mindre klinisk undersøgelse end murine model6,7.
Vi foreslår en sikker, teknisk simpelt og nemt og hurtigt reproducerbare procedure til oprettelse af Colon anastomoser i en murine model, der skal lette yderligere undersøgelse af underrapporteret mekanisme af Anastomotiske sår healing10 .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Følgende protokol er blevet godkendt af University of Oklahoma Health Sciences Center institutionelle dyrs pleje og bruge udvalg (IACUC) og overholder alle institutionelle etiske retningslinjer vedrørende anvendelsen af forskning dyr. Derudover blev alle eksperimenter udført i henhold til institutionelle, statslige og føderale bestemmelser vedrørende eksperimentelle dyreforsøg.
Bemærk: Til denne protokol, vi brugte kvindelige og mandlige congenic i opdrættet C57BL6/J mus på 12 til 72 uger gammel. Alle musene brugt til denne procedure blev holdt på vores ikke-barriere facilitet for mindst en uge før operationen til at tilpasse sig de lokale biom. Dyr fik lov til at fodre til tidspunktet for drift og vi brugte hverken mundtlig mekaniske tarm forberedelse eller rektal rødmen før proceduren.
1) oprettelsen af anastomoser
- Autoklave de kirurgiske instrumenter, varm saltvand kunstvanding løsning og rengøre alle operative overflader med 70% ethanol.
- For at fremkalde anæstesi, skal du placere musen i en induktion boks, der er tilsluttet en vaporizer. Levere 2-3% isofluran på 1-2 L/min., indtil mus er bedøvet.
- Plads dyret på en opvarmning enhed, såsom en varmepude, for at forhindre hypotermi.
- Subkutant indsprøjtes en tid dosis på 0,1 mg/kg buprenorphin (3 µg for en 30 g mus) for postoperative analgesi og gangen en dosis på 10 mg/kg af enrofloxacin for præoperativ antibiotika profylakse.
Bemærk: Selv om præ- og postoperativ antibiotika ikke er nødvendig for denne operation, institutionelle retningslinjer og dyret sig og bruge Udvalget på vores institution anbefales deres brug på vores anlæg. - Placer den bedøvende næse kegle rundt med musen snude. Under hele operationen, omhyggeligt overvåge respirationsfrekvens af dyret og justere bedøvelsesmiddel flow efter behov. Opretholde en respirationsfrekvens på 30-40 vejrtrækninger pr. minut.
- Bruge en hårklipper, efterfulgt af en depilatory agent til at fjerne hår fra hele hudens overflade af maven. Grundigt Fjern den depilatory agent med gaze chloroformvædet med vand eller 70% ethanol. Grundigt tørre dyret.
- Før prepping maven, tape musens lemmer til varmepude eller udløsende overflade i slutningen af hvert ben til at forhindre, at musen flytte under kirurgi. Desinficere maven med klorhexidin. Omfatte det hele barberede område samt hår på kanten af det barberede område. Placer en steril drapere over musen (figur 1A).
- Før draperinger, skæres en lille æggeformet eller rektangulære vindue i drapere at eksponere prepped maven.
Bemærk: Vinduet bør udsætte musen hele maven men dække lemmer, hale, hoved og thorax. Vi skære en 4 x 3 cm2 vindue for vores operationer (figur 1B). - Gøre en lille slids langs drapere midterlinjen, fra den nederste kant mod vinduet æggeformet eller rektangulær for at tillade adgang til endetarmen under proceduren (figur 1 c).
- Før draperinger, skæres en lille æggeformet eller rektangulære vindue i drapere at eksponere prepped maven.
- Gøre en hud indsnit. Start langs midterlinjen af underlivet og incise hud med saks lodret, så formet som et sværd. Incise kun hud og undgå at skære bugvæggen muskulatur (figur 2A).
- Forstå midterlinjen af bugvæggen med pincet og løfte fra abdominal indholdet. Tager sig ikke til skade intraabdominal strukturer, incise længden af midterlinjen abdominal fascia vertikalt med en skarp saks. Forlænge varigheden af hud indsnit (figur 2B).
