Summary
Corto período de sesiones (≤10 min) alto entrenamiento de intensidad intervalo (HIIT) surge como una alternativa a las modalidades de ejercicio más largo, sin embargo, las variantes más raramente están modeladas en estudios con animales. Aquí, describimos un 10 min, 3 días a la semana, protocolo HIIT de cinta de correr cuesta arriba mejora el rendimiento físico en el hombre y mujer entre ratones.
Abstract
Entrenamiento interválico de alta intensidad (HIIT) está surgiendo como un enfoque terapéutico para prevenir, retrasar o mejorar la fragilidad. En particular sesión corta de HIIT, con regímenes de que menor o igual a 10 minutos es de particular interés como varios estudios cuentan con rutinas tan cortas como algunos minutos un par de veces a la semana. Sin embargo, hay una escasez de estudios en animales que modelan los impactos de la corta sesión de HIIT. Aquí, describimos una metodología para un régimen de HIIT individualmente a medida y progresiva sesión corta de 10 minutos 3 días a la semana durante años ratones utilizando una caminadora inclinada. Nuestra metodología también incluye protocolos para la evaluación de la caminadora. Ratones son inicialmente aclimatados a la caminadora y luego base plana y las evaluaciones de la cinta de correr cuesta arriba. Sesiones de ejercicio comienzan con un calentamiento de 3 minutos, luego tres intervalos de 1 minuto a un rápido ritmo, seguido de 1 min a una recuperación activa ritmo. Después de estos intervalos, los ratones se dan un segmento final que se inicia en el rápido ritmo y acelera durante 1 minuto. El protocolo HIIT es individualmente a la medida de la velocidad y la intensidad de cada ratón se calculan basados en puntuaciones de la evaluación anaeróbica inicial. Además, detallamos las condiciones para aumentar o disminuir la intensidad para los ratones individuales dependiendo del rendimiento. Por último, es aumento de la intensidad de todos los ratones cada dos semanas. Hemos divulgado previamente en este protocolo mejorado rendimiento físico en ratones machos años y aquí ver también aumenta el rendimiento de la cinta de correr en de ratones femeninos. Ventajas de nuestro protocolo incluyen administración bajo tiempo (unos 15 minutos por 6 ratones, 3 días a la semana), estrategia para individualizar para ratones modelo mejor prescribe ejercicio y un diseño modular que permite la adición o eliminación del número y longitud de intervalos para valorar los beneficios del ejercicio.
Introduction
El ejercicio regular es efectivo para prevenir o retrasar enfermedades asociados con la edad muchos como sarcopenia y fragilidad1,2,3,4. Sin embargo, menos del 15% de las recomendaciones cumplen 65 años y mayores de 150 min por semana de intensidad moderada ejercer más fuerza
entrenamiento5,6. Como la falta de tiempo y sesiones largas barreras comunes para ejercer, entrenamiento interválico de alta intensidad (HIIT) surge como una alternativa a los regímenes tradicionales. HIIT cuenta con múltiples arranques cortos de actividad intensa que se entremezclan con breves períodos de recuperación activa, y ha habido interés reciente en la identificación de los regímenes más cortos que todavía producen resultados beneficiosos. Estos estudios incluyen el día 3 un regímenes semana con tiempos de sesión total de min 472-3 min8, 1,5 min9, un solo minuto10e incluso 40 s11.
Asimismo, ha habido considerable interés en modelos animales de HIIT. La mayoría de estudios utiliza ratones12,13,14,15,16,17,18,19,20, 21 o ratas22,23,24,25 y se realizaron con una cinta de correr, aunque algunos otros utilizan natación protocolos26,27 , 28. la mayoría de estos estudios utilizar VO2máximo para establecer la intensidad inicial del ejercicio13,14,19,21,24. Además, aunque un beneficio a menudo descrito de HIIT es tener regímenes más cortos, casi todos ellos identifican regímenes de estudios característica pasado 30 minutos o más largo11,12,13,14 ,15,18,19,21, con la excepción de uno con un poco más larga que 10 min régimen20y otro con 19 minutos a través de tres diferentes intensidades de16. A nuestro conocimiento, no hay informó los estudios en animales que examinan un 10 min o menos régimen HIIT, o adaptar el tratamiento a los animales, a excepción de nuestro estudio publicado17 que sirve como base para este protocolo.
