Summary
Sessão curta (≤ 10 min) alta treinamento intervalado de intensidade (HIIT) surge como uma alternativa para as modalidades de exercício mais longos, no entanto, as variantes mais curtas raramente são modeladas em estudos com animais. Aqui, descrevemos um 10 min, 3 dias por semana, protocolo HIIT subir escada rolante que melhora o desempenho físico em macho e fêmea com idade de ratos.
Abstract
Treinamento intervalado de alta intensidade (HIIT) está emergindo como uma abordagem terapêutica para prevenir, retardar ou amenizar a fragilidade. Em especial curta sessão HIIT, com regimes que menor ou igual a 10 min é de particular interesse, como vários estudos humanos apresentam rotinas tão curtas quanto alguns minutos duas vezes por semana. No entanto, há uma escassez de estudos com animais que modelam os impactos de curta sessão HIIT. Aqui, descrevemos uma metodologia para um regime HIIT individualmente adaptados e progressiva curta sessão de 10 min dado 3 dias por semana para envelhecido ratos usando uma esteira inclinada. Nossa metodologia inclui também protocolos para avaliação de esteira. Os ratos são inicialmente aclimatados à esteira e então dados de base plana e avaliações de subida da escada rolante. Sessões de exercícios começam com um aquecimento de 3 min, em seguida três intervalos de 1 min em um rápido ritmo, seguido por 1 min em ritmo, uma recuperação ativa. Na sequência destes intervalos, os ratos são dadas um segmento final que começa com o rápido ritmo e acelera por 1 min. O protocolo HIIT é adaptado individualmente, como a velocidade e intensidade para cada mouse são determinadas com base em escores de avaliação inicial anaeróbico. Além disso, detalhamos as condições para aumentar ou diminuir a intensidade para ratos individuais, dependendo do desempenho. Finalmente, intensidade é aumentada para todos os ratos a cada duas semanas. Nós relatamos anteriormente neste protocolo avançado de desempenho físico em ratos masculinos envelhecidos e aqui mostrar também aumenta o desempenho da esteira em envelhecido ratos fêmeas. Vantagens do nosso protocolo incluem o tempo de administração baixa (cerca de 15min por 6 ratos, 3 dias por semana), estratégia para a individualização de ratos para melhor modelo prescrito exercício e um design modular que permite a adição ou remoção do número e comprimento de intervalos para dosear os benefícios do exercício.
Introduction
O exercício regular é eficaz em prevenir ou retardar a muitas doenças associadas a idade como sarcopenia e fragilidade1,2,3,4. No entanto, menos de 15% destas recomendações conheça 65 e mais de 150 min por semana de intensidade moderada exercer mais força
treinamento de5,6. Como a falta de tempo e longas sessões são comuns entraves ao exercício, treinamento intervalado de alta intensidade (HIIT) surge como uma alternativa aos regimes tradicionais. HIIT apresenta várias rajadas de intensa atividade que são intercaladas com breves períodos de recuperação ativa, e tem havido interesse recente em identificar os regimes mais curtos que ainda produzem resultados benéficos. Tais estudos incluem dia 3 um regimes de semana apresentando vezes sessão total de 4 min7, 2-3 min8, 1,5 min9, um único min10e até 40 s11.
Da mesma forma, tem havido interesse substancial em modelos animais de HIIT. A maioria dos estudos utilizados ratos12,13,14,15,16,17,18,19,20, 21 ou ratos22,23,24,25 e foram realizados utilizando uma esteira, embora alguns outros usado natação protocolos26,27 , 28. a maioria desses estudos use o VO2máx para definir a intensidade inicial do exercício13,14,19,21,24. Além disso, embora um benefício frequentemente descrito de HIIT é ter regimes mais curtos, quase todos estes identificaram regimes de característica de estudos esse passado 30 min ou mais11,12,13,14 ,15,18,19,21, com excepção de um, com um ligeiramente mais do que 10 min regime20e outra com 19 min através de três diferentes intensidades de16. A nosso conhecimento, existem não relatados estudos com animais que examinar um 10 min ou menos regime HIIT ou adaptar o regime para animais individuais, com excepção do nosso estudo publicado17 que serve como base para este protocolo.