- Når tarmene er udsat, Find cecum og tyndtarm, og drej til venstre-sidet indvolde medialt for at udsætte den faldende, og sigmoid colon. Pels stump sonde tip med smøreolier gelé og omhyggeligt rykke sonden ind i endetarmen for at støtte i identifikationen af de faldende/sigmoid colon (figur 3).
Bemærk: I modsætning til mennesker, mus coecum er generelt fundet i den øverste venstre kvadrant af maven. Passe på ikke for at perforere tarmvæggen med sonden i dette trin. Hvis tarmvæggen er perforeret, afslutte proceduren og aflive mus.- Undgå at fatte coecum med tandede eller skarpe pincet. I stedet bruge atraumatisk pincet, bomuld tippes applikator eller blid finger manipulation at rotere indvolde.
- Brug varmede sterilt saltvand til at sikre den udsatte tarm holdes fugtig under hele proceduren.
- Tyktarmen bliver i venstre side af midterlinjen og knyttet til retroperitoneum via mesenterium. Efter identifikation, trække stump sonden delvist for at lette colotomy.
- Udføre tværgående colotomy af sigmoid colon.
- Forsigtigt forstå sigmoid colon overlegen i forhold til bækken fjorden med atraumatisk pincet (figur 4A).
- Ved hjælp af skarpe mikro-saks, gøre et snit på tværs af sigmoid colon vinkelret af tyktarmen og strækker sig på tværs af 80-90% bredde af tyktarmen. Dette vil hjælpe forhindre retraktion af ene ende af tyktarmen ud af feltet kirurgisk, og lette reparation (figur 4B).
- Hvis en mesenteriallymfeknuderne blodkar er skadet i løbet af den visceral rotation eller colotomy, og hold forsigtigt tryk i op til 2 min. med gaze eller en bomuld tippes applikator. Hvis blødningen fortsætter efter dette tidspunkt, placere et ottetal 8-0 monofilamenter sutur omkring punktet af blødning.
Bemærk: Hvis tarmen viser tegn på nekrose eller skade efter dette, afslutte proceduren og aflive musen ved hjælp af human måde godkendt af din institutionelle brug af dyr.
- Reparere den sigmoid colotomy.
- Bruge en Castroviejo nål driver, placere 5-6 enkle afbrudt 8-0 nonabsorbable polypropylen sting for at reparere kolostomi. Sted suturer 1 mm fra hinanden med 0,5 mm bid.
- Sørge for at undgå rullende kanterne af tarm til reparation ved at tage lidt mere serosa end slimhinde med hver søm. Forlade haler 5 mm lange. Tage sig ikke til utilsigtet fangst omkringliggende tarm i sutur (figur 4 c).
Bemærk: Det er nyttigt at begynde suturering på den nær mesenteriallymfeknuderne grænsen til colotomy, besparelse den mesenteric-mest del af colotomy til sidst. - Som reparation skrider frem, advance trans-anal stump spids dissektion sonde til at spænde reparation, før de endelige suturer er placeret. Dette vil hjælpe forhindre for snæver en reparation og mindske satser af Anastomotiske forsnævring.
- Sørge for at undgå rullende kanterne af tarm til reparation ved at tage lidt mere serosa end slimhinde med hver søm. Forlade haler 5 mm lange. Tage sig ikke til utilsigtet fangst omkringliggende tarm i sutur (figur 4 c).
- Bruge en Castroviejo nål driver, placere 5-6 enkle afbrudt 8-0 nonabsorbable polypropylen sting for at reparere kolostomi. Sted suturer 1 mm fra hinanden med 0,5 mm bid.
- Ved hjælp af en 10 mL sprøjte fyldt med opvarmet saltvand, overrisle maven flere gange. Hvis overfladen under musen bliver gennemblødt, tørre musen eller flytte musen til en tør overflade for at undgå hypotermi.