Aquí, describimos un protocolo para HIIT en ratones envejecidos diseñados para modelo individualizado, variantes de sesión corta (≤10 min) usadas recientemente en los estudios humanos7,8,9,10,11. El método incluye un régimen de 10 minutos sobre una caminadora inclinada (25°) con un calentamiento de 3 minutos y cuatro intervalos de 1 minuto a alta intensidad, intercaladas con tres segmentos de recuperación activa de 1 minuto. Las ventajas del protocolo incluyen una mayor relevancia clínica ya que cuenta con estrategias para el confección de intensidad a cada animal, el ajuste de intensidad que no se basa en VO2max, evitando así la necesidad de cintas metabólicas y modular diseño por el que el número de intervalos y horarios es fácilmente ajustable. Además, dentro de este protocolo ofrecemos instrucciones para dos estrategias para la evaluación de la cinta, que incluyen intervalo plano continuo y ascendente, para examinar la resistencia. Utilizando estos métodos, Ampliamos nuestros hallazgos anteriores corta sesión que HIIT aumenta capacidad funcional en ratones machos de17y demostrar HIIT aumenta rendimiento de caminadora en ratones femeninos de.
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Protocol
Todos los estudios y protocolos experimentales fueron aprobados por y de conformidad con las directrices de la Universidad en el búfalo VA Western Nueva York Animal atención y comités de uso.
1. experimentar el programa de instalación y asesoramiento General
Nota: Un total de 24 ratones femeninos sobre un fondo de C57BL/6J fueron utilizados en el presente Protocolo a partir de 23 meses de edad. Los ratones llevaban una condicional SIRTloxp-exon4-loxp mutación29, sin embargo, esto no fue inducido en este experimento.
- Asegúrese de que ratones reciben permanentes identificadores como etiquetas de oreja, chips RFID, o tatuajes de la cola.
Nota: Se recomienda también utilizar marcas temporales (por ejemplo, el marcador permanente para marcar colas) para una rápida identificación durante los períodos de evaluación. - Limpiar la cinta con 0.25-0.5% de cloro (v/v) o etanol al 70% (v/v) al final del día o para eliminar las heces o la orina entre los ensayos experimentales. Seco soluciones completamente antes de iniciar un nuevo juicio.
Nota: Etanol puede aumentar el desgaste de la banda de la caminadora. Se recomienda limpiar la cinta entre cada serie, si trabaja con ratones machos alojados en grupo con el fin de minimizar en la lucha contra la jaula. Se recomienda realizar evaluaciones de la cinta de correr a la misma hora del día en cada momento en los estudios longitudinales30,31,32, y si se realizan otras evaluaciones, la orden debe seguir siendo el mismo. El investigador ejecuta el experimento debería ser ciego a las designaciones de grupo de los ratones.
2. aclimatación ratones al aparato de cinta de correr
Nota: Iniciar la aclimatación de los ratones 1 mes antes de experimentos de línea base.
-
Establecer el programa de formación inicial usando el software de cinta (v3.4.7) en modo Manual (figura 1 y tabla 1).
- Abra el software de la caminadora. A continuación, haga clic en el archivo y abrir el experimento.
- De entrada los valores indicados en la tabla 1 en la ficha Manual (figura 1) en aclimatación.
- Entrada del sesión número 1, el número de canales activos como 1 a 6 según el número de ratones, el número de visitas a la red como 10 y el número de choques como 20.
Nota: Intensidad de descarga para esta carrera inicial se establece en el nivel 1 (0,46 mA).
- Ajuste la inclinación de la caminadora a 0° (plano).
- Mantenga ratones por la cola al colocar en la caminadora y ponga ratones directamente sobre la cinta para evitar que a partir de ratones en la rejilla de descarga.
- Use un cepillo o un depresor de lengüeta para mantener ratones de la rejilla de descarga cuando empieza formación o evaluación. Empujar ratones para comenzar a correr para evitar descargas no deseadas.
- Después de cada ratón se da el programa de formación inicial, repetir el programa que el anterior con la intensidad de choque a nivel 2 (0,59 mA) con al menos 15 minutos entre entrenamientos.