Aqui, descrevemos um protocolo para HIIT em ratos envelhecidos projetados para modelo individualizado, variantes de sessão curta (≤ 10 min) usados recentemente em estudos humanos7,8,9,10,11. O método inclui um regime de 10 min em uma esteira inclinada (25°) com um aquecimento de 3 min e quatro intervalos de 1min em alta intensidade, intercaladas com três segmentos de recuperação activa de 1 min. Vantagens do protocolo incluem maior relevância clínica, como apresenta estratégias para adequar a intensidade para animais individuais, definindo as intensidades que não são baseadas no VO2máx, evitando assim a necessidade de esteiras metabólicas e modular concepção segundo a qual o número de intervalos e temporizações é facilmente ajustável. Além disso, neste protocolo nós fornecem instruções para duas estratégias para avaliação de esteira, que incluem o intervalo plana contínuo e árdua, para examinar a resistência. Usando estes métodos, podemos estender nossas conclusões anteriores daquela sessão curta que HIIT aumentou a capacidade funcional em camundongos machos envelhecidos17e agora demonstram HIIT aumenta desempenho de esteira em ratos fêmeas envelhecidos.
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Protocol
Todos os estudos e protocolos experimentais foram aprovados por e em conformidade com as diretrizes da Universidade de Buffalo e VA Western New York Cuidado Animal e comissões de utilização.
1. experiência de instalação e Conselho geral
Nota: Um total de vinte e quatro ratos fêmeas em um fundo de C57BL/6J foram utilizados neste protocolo começando com 23 meses de idade. Os ratos carregava uma condicional SIRTloxp-exon4-loxp mutação29, no entanto, isto não foi induzido neste experimento.
- Certifique-se que ratos recebem identificadores permanentes, como as marcas auriculares, chips RFID, ou tatuagens de cauda.
Nota: Recomenda-se também usar marcações temporárias (por exemplo, marcador permanente para marcar caudas) para identificação rápida durante os períodos de avaliação. - Limpar a esteira com 0.25-0.5% (v/v) de alvejante ou etanol a 70% (v/v) no final do dia ou para remover fezes ou urina entre ensaios experimentais. Soluções de secas completamente antes de iniciar um novo julgamento.
Nota: Etanol pode aumentar o desgaste para a correia de esteira. É recomendável que a esteira ser limpo entre cada execução se trabalhando com camundongos machos alojados em grupo a fim de minimizar no combate de jaula. Recomenda-se realizar avaliações de esteira ao mesmo tempo do dia em cada ponto de tempo em estudos longitudinais30,31,32, e se outras avaliações estão sendo realizadas, a ordem deve permanecer o mesmo. O investigador executando o experimento também deve ser cego para as designações de grupo dos ratos.
2. aclimatação ratos para aparelhos de esteira
Nota: Inicie a aclimatação dos ratos 1 mês antes experimentos de linha de base.
-
Configure o programa de formação inicial usando o software de esteira (v3.4.7) no modo Manual (Figura 1 e tabela 1).
- Abra o software de esteira. Em seguida, clique sobre o arquivo e abra o experimento.
- Entrada dos valores indicados na tabela 1 na guia Manual (Figura 1), sob a aclimatação.
- Introduzir o número de sessão como 1, o número de canais ativos como 1 a 6, dependendo do número de ratos, o número de visitas à grade como 10 e o número de choques como 20.
Nota: Intensidade do choque para esta execução inicial é definida no nível 1 (0,46 mA).
- Defina a inclinação da esteira para 0° (plana).
- Segurar os ratos pela cauda, ao colocar na esteira e colocar ratos diretamente no cinto para evitar começando ratos da grelha de choque.
- Use uma escova ou um abaixador de língua para manter ratos longe da grade de choque quando começa treinamento ou avaliação. Nudge ratos para começar a executar para evitar choques não intencionais.
- Depois de cada mouse é dado o programa de formação inicial, repita o programa como acima com a intensidade do choque aumentada para nível 2 (0,59 mA) pelo menos 15 min entre treinamentos.