- Brug en steril gaze placeret over snit til at opsuge overskydende kunstvanding.
- På den sidste vanding, fylde maven med sterilt saltvand. Omhyggeligt rykke en smurt 18 G angiocatheter i rectum og puste med 0,5-1 cm3 i luften. Dette vil vise eventuelle lækager i anastomose end kan repareres med en anden afbrudt polypropylen sutur ved hjælp af steril sonden til span anastomose.
- Deflatere tyktarmen ved hjælp af angiocatheter før fjernelse.
- Sørg for, at der er ingen aktiv blødning. Hvis der er, anvende blide tryk direkte på punktet af blødning for 1-2 min. sted hæmostatisk sutur som beskrevet ovenfor, hvis blødningen fortsætter.
- Forsigtigt tilbage medialized indvolde til sin normale anatomiske position (figur 5A).
- Luk den abdominale snit (figur 5B).
- Bruger 4-0 resorberbar flettede suturer, placere en løbende sutur langs den muskuløs lag i bugvæggen starter øverst i snit og efterbehandling på ringere aspekt af snittet. Installere en uafgjort og skær sutur efterlader 5 mm haler.
Bemærk: Ikke ved et uheld optage tarmen i bugvæggen lukning. - Gentag med 4-0 monofilamenter sutur at lukke huden (figur 5 c).
- Bruger 4-0 resorberbar flettede suturer, placere en løbende sutur langs den muskuløs lag i bugvæggen starter øverst i snit og efterbehandling på ringere aspekt af snittet. Installere en uafgjort og skær sutur efterlader 5 mm haler.
- Sikre, at hele dyret varm og tør, at forhindre postoperative hypotermi.
- Nøje overvåge dyret den genindvinder fra anæstesi. Administrere 0,1 mg/kg buprenorphin hver 72 h for 2-3 dage efter proceduren for smerter kontrol. I løbet af tilbagebetalingsperioden, bør mus omhyggeligt undersøges dagligt for tegn på absces eller peritoneal sepsis. Postoperativ observation for smerte og lidelse bør omfatte: begrænsning af bevægelse herunder hunching type kropsholdning, manglende spise eller drikke, ikke ordentlig grooming, overdreven betændelse omkring såret, manglen på normale healing på stedet, incisionen, eller ikke normale nesting. Dyr viser nogen af disse adfærd bør aflives straks af CO2 kvælning for et minimum af 10 min efterfulgt af bilaterale torakotomi.
- Bland 0,1 mg/mL af enrofloxacin med musens drikkevand i 7 dage efter operation for at forhindre intra-abdominal infektion eller sepsis på grund af fækal forurening i forbindelse med driften.
2) høst Anastomotiske væv
- Lige før udtagelse Anastomotiske væv, aflive musen ved hjælp af human måde godkendt af den institutionelle brug af dyr.
Bemærk: Baseret på institutionelle politik, aflive vi vores dyr ved at placere dem i en CO2-kammer med 100% CO2-gas infusion på 2 L/min i 5 min før du udfører bilaterale torakotomi. - Sterilisere maven med klorhexidin efterfulgt af 70% ethanol.
- Re incise den oprindelige midterlinjen snit med en skarp saks. Start på den nedre pol af den tidligere indsnit og udvide denne nedskæring overlegent til formet som et sværd (figur 6A).
- Brug saks, skåret i muskuløs lag, og efter indtastning af peritoneal plads, udvide cut top og bund af snittet. Sørge for at undgå sårede tarmen ved indtastning af maven eller forstyrre anastomose, da der kan være tarm levet op til den indsnit eller Anastomotiske site.
- Omhyggeligt udføre en venstre mediale visceral rotation udsætter den reparerede sigmoid colon (fig. 6B). Der vil sandsynligvis være tarm til tarm sammenvoksninger omkring reparation. Forsigtigt og uden omsvøb dissekere disse sammenvoksninger fra stedet for reparation. Tage stor forsigtighed for ikke at forstyrre anastomose.