-
Uno o dos días después del programa de formación inicial administrar la aclimatación de la cinta de correr cuesta arriba.
- Abra el software de la caminadora. Haga clic en el archivo y luego abrir el experimento.
- De entrada los valores de la ficha básico como se indica en la tabla 2 bajo aclimatación.
- Bajo Detección de choque, de entrada el sesión número 1, el número de canales activos como 1 a 6 según el número de ratones, el número de visitas a la red como 10 y el número de choques como 20.
- Haga clic en la ficha Modo de perfil (figura 2) y de paso 1, de entrada una velocidad inicial de 0 m/min y una velocidad final de 5 m/min con un período de 5 s.
- Añadir un calentamiento paso 2 con una velocidad de 5 m/min y al final velocidad de 5 m/min durante 30 segundos. Añadir un paso de transición que comienza en 5 m/min y una velocidad final de 6 m/min 5 s.
- Añadir un paso de velocidad de la prueba que comienza en 6 m/min y finaliza en 6 m/min 20 s. agregar un paso de transición que comienza en 6 m/min y finaliza en 5 m/min.
- Agregar un intervalo de recuperación que comienza en 5 m/min y finaliza en 5 m/min 20 s (figura 2).
- Repita el paso 2.6.4 para agregar pasos de velocidad de prueba como se indica en la tabla 2 bajo aclimatación.
- Dos semanas antes de las evaluaciones de línea de base, continuar la aclimatación proporcionando dos evaluaciones de capacidad aeróbica plana de cinta como se describe en la sección 3, en días consecutivos.
- Uno o dos días después del segundo entrenamiento de la resistencia, proporcionar dos evaluaciones de capacidad anaeróbica cuesta caminadora como se describe en la sección 4, en el mismo día con un mínimo de 30 min entre entrenamientos.
3. caminadora plana continua evaluación
- Crear un programa de la cinta como se describe en el paso 2.1, utilizando los valores indicados en la tabla 1 en evaluación. Detección de descargas, establecer el número de sesión 1, el número de canales activos como 1 a 6 según el número de ratones, el número de visitas a la red como 10 y el número de choques como 20.
- Controlar los ratones a lo largo de la prueba y eliminar ratones del instrumento que alcanzan los criterios de punto final.
Nota: Este paso es para evitar tocar involuntariamente la red de descarga de los vecinos de ratones y que afectan a datos de ratones. Los parámetros incluyen el tiempo total en el cinturón, la distancia recorrida y los choques a la proporción de visitas. Se recomienda realizar dos evaluaciones en cada momento, separados por al menos un día entre evaluaciones.
4. cuesta arriba intervalo caminadora evaluación
- Crear un programa de la cinta como se describe en el paso 2.6, utilizando los valores indicados en la tabla 2 bajo evaluación. Detección de descargas, establecer el número de sesión 1, el número de canales activos como 1 a 6 según el número de ratones, el número de visitas a la red como 5 y el número de choques como 10.
- Establecer el campo de intervalo en el programa de caminadora a 0.5.
Nota: Esto permite que los puntos de datos a ser recogidos cada segundo en vez de cada minuto, que ayuda en la identificación de la velocidad al final de cada ratón. El programa se detendrá automáticamente después de la etapa de 50 m/min debido a limitaciones de software. Los parámetros incluyen el tiempo en la correa, la distancia recorrida y la velocidad de la prueba de la última etapa con éxito terminada antes de final. El último se utiliza para determinar la intensidad de la línea de base para el régimen de HIIT descrito en el paso 5. Se recomienda realizar dos evaluaciones por cada punto de tiempo, separados por al menos 30 minutos.
5. corta sesión de alta intensidad intervalo de formación
- Fijar la cinta de correr cuesta arriba (25°) y retire la tapa de plástico.
- Determinar la intensidad de cada ratón. Utilice la velocidad de la última etapa completada con éxito (paso 4.5) y encontrar el grupo de intensidad y correspondiente Base, Sprinty tablero velocidades usando la tabla 3.
-
Abra el software de cinta y haz clic en archivo para crear un nuevo programa.