-
Um ou dois dias após o programa de formação inicial administrar a aclimatação de subida da escada rolante.
- Abra o software de esteira. Clique sobre o arquivo e abra o experimento.
- Os valores na guia básico de entrada conforme indicado na tabela 2 sob a aclimatação.
- Sob a Deteção de choque, de entrada o número de sessão como 1, o número de canais ativos como 1 a 6, dependendo do número de ratos, o número de visitas à grade como 10 e o número de choques como 20.
- Clique na guia Modo de perfil (Figura 2) e para a etapa 1, entrada a uma velocidade inicial de 0 m/min e uma velocidade final de 5 m/min, com um período de 5 s.
- Adicione um etapa 2 com uma velocidade de início de velocidade 5 m/min e fim de 5m/min de aquecimento durante 30 segundos. Adicionar uma etapa de transição que começa em 5 m/min e uma velocidade final de 6 m/min. para 5 s.
- Adicione uma etapa de velocidade de teste que começa em 6 m/min e termina a 6 m/min por 20 s. adicionar uma etapa de transição que começa em 6 m/min e termina em 5 m/min.
- Adicionar um intervalo de recuperação que começa em 5 m/min e termina em 5 m/min para 20 s (Figura 2).
- Repita a etapa 2.6.4 para adicionar etapas de velocidade de teste, conforme indicado na tabela 2 sob a aclimatação.
- Duas semanas antes da avaliação de linha de base, continue a aclimatação, fornecendo duas avaliações de capacidade aeróbia plana esteira conforme descrito na seção 3, dada em dias consecutivos.
- Um ou dois dias após o segundo treinamento de resistência, fornece duas avaliações de capacidade anaeróbica subir escada rolante conforme descrito na seção 4, dada no mesmo dia com um mínimo de 30 min entre treinamentos.
3. avaliação de esteira plana contínua
- Crie um programa de esteira, conforme descrito no passo 2.1, utilizando os valores indicados na tabela 1 sob avaliação. Em Choque deteção, defina o número de sessão como 1, o número de canais ativos como 1 a 6, dependendo do número de ratos, o número de visitas à grade como 10 e o número de choques como 20.
- Monitorar os ratos durante todo o julgamento e remova os ratos do instrumento que atingem os critérios de ponto de extremidade.
Nota: Esta etapa é para evitar ratos inadvertidamente tocar a grade de choque de vizinhos ratos e afetar dados. Parâmetros incluem o tempo total no cinto, a distância percorrida e os choques à relação de visitas. Recomenda-se realizar duas avaliações em cada ponto de tempo, separados pelo menos um dia entre as avaliações.
4. avaliação de esteira de intervalo uphill
- Crie um programa de esteira conforme descrito na etapa 2.6, usando os valores indicados no quadro 2 sob avaliação. Em Choque deteção, defina o número de sessão como 1, o número de canais ativos como 1 a 6, dependendo do número de ratos, o número de visitas à grade como 5 e o número de choques como 10.
- Defina o campo intervalo no programa esteira para 0,5.
Nota: Isso permite que cada segundo em vez da cada minuto, o que auxilia na identificação da velocidade no ponto de extremidade para cada mouse para pontos de dados a serem coletados. O programa para automaticamente após a fase de 50m/min devido a limitações de software. Parâmetros incluem a hora no cinto, a distância percorrida e a velocidade de ensaio da última fase concluída com êxito antes de ponto de extremidade. Este último é utilizado para determinar a intensidade da linha de base para o regime HIIT descrito na etapa 5. Recomenda-se realizar duas avaliações por ponto de tempo, separados pelo menos 30 min.
5. curta sessão formação de intervalo de alta intensidade
- Definir a esteira em subida (25°) e remova a tampa de plástico.
- Determine a intensidade de cada rato. Use a velocidade da última fase concluída com êxito (passo 4.5) e encontrar o grupo de intensidade e correspondente Base, Sprinte velocidades de traço usando a tabela 3.
-
Abra o software de esteira e clique no arquivo para criar um novo programa.
- Clique na guia Modo de perfil e para a etapa 1, introduzir uma velocidade inicial de 0 m/min e uma velocidade final conforme indicado sob velocidade de Base , como indicado na tabela 3 , com um período de 5 s.
