Summary
For at undersøge musens udsyn gennemførte vi en truende test. Mus blev placeret i en stor firkantet Arena med en skærm på loftet. Den truende visuelle stimulus konsekvent fremkaldte frysning eller flyvning reaktioner i mus.
Abstract
Det visuelle system i det centrale nervesystem behandler forskellige visuelle signaler. Selv om den overordnede struktur er blevet karakteriseret fra nethinden gennem lateral geniculate kerne til den visuelle cortex, systemet er komplekst. Der er udført cellulære og molekylære undersøgelser for at belyse de mekanismer, der understøtter visuel behandling og i forlængelse heraf sygdomsmekanismer. Disse undersøgelser kan bidrage til udviklingen af kunstige visuelle systemer. For at validere resultaterne af disse undersøgelser, adfærdsmæssige vision test er nødvendig. Her viser vi, at det truende stimulerings eksperiment er en pålidelig muse Visions test, der kræver en relativt enkel opsætning. Det truende eksperiment blev udført i et stort kabinet med et læ i et hjørne og en computerskærm placeret på loftet. Et CCD-kamera placeret ved siden af computerskærmen tjente til at observere musens opførsel. En mus blev anbragt i kabinettet i 10 minutter og fik lov til at acclimere til og udforske omgivelserne. Derefter, skærmen forventede en program-afledt truende stimulus 10 gange. Musen reagerede på stimuli enten ved frysning eller ved at flygte til skjulested. Musens opførsel før og efter de truende stimuli blev indspillet, og videoen blev analyseret ved hjælp af motion tracking software. Hastigheden af musen bevægelse væsentligt ændret sig efter de truende stimuli. I modsætning hertil blev der ikke observeret nogen reaktion hos blinde mus. Vores resultater viser, at den simple truende eksperiment er en pålidelig test af mus vision.
Introduction
Det visuelle system starter på nethinden, hvor visuelle signaler er fanget af fotografer, kanaliseret til bipolar celler (2nd-Order neuroner), og endelig gået til ganglion celler (3Rd-Order neuroner). Nethinde 2nd-og 3Rd-orden neuroner menes at danne flere neurale veje, der formidler særlige aspekter af visuel signalering såsom farve, bevægelse, eller form. Disse forskellige visuelle funktioner videresendes til den laterale geniculate kerne og den visuelle cortex. I modsætning hertil sendes visuelle signaler, der fører til øjenbevægelser, til den overlegne colliculus. Klassisk, to Retino-kortikale veje er blevet identificeret: den magnocellulære og parvocellulære veje. Disse veje indkode bevægelige og stationære objekter, henholdsvis, og deres eksistens legemliggør det grundlæggende begreb parallel behandling1,2,3,4,5, 6. det er For nylig, mere end 15 typer af bipolarceller 7,8,9,10,11 og ganglionceller 12,13,14 ,15,16 er blevet rapporteret i nethinden af mange arter, herunder primat Retina. Disse celler er kendetegnet ikke kun af morfologiske aspekter, men også af udtrykket af særskilte markører og gener8,10,17,18, tyder på, at forskellige funktioner i visuelle signaler behandles parallelt, hvilket er mere kompliceret end oprindeligt forudset.
Cellulære og molekylære teknologier har bidraget til vores forståelse af visuel behandling og potentielle sygdomsmekanismer, der kan opstå som følge af afvigende visuel behandling. En sådan forståelse kan bidrage til udviklingen af kunstige øjne. Selvom cellulære undersøgelser og analyser tilbyder dybdegående viden på celleniveau, vil en kombination af adfærdsmæssige eksperimenter og cellulære eksperimenter i væsentlig grad forøge vores nuværende forståelse af minuttal visuelle processer. For eksempel, Yoshida et al.19 fundet, at starburst amacrine celler er de vigtigste neuroner for bevægelsesdetektering i mus nethinden. Efter cellulære eksperimenter udførte de optokinetic Nystagmus (OKN) adfærds eksperiment for at vise, at mutante mus, hvor starburst-amacrine celler var dysfunktionelle, ikke reagerede på bevægelige genstande og derved bekræftede deres cellulære Undersøgelser. Derudover udførte Pearson et al.20 foto receptor transplantation i muse nethinden for at genskabe synet i syge mus. De gennemførte ikke kun cellulære eksperimenter, men også målte musens opførsel gennem brug af optomotor respons optagelser og vand-labyrint opgaver og dermed tillod Pearson et al. at kontrollere, at transplanterede fotografer restaurerede synet i det tidligere blinde Mus. Taget sammen, adfærdsmæssige eksperimenter er stærke værktøjer til at vurdere musens vision.