- Haga clic en la ficha Modo de perfil y de paso 1, entrada a una velocidad de 0 m/min y una velocidad final como se indica bajo velocidad de la Base como se indica en la tabla 3 con un período de 5 s.
- Añadir un calentamiento paso 2 con una velocidad inicial a Base de velocidad y velocidad final a Base de velocidad para 180 s.
- Entrada 3 intervalos cada 1) un paso de transición que va desde la Base a Sprint de 5 s, 2) un paso en el Sprint de velocidad de 60, 3) un paso de transición que va desde el "sprint" a Base de más de 5 s y 4) un paso para un intervalo de recuperación en < C15 > Base velocidad para 60 s.
- Añadir un paso de transición que va desde la Base a la velocidad de Sprint durante 5 s y un paso final que va desde Sprint hasta el tablero de velocidad sobre 60 s.
Nota: Programas se pueden guardar, modificar y reloaded.
- Hacer ejercicio tres días a la semana con al menos un día de descanso entre sesiones (el lunes, el miércoles y el viernes).
- Programas de ejercicios de reescritura para aumentar la Base, el Sprinty el tablero velocidades de 1 m/min cada dos semanas.
Nota: No hay descargas eléctricas se dan durante el ejercicio. - Motivar a ratones a ejecutar utilizando un pincel de maquillaje (recomendado) o un depresor de lengua para motivar ligeramente ratones que caen cerca o en la rejilla de descarga. Si un ratón no responde retry en 5 s, luego s 10 y luego reintentar cada 30 s o durante un intervalo de recuperación hasta el final de la sesión.
Nota: considerar eliminar ratones en el estudio que no correr en la caminadora a cualquier intensidad o son incapaces de completar los tres primeros intervalos en la intensidad definida para el grupo de intensidad más baja (tabla 3) - Se mueven los ratones que no pueden ser motivados para completar los tres primeros intervalos en dos sesiones de ejercicio consecutivo para bajar grupos de intensidad (tabla 3).
- Se mueven los ratones que no requieren motivación en dos sesiones de ejercicio consecutivos a grupos de intensidad más alto (tabla 3).
- Tomar ratones control sedentario en lugar de jaulas al lado de la cinta como funciona. Alternativamente, se pueden colocar controles sedentarios en los carriles de una caminadora no se mueve durante 10 minutos.
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Representative Results
Un total de veinticinco ratones femeninos fueron criados y envejecidos en la casa. Los ratones de fondo C57BL/6J llevaron una mutación deloxp-exon4-loxp de SIRT1 de29; sin embargo, no fue inducido este knockout condicional y por lo tanto, todos los ratones exhibieron longitud Sirtuin1 (datos no mostrados). A los 24 meses de edad, ratones evaluaron la resistencia de la cinta y la capacidad de sprint cuesta arriba antes y después de la administración de dos meses de ejercicios HIIT (n = 14), o jaula restantes sedentaria (n = 11). Nuestro datos muestran que todos los ratones de 14 en el HIIT grupo caminadora mayor tiempo en la correa en comparación con 7 de 11 de los ratones de la SED (Figura 4A, emparejado prueba T de student p < 0.0001 de HIIT y p < 0.14 para la SED). En total HIIT ratones exhiben una mejoría mayor en el tiempo en cinta basada en el mejor de los dos ensayos (HIIT: 18,2 ± 10,5 min a 31,8 ± 13,7 min, delta 13.6 ± 7,5 min versus SED: 19,9 ± 10,0 minutos 25,3 ± 7,3 min, delta 5.3 ± 11,4 minutos, prueba T de student p < 0.0391).
Además, hemos detectado mayor incremento en capacidad de cinta de correr cuesta arriba como 12 de los 14 ratones HIIT aumentó velocidad máxima mientras que se observó disminución en 8 de 11 ratones SED (Figura 4B, emparejado prueba T de student p < 0.0022 de HIIT y p < 0,85 para la SED). Ratones HIIT también demostraron una mejoría mayor en la velocidad máxima en comparación con ratones SED basados en el mejor de los dos ensayos (HIIT: 14,6 ± 4,3 m/min ± 17,6 5,5 m/min, delta 3.0 ± 3.0 m/min versus SED: 16,9 ± 3,8 m/min ± 16.5 5.0 m/min delta 0.5 ± 5.0 m/min, p de T-test del estudiante impar = 0.0441). Tolerancia de choque fue similar entre los dos grupos de ratones (descarga a red visita base de relación - SED: 1,2 ± 0,1 versus HIIT: 1,4 ± 0,4, p = 0,24; extremo - SED: 1.2 ± 0.4 versus HIIT: 1,3 ± 0,4, p = 0,46).