- Adicionar um aquecer na etapa 2 com uma velocidade de início, a velocidade de Base e velocidade final, a velocidade de Base para 180 s.
- Intervalos de entrada 3 cada com 1) uma etapa de transição que vai da Base para a Sprint por 5 s, velocidade de 2) um passo de cada Sprint para 60, 3) uma etapa de transição que vai de "sprint" a Base de mais de 5 s e 4) um passo para um intervalo de recuperação no < C15 > Base velocidade por 60 s.
- Adicionar uma etapa de transição que vai da Base a velocidade do Sprint mais 5 s e uma etapa final que vai da Sprint para Dash mais velocidade 60 s.
Nota: Programas podem ser salvos, modificados e recarregados.
- Realize o exercício três vezes por semana pelo menos um dia de descanso entre as sessões (ou seja, segunda-feira, quarta-feira, sexta-feira).
- Programas de exercícios de reescrita para aumentar a Base, Sprinte Dash velocidades 1m/min a cada duas semanas.
Nota: Sem choques elétricos são dadas durante o exercício. - Motive os ratos para executar usando um pincel de maquiagem (recomendado) ou abaixador de língua levemente motivar os ratos que caem perto ou na grelha de choque. Se um rato não responder novamente em 5 s, em seguida, 10 s e em seguida repetir cada 30 s ou durante um intervalo de recuperação até o final da sessão.
Nota: Considere remover os ratos do estudo que não correr na esteira em qualquer intensidade ou são incapazes de completar os três primeiros intervalos na intensidade definidos para o grupo de intensidade mais baixo (tabela 3) - Mova os ratos que não podem ser motivados para completar os três primeiros intervalos em duas sessões de exercício consecutivos para reduzir grupos de intensidade (tabela 3).
- Mova os ratos que não requerem a motivação em duas sessões de exercício consecutivos para grupos de intensidade mais elevadas (tabela 3).
- Pegue ratos controle sedentário em gaiolas lugar ao lado da escada rolante como ele é executado. Alternativamente, controles sedentários podem ser colocados na parte da esteira sem movimento por 10 min.
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Representative Results
Um total de vinte e cinco ratos fêmeas foram criados e envelhecido em casa. Os ratos de fundo C57BL/6J carregava um SIRT1loxp-exon4-loxp mutação29; no entanto, esse nocaute condicional não foi induzida e, portanto, todos os mouses exibiram comprimento total Sirtuin1 (dados não mostrados). Aos 24 meses de idade, os ratos foram avaliados para esteira resistência e capacidade de sprint para cima antes e após a administração de dois meses de exercício HIIT (n = 14), ou gaiola restante sedentária (n = 11). Nosso dados mostram que todos os 14 mouses no HIIT grupo esteira maior tempo no cinto, em comparação com 7 de 11 dos ratos SED (Figura 4A, emparelhado o teste T de student p < 0,0001 para HIIT e p < 0,14 para SED). No total HIIT ratos exibiram maior melhoria no tempo de cinto com base na melhor de dois ensaios (HIIT: 18,2 ± 10,5 min de 31,8 ± 13,7 min, delta 13,6 ± 7,5 min versus SED: 19,9 ± 10,0 min de 25,3 ± 7,3 min, delta 5.3 ± 11,4 min, teste T de student não pareado p < 0.0391).
Além disso, detectamos maior aumento na capacidade de subida da escada rolante como 12 dos 14 ratos HIIT aumentou a velocidade máxima enquanto observamos declínio em 8 de 11 ratos SED (Figura 4B, emparelhado o teste T de student p < 0.0022 para HIIT e p < 0,85 para SED). Ratos HIIT também demonstraram maior melhoria na velocidade máxima, em comparação com ratos SED com base na melhor de dois ensaios (HIIT: ± 14,6 4,3 m/min para 17,6 ± 5,5 m/min, delta 3.0 ± 3,0 m/min contra SED: 16,9 ± 3,8 m/min para 16,5 ± 5,0 m/min delta 0,5 ± 5,0 m/min, p do teste T de student não pareado = 0.0441). Tolerância ao choque foi semelhante entre os dois grupos de ratos (choque à grade visite a base de relação - SED: 1,2 ± 0,1 vs HIIT: 1,4 ± 0,4, p = 0,24; ponto de extremidade - SED: 1,2 ± 0,4 vs HIIT: 1,3 ± 0,4, p = 0,46).