Der findes flere metoder til måling af musens udsyn. Disse metoder har fordele og begrænsninger. In vivo forsyner ERG med oplysninger om, hvorvidt muse nethinden, især fotografer og ON bipolar celler, reagerer hensigtsmæssigt på lysstimuli. ERG kan testes enten under scotopic eller Fotopisk betingelser21,22. ERG kræver dog anæstesi, hvilket kan påvirke udgangs målingen23. Den optokinetiske refleks (OKR) eller optomotor respons (OMR) er en robust metode til at vurdere kontrast følsomhed og rumlig opløsning, begge funktionelle komponenter i mus vision. OKR kræver dog operation for at vedhæfte en fikserings anordning til musens kraniet24. OMR kræver hverken kirurgi eller mus træning; Det kræver dog undervisning, at en eksperimentatoren subjektivt kan detektere diskrete muse hoved bevægelser som reaktion på en bevægende rist i en optisk tromle 25,26. Elev lysrefleks måler elev konstriktion som reaktion på lysstimuli, som ikke kræver anæstesi og udviser objektiv og robust respons 19. Selv om elev refleksen simulerer nethinde lysinrespons in vivo, medieres refleks hovedsageligt af de iboende lysfølsomme nethinde ganglion celler (ipRGCs) 27. Fordi ipRGCs repræsenterer et lille mindretal af Rgc'er og ikke tjener som konventionelle Billeddannende ganglion celler, denne måling ikke giver oplysninger vedrørende de fleste ganglion celler.
Det truende lyseksperiment er ikke tidligere blevet betragtet som en større test til måling af musens udsyn. Men det er også en robust og pålidelig vision test på tværs af forskellige arter, såsom mus28,29,: zebrafisk30, Locust31,32, og human33,34, 35. vigtigt, det truende eksperiment er en af kun et par metoder til at teste den Billeddannende vej-det er ikke en refleks pathway-i betragtning af de visuelle og limbiske systemer i centralnervesystemet er involveret i dette kredsløb36, 37af38. Vi har etableret en truende visuel stimulus-system og har vist sin evne til at fremkalde bevægelsesdetektering i musen, som vi bruger som en proxy til at vurdere beskadigelser af mus visuelle system.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle eksperimenter og dyrepasning blev gennemført i overensstemmelse med protokol godkendt af de institutionelle udvalg for dyrepasning og-brug på Wayne State University (protokol nr. 17-11-0399).
1. forberedelse af forsøget
- Byg et rektangulært Open-lid kabinet til at huse musen under truende visuelle stimuli præsentation. Vi konstruerede en 40 cm x 50 cm x 33 cm kabinet ved hjælp af aluminium indramning og PVC-paneler (figur 1a, B). Læg et ark papir til at dække hele gulvet i kabinettet for at sikre nem oprydning mellem forsøg. Tilføj et uigennemsigtigt læ i et hjørne af kabinettet med en indgang vendt mod midten af arenaen for nem indgang og udgang.
- Indstil et kamera med en vidvinkel linse til at indfange musens opførsel. Fastgør kameraet til en bord monteret stander, der støder op til kabinettet. For at få den bedste videooptagelse skal du bruge en kamera ramme på 60 FPS eller højere.