Figura 1: parámetros de modo manual caminadora software para evaluación de caminadora resistencia. El modo manual del software de cinta de correr permite el ajuste para los protocolos que implican aceleración correa continua. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 2: parámetros del programa caminadora software perfil modo evaluación sprint cuesta arriba. El modo de Perfil de caminadora software, utilizado en conjunción con las opciones de la ficha de modo manual (figura 1), permite la habilidad de crear protocolos con intervalos de velocidad de encargo. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 3: esquema del régimen de entrenamiento de intervalo de alta intensidad. Base, el Sprint y el tablero velocidades se indican en la tabla 3. Velocidad aumenta 1 m/min cada dos semanas. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 4. Impactos del HIIT sobre el rendimiento de la cinta de correr en ratones envejecidos. 20 - cuatro meses ratones femeninos recibieron HIIT (n= 14) o permanecido sedentario (SED, n= 11) por 2 meses. Resistencia de cinta (A) se evaluó antes y después de la intervención de ejercicios como el mejor de los dos ensayos en días consecutivos en una cinta plana. Evaluaron la capacidad de sprint cuesta arriba (B) como el mejor de los dos ensayos con no menos de 30 min de descanso sobre una caminadora inclinada (25 °). Las líneas indican los ratones. B línea de base y E es punto final, *** indican un valor de p < 0.001 y *** indica p < 0.0001 determinado comparando un estudiante apareado T-test dentro de cambio de grupo entre la línea de base y punto final. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Tabla 1: Parámetros del programa para caminadora resistencia aclimatación y evaluación.
| Parámetro de programa | Aclimatación | Evaluación |
| Intervalo de | 1 | 0.5 |
| Duración | 5 | 90 |
| Activar el modo de perfil | Sin comprobar | Sin comprobar |
| Paso de Accel | 1,0 m/min | 1 m/min |
| Accel Int | 60 segundos | 120 segundos |
| Velocidad máxima | 10 m/min | 35 m/min |
| S_speed | 5 m/min | 5 m/min |
| Tasa de descarga Rep | 1 hz | 1 hz |
| Intensidad de descarga | 1 y 2 | 3 |
Tabla 2: Parámetros del programa para la aclimatación de sprint cuesta arriba y evaluación.
| Parámetro de programa | Aclimatación | Evaluación |
| Intervalo de | 0.5 | 0.5 |
| Duración | 10 | 90 |
| Activar el modo de perfil | Comprobado | Comprobado |
| Paso de Accel | N / A | N / A |
| Accel Int | N / A | N / A |
| Velocidad máxima | 15 m/min | 35 m/min |
| S_speed | 5 m/min | 5 m/min |
| Tasa de descarga Rep | 1 hz | 1 hz |
| Intensidad de descarga | 2 | 3 |
| MODO de perfil (consulte las figuras 1 y 2 para configurar parámetros del programa) | ||
| Intervalos de prueba | 8, 10, 10, 10 m/min | 6, 8, 10, 11, 12... 51, 52 m/min |
Tabla 3: Intensidad las denominaciones de las HIIT ejercitan ratones.