Figura 1: parâmetros de modo manual do software de esteira para avaliação de resistência de esteira. O modo manual do software esteira permite o ajuste para protocolos que envolvem aceleração contínua de cinto. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 2: parâmetros do programa do modo de esteira software perfil para avaliação de sprint árdua. O modo de perfil de software de esteira, usado em conjunto com as opções na guia modo manual (Figura 1), permite que a capacidade de criar protocolos com intervalos de velocidade personalizada. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 3: regime de formação de intervalo de alta intensidade esquemático. Base, Sprint e Dash velocidades são indicadas na tabela 3. Velocidade aumenta de 1 m/min a cada duas semanas. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 4. Impactos de HIIT no desempenho da esteira em ratos envelhecidos. Vinte - quatro meses de idade ratos fêmeas foram dadas HIIT (n= 14) ou permaneceram sedentários (SED, n= 11) por 2 meses. Resistência de esteira (A) foi avaliada antes e após a intervenção de exercício como um melhor de dois ensaios dada em dias consecutivos em uma esteira plana. Capacidade de sprint para cima (B) foi avaliada como o melhor de dois ensaios administrados com nada menos que 30 min de descanso em uma escada rolante inclinado (25 °). Linhas indicam ratos individuais. B é linha de base e E é o ponto de extremidade, * * * indicam um valor p < 0,001 e * * * indica p < 0,0001 conforme determinado comparando um student emparelhado T-teste dentro grupo mudança entre a linha de base e ponto final. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Tabela 1: Parâmetros para a aclimatação de resistência de esteira e avaliação de programa.
| Parâmetro de programa | Aclimatação | Avaliação |
| Intervalo de | 1 | 0,5 |
| Duração | 5 | 90 |
| Ativar o modo de perfil | Não verificado | Não verificado |
| Accel passo | 1,0 m/min | 1 m/min |
| Accel Int | 60 segundos | 120 segundos |
| Velocidade máxima | 10 m/min | 35 m/min |
| S_speed | 5 m/min | 5 m/min |
| Taxa de choque Rep | 1 hz | 1 hz |
| Intensidade do choque | 1 e depois 2 | 3 |
Tabela 2: Parâmetros para aclimatação sprint árdua e avaliação de programa.
| Parâmetro de programa | Aclimatação | Avaliação |
| Intervalo de | 0,5 | 0,5 |
| Duração | 10 | 90 |
| Ativar o modo de perfil | Verificado | Verificado |
| Accel passo | N/A | N/A |
| Accel Int | N/A | N/A |
| Velocidade máxima | 15 m/min | 35 m/min |
| S_speed | 5 m/min | 5 m/min |
| Taxa de choque Rep | 1 hz | 1 hz |
| Intensidade do choque | 2 | 3 |
| MODO de perfil (Veja figuras 1 e 2 para configurar parâmetros de programa) | ||
| Testar intervalos | 8, 10, 10, 10 m/min | 6, 8, 10, 11, 12... 51, 52 m/min |
Tabela 3: Designações de intensidade para HIIT exercem de ratos.
| Grupo intensidade | Pontuação de Sprint para cima da linha de base | Velocidades de exercício inicial | ||
| Base | Sprint | Souza silva | ||
| 0 | < 8m / min | 5 m/min | 7 m/min | 10 m/min |
| 1 | 8-16 m/min | 5 m/min | 10 m/min | 15 m/min |
| 2 | 17-25 m/min | 8 m/min | 13 m/min | 18 m/min |
| 3 | > 25 m/min | 11 m/min | 16 m/min | 21 m/min |
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Discussion
Benefícios de sessões curtas são um aspecto-chave do treinamento intervalado de alta intensidade que captura científica e o interesse público. No entanto, estudos em animais raramente investigar regimes HIIT que são 10 minutos ou menos. Aqui, descrevemos um protocolo para um regime 10 min sessão curta HIIT subir escada rolante do exercício que melhorou o desempenho de esteira em ratos fêmeas envelhecidos e que temos demonstrado anteriormente para aumentar o desempenho físico em ratos masculinos envelhecido17. Uma força do nosso protocolo que é além do protocolo, sendo apenas 10 min de comprimento, o design modular tais que o número de intervalos pode ser adicionado ou removido para fazer os protocolos que são mesmo um min de comprimento. Além disso, o comprimento dos intervalos pode ser modificado, fornecendo várias estratégias para dosear o exercício e avaliar os impactos.