- Indstil en computerskærm oven på kabinettet. Da monitoren ikke kunne ses udefra, blev der forberedt en anden skærm, som duplikerede de billeder, der blev vist på den primære skærm.
- Forbered et truende mønster til projektion. En måde at gøre dette på er at bruge PsychToolbox3 i MatLab software til kode for en ekspanderende sort cirkel (figur 1C). Indstil stimulus til at begynde i en visuel vinkel på 2 ° og udvide til 50 ° over 250 MS; disse parametre bestemmer stimulus hastighed (Se figur 1D for visuel vinkel beregning). Indstil koden til at gentage stimulus 10 gange med et interval på 1 s.
Bemærk: stimulus begyndte hver gentagelse umiddelbart efter afslutningen af den foregående præsentation. Yderligere oplysninger om stimulus præsentation findes i afsnit 3. - Vælg mus af interesse for de truende stimuli. Her skal du bruge 32 sund-eyed mus af en C57 baggrund, mandlige og kvindelige, 4 til 14 uger gamle. Også, bruge 3 blinde mus (svær grå stær i begge øjne) for at vurdere, om reaktionen på truende stimulus var virkelig en visuelt guidet adfærd. Disse blinde mus havde ingen pupil lys refleks og ingen optomotor respons.
2. mus akklimatisering
- Anbring en mus i kabinettet, og lad den frit udforske omgivelserne. Hvis det er muligt, forsøge at minimere stress under dyre overførsel ved hjælp af bagsiden af din frie hånd som et hvilested for musen i stedet for at lade det hænge uden støtte. Musen skal finde hele kabinettet for at være sikker og bør opdage skjulested. Drop et par madpiller i hjørnet modsat tilflugtssted for at opmuntre musen til at forblive uden for tilflugtssted.
- Lad musen acclimere overalt fra 7 til 15 min29,39. Vi tillod 10 min af akklimatisering før stimulus debut. Desuden kan 10 minutters akklimatisering en dag før eksperimentet lette musene.
3. truende visuelle stimuli projektion
- Før du indsætter musen i arenaen, skal du sørge for stimulus kode er klar til at køre for at lette så få belysning ændringer som muligt, mens musen er i kabinettet. Når softwaren er klar til at køre, forsigtigt placere musen i kabinettet.
- 10 sekunder før stimulering, skal du starte videohentningen.
- Start de truende visuelle stimuli, når musen er væk fra læ og bevæger sig frit i den åbne Arena. Vent 10 sekunder efter den sidste stimulus præsentation for at afslutte optagelsen.
- Begynd stimulus præsentation, når musen er i hjørnet længst fra tilflugtssted. Men når mus synes uvillige til at udforske det fjerneste hjørne, præsentere stimulus, når musen er i et andet hjørne af arenaen. Dette synes ikke at gøre en forskel i dyrs adfærdsmæssige respons.
- Overfør musen tilbage til det oprindelige bur. Rengør kabinettet for den næste mus ved at spraye væggene og tilflugt med 70% ethanol og tørre det ned. Udskift papir gulv liner, hvis snavset og flytte tilflugt til den samme oprindelige placering, hvis flyttet under overførsel af dyr og kabinet rengøring.
4. video analyse
- Opspare den video klippe ud nemlig hver mus i. avi format uden fil kompression for at sikre ikke data tab under overførelse hen til den analyse programmel.
Bemærk: manglende komprimering vil føre til større filstørrelse; Brug derfor ekstern harddisk til opbevaring. - Brug analyse software til at spore dyrets bevægelse rundt i arenaen før, under og efter stimulus præsentation. Brug kommercielt tilgængelig software (Se tabel over materialer) med en manuel tracking evne til at spore placeringen af musen hovedet i hver video frame, som genererede X og Y koordination hver 1/60 MS. andre bevægelses sporingssoftware omfatter Fiji (NIH )40 og EthoVision (Noldus).