- Identificere webstedet reparation ved at lokalisere haler af polypropylen sutur anvendes til reparation. Ved hjælp af saks og starter 1 cm proksimalt for reparation, paa tvaers Transekttællinger gennem den faldende kolon. Gentag dette trin 1 cm distalt til site af anastomose.
- Fjerne den sigmoide segment af skarpt dissekere kolon fra vedlagte mesenterium langs den bageste kant af tyktarmen med fine saks (figur 7).
- Identificere mesenteriallymfeknuderne grænsen af kolon modellen og bruge fine saks til at klippe langs længden af mesenteriallymfeknuderne grænsen i en langsgående mode. Dette vil skabe en kvadratisk eller rektangulær del af tyktarmen fra cylindrisk modellen tidligere fjernet (figur 8).
- Bruge en mærkning pen til at afgrænse den anti-mesenteriallymfeknuderne grænse af kolon før fjernelse af tyktarmen segment. Efter fjernelse, lave en langsgående snit langs længden af kolon overfor mærkning. Fix, integrere og skære vævsprøve, som er nødvendig for histologi og/eller immunfarvning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
7 dage efter operationen, bør anastomose være godt helbredt. Anastomose kan høstes på tidspunkter før og efter syv dage til bedre illustrere stadier af Anastomotiske healing. I figur 9, den histologiske analyse viser en fibrotisk (kollagen visualiseret ved trichrome farvning) svar medieret af glatte muskelceller alpha-actin positive myofibroblasts. Vi har dog konstateret, at resultaterne fra histologiske analyser varierer mellem mus, specielt graden af re epithelialization og koncentration af myofibroblasts på webstedet Anastomotiske. Vi rapporterer dødelighed efter denne procedure kan være mindre end 10%, med mere end 90% af overlevende mus har godt helbredt anastomoser på 7 dage.
Figur 1: Draperinger og kirurgisk forberedelse. (A) A steril drapere er placeret over musen efter at maven har været prepped. (B) en lille oval eller et rektangel er skåret i drapere at eksponere maven. (C) en lille slids bør gøres langs midterlinjen af drapere nær vinduet æggeformet eller rektangulære at give adgang til endetarmen under proceduren. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2 : Snit. (A) A hud indsnit er lavet mens pasning ikke at såre bughinden. ()B) bughinden er forhøjet fra abdominal indholdet og indskåret udsætter intra-abdominal indholdet.
Figur 3 : Sondens placering. En stump sonden placeres forsigtigt i endetarmen. Efter at lokalisere coecum, er indholdet af maven roteret medialt visualisere rektal sonden tidligere placeret.
Figur 4 : Colotomy og reparere. (A) Den sigmoid er fattet med atraumatisk pincet. (B) brug af skarpe mikro-saks, gøre et snit på tværs af sigmoid colon vinkelret i tyktarmen og strækker sig på tværs af 80-90% bredde af tyktarmen. (C) ved hjælp af en Castro-Viejo nål driver sted 5-6 simple afbrudt 8-0 polypropylen sting for at reparere colotomy. Suturer bør være omkring 1 mm fra hinanden med 0,5 mm bid. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 5 : Sår lukning. (A) de viscerale organer er vendt tilbage til deres normale anatomiske position. (B) den abdominale snit er lukket med 4-0 flettet sutur. (C) huden lukkes med 4-0 monofilamenter sutur. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 6 : Snit efter kirurgi. (A) re-lukke op den oprindelige midterlinje indsnit afslørende intra-abdominal indholdet. Sørg for at udvide indsnittet overlegent og lateralt for bedre eksponering for den sigmoid. (B) rotere indvolde medialt afslører den sigmoid anastomose.
Figur 7 : Høst anastomose. Fjerne segment af tarm proksimale og distale til anastomose af 1 cm på hver side.
Figur 8 : Orientering for væv sektioner. Skær langs længden af mesenteriallymfeknuderne grænsen i en langsgående mode. Dette efterlader en rektangulær modellen. Dette afbilder eksemplar af sigmoid anastomose.