| Grupo de intensidad | Puntuación de Sprint cuesta arriba de línea de base | Velocidades de ejercicio inicial | ||
| Base | Sprint | Tablero | ||
| 0 | < 8 m / min | 5 m/min | 7 m/min | 10 m/min |
| 1 | 8-16 m/min | 5 m/min | 10 m/min | 15 m/min |
| 2 | 17-25 m/min | 8 m/min | 13 m/min | 18 m/min |
| 3 | > 25 m/min. | 11 m/min | 16 m/min | 21 m/min |
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Discussion
Beneficios de sesiones cortas son un aspecto clave de entrenamiento interválico de alta intensidad que captura científica y de interés público. Sin embargo, los estudios en animales raramente investigar regímenes HIIT que son 10 minutos o menos. Aquí, describimos un protocolo para un 10 min sesión corta HIIT cuesta caminadora ejercicio régimen que mejorado rendimiento de caminadora en ratones hembra edad y que anteriormente hemos demostrado para aumentar el rendimiento físico en ratones machos de17. Una fortaleza de nuestro protocolo es que además del protocolo está a sólo 10 minutos en longitud, el diseño es modular tal que el número de intervalos se puede añadir o quitar para hacer los protocolos que son incluso un minuto de longitud. Además, puede modificarse la longitud de los intervalos proporcionando estrategias múltiples para el ejercicio de valorar y evaluar los impactos.
Otro punto fuerte de este protocolo es que incluir un sistema para adaptar el régimen de ejercicios a las capacidades físicas de los ratones, que, a nuestro conocimiento, solamente un otro estudio33 aparte de nuestro informe en ratones machos de17 ha utilizado. Aunque individualmente adaptando una intervención de ejercicio introduce variabilidad en el diseño experimental, una importante ventaja de este método es que mejor modela la administración del ejercicio prescrito en ajustes clínicos humanos. Además, los animales no entrenan a intensidades demasiado fácil o difícil, que podría ser un factor importante en experimentos donde la población animal exhibe diversidad en la capacidad de ejercicio (es decir, durante el envejecimiento). Una otra ventaja de esta metodología es que no requiere el uso de caminadoras metabólicos para determinar el VO2máximo como la intensidad del ejercicio está diseñada para el rendimiento del animal, un concepto que se examina más por Picoli et al34.
Este protocolo incluye dos evaluaciones de desempeño de la cinta, en la forma de una lenta aceleración ergometría plano y una inclinación incremento intervalo ergometría, respectivamente. Existen múltiples protocolos que han sido publicados para determinar rendimiento de cinta continua en ratones utilizando cintas de correr16,34,35, incluyendo un JoVE artículo36. Varios parámetros diferencian a través de estos estudios y de la literatura, incluyendo: inclinación (generalmente 0° o 5° para las pruebas de resistencia), intensidad de descarga (que van desde 0.25 1.12 mA) y las reglas para la definición de agotamiento. También se observó que 5 golpes consecutivos fueron utilizados comúnmente para definir agotamiento a través de múltiples estudios. Aunque esta estrategia puede inducir mayor agotamiento que las reglas que hemos utilizado en nuestro estudio y el presente Protocolo, este sistema también asume que todos los ratones tienen umbrales de dolor similares, que no pueden ser cierto dependiendo de las condiciones experimentales. Nuestra definición del agotamiento de 10 visitas o descargas total 20 proporciona un marco para evaluar si hay umbrales de dolor diferentes. En definitiva, existen ventajas y desventajas de estrategias y la decisión para definir el punto final deben estar mejor alineados con los objetivos del estudio. Además, algunos protocolos de evaluación de la cinta de correr para los ratones han sido diseñados sin el uso de golpes como un estímulo37. Aunque hay ventajas a este enfoque37, algunas desventajas a considerar incluyen el uso de una determinación de agotamiento que es subjetiva y la potencial dificultad de evaluar varios ratones al mismo tiempo.
Además, otros han usado el trabajo y el poder como parámetros para describir caminadora rendimiento35,38,39. La velocidad de la correa y la tasa de aceleración también diverso están representados en la literatura. Característica como la mayoría de protocolos aumentando la velocidad, el resultado producirá una mezcla de capacidad aerobia y anaerobia en el ratón, con protocolos más lentos proporcionando más énfasis en el componente aeróbico. Por lo tanto hemos diseñado nuestra prueba de intervalo de cinta de correr cuesta arriba para proporcionar mayor atención en el componente anaerobio17. Para lograr esto, nuestro protocolo incluye intervalos de prueba corta con recuperación activa entre pruebas, permitiendo para que los ratones lograr velocidades más altas y por lo tanto una mayor utilización anaerobia en relación con nuestra evaluación de la resistencia de cinta plana continua. Para nuestro protocolo se utilizó un período de recuperación activa de 20 s entre intervalos, el tiempo medio para una de tejido muscular en tejido humano40. Sin embargo, observamos una limitación de este método es que los impactos específicos en el metabolismo anaerobio deban todavía ser aclarado, incluyendo un examen de parámetros anaeróbicos como glucolisis metabolismo, utilización de fosfocreatina y lactato cinética fortalecer este método. Además, nuevos estudios que investigan los efectos del cambio de etapa y períodos de descanso activo, inclinación e incrementos de velocidad diferentes también fortalecería este método.