- Beregn hastigheden og afstanden af musen fra tilflugtssted. Hvis billedet af arenaen er forvrænget på grund af video vinkel, korrigere X og Y koordination forud for beregningen (figur 2).
- Sammenlign parametrene før og efter truende stimulus debut at bestemme, hvordan musen reagerede på stimuli, enten ved frysning, flygter, eller demonstrerer ingen ændring i adfærd29. Definer frysning som episoder, hvor hastigheden var mindre end 20 mm/s for 0,5 s eller længere. Definer flyvning som episoder, hvor hastigheden steg til 400 mm/s eller højere og endte med musen i tilflugtssted. Definitionerne for frysning og flyvning var baseret på dem, der var fastsat af Franceschi et al.29
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
En mus med sunde øjne blev placeret i kabinettet og lov til at akklimere i 10 min. Arenaen med monitoren på loftet blev holdt under mesopiske lysforhold (7 x 105 fotoner/μm2/s). Under akklimatiserings perioden udforskede musen rummet og fandt den uigennemsigtige kuppel som et tilflugtssted. Når musen flyttede væk fra tilflugtsstedet, videooptagelse startede, efterfulgt af indledningen af den visuelle stimulus. Som reaktion på den truende stimulus løb de fleste mus ind i kuplen (flyvning respons), som blev observeret i 30 ud af 31 mus (97%). Nogle af musene udviste fryse respons, før de flygtede (19/31 mus, 61%). Den truende stimulus reducerede lysbetingelsen 1 log (6 x 105 fotoner/μm2/s).
Optagede videoklip blev analyseret ved hjælp af enten en kommerciel analyse software med en manuel sporingsfunktion (Image Pro Plus) eller FIJI (NIH). Ved hjælp af sporingsfunktionen blev musens position identificeret i hvert billede af videoen (60 frames/s) før, under og efter de truende stimuli. Vi analyserede hastigheden ændringer over tid samt afstanden til læ (figur 3). Når flyvningen indtraf, hastigheden brat steg og afstanden til læ reduceret i overensstemmelse hermed. I modsætning hertil var hastigheden nær 0 mm/s, når mus frøs. Latenstiden fra begyndelsen af de truende stimuli til flyvning varierede fra 0,1 til 6,0 sekunder (gennemsnit 2,2 s, 30 mus). Intervallet for maksimal hastighed for flyvning respons var 500-3000 mm/s (30 mus).
Figur 1 : Eksperimentel system. (A) skematisk af det truende stimuli kabinet. En computer Monitor (21 ") dækker loftet. Der er en uigennemsigtig kuppel i et hjørne af kabinettet, hvor en mus kan tage tilflugt. En videoskærm med en vidvinkel linse fanger musens opførsel. (B) samlet billede af hele vores setup. Den sekundære skærm duplikerer det billede, der vises på stimulus displayet. (C) diagram over de truende stimuli. Den truende stimulus begynder ved 2 ° (1,15 cm) og holder på denne størrelse for 250 MS. derefter udvides til 50 ° (30,8 cm) i løbet af 250 MS og forbliver 50 ° for en ekstra 500 MS. denne 1s-sekvens gentages 9 gange, før den afsluttes. (D) diagram over stimulus beregninger. Højden af buret dikterer den nødvendige start-og størrelse (i centimeter) af stimulus for at producere en stimulus, der udvider fra 2 ° til 50 °, når direkte over musen. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2 : Analyse beregninger. Beregninger til korrektion af skævvridning fra vidvinkel linse. På grund af placeringen af kameraet, vises gulvet i arenaen som en trapez i stedet for et rektangel (venstre). Derfor skal X-og Y-koordinaterne for musen korrigeres, så de nøjagtigt analyserer musens position (midt). Ved hjælp af geometrien af kongruente trekanter, er det muligt at finde, hvor meget x-koordinaten skal skifte for at korrekt repræsentere musens bevægelse i det 3-dimensionelle rum (højre). Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3 : Repræsentative reaktioner på de truende stimuli. (A) et eksempel på en mus bevægelse spores i arenaen. En rød cirkel viser kuplen, hvor musen flygtede til og opholdt sig, indtil de truende forsvandt. 