Figur 9 : Histologi og immunhistokemisk analyse af et fuldt helbredt Colon anastomose. Histologiske analyse viser fibrotisk (kollagen visualiseret ved trichrome farvning) svar medieret af glatte muskelceller alpha-actin positive myofibroblasts.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Der er flere vigtige skridt til at sikre en vellykket og minimere sygelighed/dødelighed forbundet med denne procedure. Først, sikre en omhyggelig håndtering af tarmens væv og sørge for at forhindre trækkraft skade når roterende indvolde at eksponere tyktarmen. Unødig spænding på tarm eller mesenterium kan skade den tarm eller vaskulatur og forårsage tarm nekrose fra webstedet til anastomose. Derudover bør skarpe tang eller pincet med tænder ikke bruges til at håndtere tarmen.
Skade på tarmen adskilt fra webstedet for planlagte anastomose, enten ved perforering med stumpe sonden eller visceral rotation bør resultere i aflivning af dyr. Vores erfaring, kan tarm nekrose eller skade føre til intra-abdominalt sepsis eller død og en stærkt forøget inflammatorisk respons, der uoverkommeligt vanskeliggør inddrivelsen af en helbredt Anastomotiske modellen.
Transection af tyktarmen bør span så meget af den faldende kolon som muligt, men skal sørges for ikke Transekttællinger tarm serosa kontakt med mesenterium. Vores erfaring, transection, der omfatter serosa- og især mesenterium-kan føre til retraktion af den proksimale del af tyktarmen, der vanskeliggør anastomose og kan føre til yderligere skade forsøger at inddrive den tilbagetrukken segment.
Anastomose kan repareres med 5-6 afbrudt suturer. Mere kan være behov for store mus. Suturer bør være 1 mm fra hinanden. Sted suturer på begge sider af grænsen mesenteriallymfeknuderne og derefter skiftevis siderne af transection til at mødes i midten på den anti-mesenteriallymfeknuderne grænse letter en lettere og hurtigere anastomose. Før den endelige sutur, spanning anastomose med stumpe sonden sikrer en patent anastomose og forhindrer "back-walling" anastomose, som vil effektivt ligate i tyktarmen.
Sikre hæmostase før abdominal lukning. Trods postoperativ antibiotika dækning, hemoperitoneum i tilbagebetalingsperioden efter intraabdominal forurening kan føre til en uacceptabelt høj sats af intra-abdominalt infektion og klæbende sygdom.
Når du først udfører denne procedure, kan flere mus gå tabt i den postoperative periode. Vores indledende dødelighed tilnærmet 30%. Vi har fundet dette for at være hovedsagelig skyldes Anastomotiske forsnævring fører til obstruktion og tarm nekrose, opdeling af Anastomotiske reparation eller tarm væg nekrose fra webstedet af anastomose sandsynligvis skyldes iskæmi efter mesenteriallymfeknuderne skade. Alle disse kan føre til intra-abdominalt infektion, sepsis og død. Når oplevet i denne procedure, skal kirurgen opleve en dødelighed på under 10%. Bevis for subklinisk Anastomotiske site lækage, illustreret af purulence og tætte sammenvoksninger i stedet for anastomose, var til stede i en yderligere 10%. Mens denne procedure kan gøres uden hjælp af forstørrelse, er dens største ulempe som en reproducerbar eksperimentel model den relative tekniske udfordring i forhold til ileocecal eller opstigende kolon anastomoser. Vi fandt kirurgisk loupes overordentlig nyttige i at udføre anastomose samtidig minimere traumer til tarmvæggen. En kirurgisk mikroskop kan også bruges, men vi fandt det ikke nødvendigt.