La metodología descrita en el presente Protocolo, incluyendo las dos cinta evaluaciones, están diseñados para animales más viejos en particular y como tal incluye mayor tiempo para la aclimatación de los ratones a los protocolos. Aclimatación correcta es un paso crítico para diseño experimental para extremos debido al agotamiento y no suficiente aprendizaje por el ratón. Inadecuada aclimatación es probable en estudios longitudinales - sin embargo, lo importante, puede no notarse en cuenta estudios. Aunque, protocolos de aclimatación más cortos podrían ser posibles para las cohortes más jóvenes, en nuestra experiencia ratones mayores requieren mayor aclimatación y un protocolo publicado para entrenamiento en edad antes de 1 mes de aclimatación de iniciados de las ratas con 10 días total para cinta de correr aclimatación41. Sin embargo, estamos de acuerdo con Castro et al. que proporcionar aclimatación excesiva puede afectar el comportamiento de los impactos en los ratones35 y su recomendación de 3 a 10 días total35, para que nuestro protocolo de aclimatación está en consonancia con estos recomendaciones. Además, los animales más viejos también exhiben una mayor diversidad en el rendimiento del ejercicio y por esta razón que incluimos dos ensayos por cada punto de tiempo de evaluación. Animales más jóvenes Mostrar mayor homogeneidad en el rendimiento y por lo tanto, puede ser suficiente un solo ensayo. Además, la diversidad de años animales puede hacer comparaciones directas de sección transversales de una intervención difícil de interpretar, y más éxito se puede lograr comparando el cambio desde el inicio como se hizo en el análisis de los ratones hembra edad. También nos indican como una advertencia que no hemos probado nuestra sesión breve protocolo HIIT en ratones jóvenes, donde es posible que un efecto techo en funcionamiento puede enmascarar los beneficios de nuestra sesión breve protocolo HIIT. El protocolo también fue utilizado solamente en la cepa de ratón C57BL/6J, y por lo tanto el impacto de este ejercicio en otras cepas de ratón queda por ser aclarada. Además, los ratones C57BL6/J utilizados en este experimento llevan a SIRT1loxp-exon4-loxp mutación29, que no fue inducido. Estos ratones fueron envejecidos en casa desde el nacimiento; sin embargo, un número insuficiente estaban disponible a los 24 meses de edad a 4 grupos. Por lo tanto, centramos el experimento sólo HIIT y grupos sedentarios. Observamos que la cohorte actual de ratones hembra y nuestra cohorte previamente publicado de ratones machos de17 ambos mejoraron en rendimiento físico utilizando este protocolo HIIT sesión corta.
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Disclosures
Los autores no tienen nada que revelar.
Acknowledgments
Queremos agradecer al personal de cuidado de los animales en la Universidad en el búfalo Animal laboratorio Animal Facility. Esta investigación fue apoyada por una investigación de rehabilitación de asuntos de veteranos y desarrollo Grant RX001066 y la Fundación camino del indio.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Exer-3/6 Open Treadmill w/ Shock, Detection, auto-calibration and PC Interface/Software | Columbus Instruments | 1055-SDRM | The Columbus Instruments 3/6 treadmill allow up to 6 mice or 3 rats simultaneously. The device comes with controllers to allow manual control of treadmill belt speed and shock intensity, or connections to a computer and software to run and control these elements. |
| Bleach | Varies | Varies | 0.25-0.5% Bleach solution (V/V) is used to clean the treadmill belt between sessions |
| Ethanol | Varies | Varies | 70% ethanol solution (V/V) can alternatively be used to clean treadmill belt between runs and sesions. |
| Make-up Brush (large) | Varies | Varies | A make-up brush provides a soft surface and ample length to motivate mice to continue exercise. |
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