1 = Muse position startpunkt, når videooptagelse startet. 2 = bevægelse før stimulus debut, når musen udforsket arenaen. 3 = truende stimulus startede. Musen stikkes til kuplen (vist med en rød stiplet linje). 4 = musen opholdt sig i kuplen indtil og efter afslutningen af stimulus. (B) hastighedsændringer som funktion af tid for denne mus. Den stiplede linje angiver, hvornår stimuleringen af den truende vækst begyndte. Stimulus varighed er angivet med den gule baggrund. Den fulde 10 sekunders cyklus er ikke vist her, da musene forblev stationære i tilflugtssted for hele stimulus varighed. (C) afstand fra kuplen over tid for den samme mus i (a) og (B). (D) og (E) hastigheden og afstanden til kuplen for en mus, der udviste fryse reaktionen (fryse varighed vist med den røde dobbeltsidet pil) inden flyvningen. Hastigheden blev reduceret i forhold til kontrol (før truende). Afstanden til kuplen ændrede sig ikke i denne periode. Klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Med de truende visuelle stimuli system, et flertal (97%) af raske øjen-mus viste flyvning respons. En af 29 mus viste ikke en oplagt flyvning respons. Men musen gik mod kuplen og forblev i nærheden af det, indtil truende forsvandt, hvilket indikerer, at musen var mindst forsigtige, da de truende stimuli opstod. Derfor, de truende stimuli konsekvent fremkaldte medfødte frygt svar i sunde øjne mus. På den anden side viste tre blinde mus ingen reaktioner på de truende (foreløbige resultater). Tilsammen viser vi, at de truende eksperimenter er en nyttig og konsistent vision test for mus.
Vi sætter hastigheden af de truende stimuli på 192 grad/s. Franceschi et al.29 undersøgte de truende reaktioner ved varierende hastigheder, 5 til 84 grader/s og observerede fryse svar fortrinsvis ved lavere hastighedsniveauer. Yilmaz og Meister28 observerede flyrespons ved 35 til 350 grader/s; flyventetid var dog længere ved højere hastigheder. Derfor, at fremkalde konsekvente flyvning svar, truende bør være med en hastighed på 50 grad/s eller derover. Truende stimuli kan genereres nemt selv med standard præsentationssoftware. Men, sådan software kan ikke skabe højere hastigheder for truende stimuli. Vi brugte i stedet MatLab og PsychToolbox3 til at skabe de visuelle stimuli på 192 grader/s.
Vi akklimatiseret musene for 10-15 min før de truende stimuli, som er den akklimatiserings tid tidligere forskere beskrev 28,29,39. Vi testede desuden om akklimatisering dagen før ændrede den truende opførsel. Vi placerede musene i kabinettet i 10 minutter uden truende stimuli dagen før de truende stimuli. Denne akklimatisering forkortede flyventetiden betydeligt (p < 0,01, n = 7 mus, data ikke vist). Selv om 10 minutters akklimatisering på dagen for truende konstant forårsagede flyvning svar, 1 dag forudgående akklimatisering faldt ventetid af flyvning svar.
Der er nogle begrænsninger for anvendelse af truende stimuli som en vision test. For det første er det svært at teste det ene øje ad gangen. Med mindre det ene øje suturerer, testes begge øjne sammen. For det andet, mekanismerne i den adfærdsmæssige truende reaktion er ikke blevet fuldt etableret. I Retina foreslog Yilmaz og Meister 28 , at ventrale off-dsgcs (retning-selektive ganglion celler), men ikke on-dsgcs, formidle de truende signaler til at forårsage reaktioner. Denne konklusion opstod ud fra deres resultater, at mus reagerede på mørke truende stimuli, men ikke til hvid truende. I hjernen, Wei et al.36 og Shang et al.37 demonstreret, at de veje fra den overlegne colliculus gennem amygdala og periaqueductal grå er ansvarlige for den truende. Der bør dog gennemføres flere undersøgelser for at bekræfte disse undersøgelser.