Mange teknikker har været brugt til at beskrive dyremodeller for Colon anastomose; især udnytte rotte og kanin modeller. Vi har konstateret, at der er en mangel på reproducerbare procedurer af faldende colon anastomose i musemodeller; Vi formoder, dette skyldes den mindre størrelse af mus stigende den teknisk sværhedsgrad af Anastomotiske procedurer. Mus har dog større udvalg og større tilgængelighed af transgene linjer og antistoffer, som til dette punkt var ikke tilgængelig til at blive brugt i et kolon anastomose model. Vi udviklede den nuværende model for at forene musemodel med en model af kolon anastomose.
Vores erfaring med denne procedure omfatter både mandlige og kvindelige mus af varierende størrelser og aldre. På dette tidspunkt har vi ikke sammenlignet Anastomotiske sårheling resultater mellem aldre, størrelser eller køn af mus, selvom forskelle kan helt sikkert, og denne model vil give denne sammenligning.
Vi mener, at denne model kan være let og konsekvent gengives og bruges til at studere Anastomotiske sårheling. Selv om vi anbefaler første modellen høst på syv dage, tidligere og senere kan tidspunkter være nyttige i illustrerer en tidslinje over Anastomotiske healing; viser for eksempel, tidlig migration af inflammatoriske celler og mæglere til webstedet Anastomotiske og aflejring af kollagen ved fibroblaster i de følgende uger.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne erklærer, at de har ingen konkurrerende finansielle interesser.
Acknowledgments
Ingen
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| C57BL6/J mice | Jackson Labs | #00664 | |
| Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 50033 | |
| Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorphine 0.3 mg/ml | Reckitt Benckiser Pharma Inc | NDC 12496-0757-5 | |
| 1 cc insulin syringe, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Chloraprep Shampoo | Medline | APL82287 | |
| Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
| BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
| Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37 °C prior to use |
| 10 ml syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
| 4-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", PS-2 needle | Henry Schein | 6546037 | |
| Blue monofilament suture 24” BV-1 needle | Henry Schein | 8305H | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
| Cole-Parmer Microscissors, Standard Grade, Straight, 4". | Cole- Parmer | EW-10818-06 | |
| Medline Sterile lubricating jelly | Medline | MDS032273H |
References
- Murrell, Z. A., Stamos, M. J.
- Shaban, F., Carney, K., McGarry, K., Holtham, S. Perforated Diverticulitis: To Anastomose or Not to Anastomose? A Systematic Review and Meta-Analysis. International journal of surgery (London, England). , (2018).
- Chambers, W. M., Mortensen, N. J. Postoperative leakage and abscess formation after colorectal surgery. Best practice, research. Clinical gastroenterology. 18, 865-880 (2004).
- Ashkanani, F., Krukowski, Z. H. Surgery - Oxford International Edition. Intestinal Anastomosis. 20, 104-107 (2002).
- Raptis, D., Pramateftakis, M. G., Kanellos, I. Our 20-year experience with experimental colonic anastomotic healing. Journal of medicine and life. 11, 5-14 (2018).
- Pommergaard, H. C., Rosenberg, J., Schumacher-Petersen, C., Achiam, M. P. Choosing the best animal species to mimic clinical colon anastomotic leakage in humans: a qualitative systematic review. European surgical research. Europaische chirurgische Forschung. Recherches chirurgicales europeennes. 47, 173-181 (2011).
- Komen, N., et al. Colorectal anastomotic leakage: a new experimental model. The Journal of surgical research. 155, 7-12 (2009).
- Perry, T., Borowiec, A., Dicken, B., Fedorak, R., Madsen, K. Murine ileocolic bowel resection with primary anastomosis. Journal of visualized experiments : JoVE. , e52106 (2014).
- Pommergaard, H. C., Achiam, M. P., Rosenberg, J. Colon anastomotic leakage: improving the mouse model. Surgery today. 44, 933-939 (2014).
- Bosmans, J. W. A. M., Jongen, A. C. H. M., Bouvy, N. D., Derikx, J. P. M. Colorectal anastomotic healing: why the biological processes that lead to anastomotic leakage should be revealed prior to conducting intervention studies. BMC Gastroenterology. 15, 180 (2015).