Outra força deste protocolo é que incluímos um sistema para adequar o regime de exercício para as capacidades físicas dos ratos individuais, que, a nosso conhecimento, apenas um outro estudo33 além de nosso relatório em camundongos machos envelhecidos17 tem usado. Apesar de alfaiataria individualmente uma intervenção de exercício apresenta variabilidade no projeto experimental, uma importante vantagem deste método é que ele modela melhor a administração do exercício prescrito em ambientes clínicos humanos. Além disso, os animais não treinar em intensidades muito fácil ou difícil, que poderia ser um fator significativo em experimentos onde a população animal apresenta diversidade na capacidade de exercício (ou seja, durante o envelhecimento). Uma outra vantagem desta metodologia é que não exige o uso de esteiras metabólicas para determinar o VO2máx, conforme a intensidade do exercício é sob medida para o desempenho do animal, um conceito que é analisado por Picoli et al34.
Este protocolo inclui duas avaliações de desempenho da esteira, sob a forma de um teste de esteira plana acelerando lentamente e um teste de incremento do intervalo de esteira inclinada, respectivamente. Existem vários protocolos que foram publicados para a determinação do desempenho de esteira contínua em ratos utilizando esteiras16,34,35, incluindo um JoVE artigo36. Vários parâmetros diferem através destes estudos e através da literatura, incluindo: choque de inclinação (geralmente 0° ou 5° para o teste de resistência), intensidade (variando de 0.25-1.12 mA) e regras para a definição de exaustão. Também foi observado que 5 choques consecutivos foram comumente usados para definir exaustão em vários estudos. Embora esta estratégia pode induzir exaustão maior do que as regras que nós usamos no nosso estudo e do presente protocolo, este sistema também assume que todos os ratos têm limiares de dor semelhante, que não podem ser verdadeiros, dependendo das condições experimentais. Nossa definição de exaustão de 10 visitas ou 20 choques totais fornece uma estrutura para avaliar se há limiares diferentes de dor. No final, há vantagens e desvantagens para as estratégias e a decisão para definir o ponto de extremidade devem ser melhor alinhadas com os objetivos do estudo. Além disso, alguns protocolos de avaliação de esteira para os ratos foram projetados sem o uso de choques, como um estímulo37. Apesar de existirem vantagens para esta abordagem37, algumas desvantagens a considerar incluem o uso de uma determinação de exaustão que é subjetiva e a dificuldade potencial de avaliar vários mouses simultaneamente.
Além disso, outros autores utilizaram trabalho e poder como parâmetros para descrever o desempenho de esteira35,38,39. A velocidade da correia e aceleração também diversamente são representados na literatura. Como a maioria dos recurso de protocolos aumentando a velocidade, o resultado irá produzir uma mistura da capacidade aeróbia e anaeróbia no mouse, com protocolos mais lentos, fornecendo mais foco na componente aeróbio. Portanto, nós projetamos nosso teste de intervalo de subida da escada rolante para fornecer maior foco sobre o componente anaeróbio17. Para conseguir isso, o nosso protocolo apresenta teste curto intervalos com recuperação ativa entre os testes, permitindo a ratos para alcançar velocidades mais altas e, portanto, maior utilização de anaeróbia em relação a nossa avaliação de resistência de esteira plana contínua. Para nosso protocolo foi utilizado um período de recuperação activa de 20 s entre intervalos, a metade do tempo para a reoxigenação do tecido muscular em tecido humano40. No entanto, notamos que uma limitação deste método é que os impactos específicos sobre metabolismo anaeróbico tem ainda que ser elucidado e incluindo uma análise dos parâmetros anaeróbios como metabolismo glicolítico, a utilização de fosfocreatina e cinética do lactato reforçaria a este método. Além disso, novos estudos que investigam os impactos da mudança de fase e durações de descanso ativo, inclinação e incrementos de velocidade diferente também reforçaria esse método.
A metodologia descrita no presente protocolo, incluindo as avaliações de dois esteira, são projetados para animais mais velhos, em particular e como tal inclui maior tempo para aclimatação de ratos para os protocolos. Aclimatação adequada é um passo fundamental para projeto experimental para assegurar-se de pontos de extremidade são devido à exaustão e não insuficiente aprendizagem pelo mouse. Aclimatação imprópria é provável aparente em estudos longitudinais - ainda, importante, pode não ser notado em estudos transversal. Embora, protocolos de aclimatação mais curtos podem ser possíveis para coortes mais jovens, em nossa experiência, ratos mais velhos requerem maior aclimatação e um protocolo publicado para o exercício de treinamento em envelhecidos ratos inicia aclimatação 1 mês antes, com total de 10 dias dado para esteira de aclimatação41. No entanto, estamos de acordo com Castro et al que fornecer excessiva aclimatação pode afetar o comportamento de e impactos sobre os ratos35 e sua recomendação de 3 a 10 dias total35, para o qual nosso protocolo de aclimatação está em consonância com estas recomendações. Além disso, animais mais velhos também apresentam maior diversidade no desempenho do exercício e por este motivo, que incluímos dois ensaios por ponto de tempo de avaliação. Animais mais jovens exibir maior homogeneidade em desempenho e, portanto, um único julgamento pode ser suficiente. Além disso, a diversidade de animais envelhecidos pode fazer comparações diretas de seção transversais de uma intervenção difícil de interpretar, e mais sucesso pode ser alcançado, comparando a mudança da linha de base como foi feito na análise dos ratos fêmeas envelhecidas. Indicamos também como uma advertência de que nós não testamos nossa sessão curto protocolo HIIT em ratos jovens, onde é possível que um efeito teto no desempenho pode mascarar os benefícios da nossa sessão curto protocolo HIIT. O protocolo também foi usado somente na cepa de rato C57BL/6J, e, portanto, o impacto deste exercício em outras cepas do mouse continua a ser elucidado. Além disso, os camundongos C57BL6/J usados neste experimento realizado um SIRT1loxp-exon4-loxp mutação29, que não foi induzido. Estes ratos estavam com idade na casa desde o nascimento; no entanto, insuficientes números estavam disponíveis aos 24 meses de idade para 4 grupos de poder. Por conseguinte, enfocamos o experimento só HIIT e grupos sedentários. Notamos que tanto a actual coorte de ratos fêmeas envelhecidas e nossa coorte publicado anteriormente de camundongos machos envelhecidos17 ambos melhoraram no desempenho físico, usando esse protocolo HIIT sessão curta.
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Disclosures
Os autores não têm nada para divulgar.
Acknowledgments
Gostaríamos de agradecer o pessoal do cuidado animal na Universidade de Buffalo Animal laboratório Animal Facility. Esta pesquisa foi apoiada por uma pesquisa de reabilitação de assuntos de veterano e desenvolvimento Grant RX001066 e Fundação Indian Trail.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Exer-3/6 Open Treadmill w/ Shock, Detection, auto-calibration and PC Interface/Software | Columbus Instruments | 1055-SDRM | The Columbus Instruments 3/6 treadmill allow up to 6 mice or 3 rats simultaneously. The device comes with controllers to allow manual control of treadmill belt speed and shock intensity, or connections to a computer and software to run and control these elements. |
| Bleach | Varies | Varies | 0.25-0.5% Bleach solution (V/V) is used to clean the treadmill belt between sessions |
| Ethanol | Varies | Varies | 70% ethanol solution (V/V) can alternatively be used to clean treadmill belt between runs and sesions. |
| Make-up Brush (large) | Varies | Varies | A make-up brush provides a soft surface and ample length to motivate mice to continue exercise. |
References
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