Selv om nogle begrænsninger findes med hensyn til den truende eksperiment, den truende visuelle stimulus genererer konsekvent og robust frygt respons i mus og bør være en nyttig test af mus vision, som kræver minimal uddannelse af experimenter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af NIH R01 EY028915 (TI) og RPB-tilskud.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 10.1" monitor (2° display) | Elecrow | Elecrow 10.1 Inch Raspberry Pi 1920x1080p Resolution Display | |
| 14" Business Class Laptop 5490 | Dell | 84 / rcrc961481-4860836 | |
| 20" x 50" Absorbant Liners | Fisher Scientific | AL2050 | works well to protect floor of arena, could use any type of liner |
| 21.5" monitor (1° display) | Acer | Acer R221Q bid 21.5-inch IPS Full HD Display | |
| CCD Camera | Lumenera Corporation | Infiniyy3S-1UR | excellent for behavioral studies due to high fps rate (60 fps) |
| Enclosure (alminum frames and PVC panels) | 80/20 Inc. | 4x cat.#9010, 4x cat.#9005, 1x cat.#9000, 5x cat.#65-2616 | excellent, used quick build tab to find PVC, joints, and frame |
| Ethanol | Fisher Scientific | 22-032-601 | |
| Excel Spreadsheet Software | Microsoft Office | user friendly and widespread knowledge of Microsoft Office software | |
| Freearm | Amazon | used to mount camera to the table, could use any mountable extendable arm | |
| ImagePro Premiere 3D | Media Cybernetics | version 9.3 | good program, could use some updating with the automated tracking feature |
| Matlab software (Psychotoolbox 3) | MathWorks | Matlab R2018b 64-bit (9.5.0.944444) | excellent software to generate pattern stimuli of any conditions |
| SteamPix sorftware | Norpix | StreamPix 7 64-bit Single Camera | works well, a few problems with frame dropping but good customer service |
| WD My Book External Hard Drive | Western Digital | WDBBGB0080HBK hard drive 8 TB USB 3.0 | necessary if using .avi files with no compression codec due to large size of files |
| Wide angle lens | Navitar | NMV-5M23 | excellent and necessary to capture entire arena |
References
- Enroth-Cugell, C., Robson, J. G. The contrast sensitivity of retinal ganglion cells of the cat. The Journal of Physiology. 187 (3), 517-552 (1966).
- Boycott, B. B., Wässle, H. The morphological types of ganglion cells of the domestic cat's retina. The Journal of Physiology. 240 (2), 397-419 (1974).
- Livingstone, M. S., Hubel, D. H. Segregation of form, color, movement, and depth: anatomy, physiology, and perception. Science. 240 (4853), 740-749 (1988).
- Livingstone, M. S., Hubel, D. H. Psychophysical evidence for separate channels for the perception of form, color, movement, and depth. The Journal of Neuroscience. 7 (11), 3416-3468 (1987).
- Wässle, H.
- Awatramani, G. B., Slaughter, M. M. Origin of transient and sustained responses in ganglion cells of the retina. The Journal of Neuroscience. 20 (18), 7087-7095 (2000).
- Ghosh, K. K., Bujan, S., Haverkamp, S., Feigenspan, A., Wässle, H. Types of bipolar cells in the mouse retina. The Journal of Comparative Neuroscience. 469 (1), 70-82 (2004).
- Wässle, H., Puller, C., Muller, F., Haverkamp, S. Cone contacts, mosaics, and territories of bipolar cells in the mouse retina. The Journal of Neuroscience. 29 (1), 106-117 (2009).
- Helmstaedter, M., et al. Connectomic reconstruction of the inner plexiform layer in the mouse retina. Nature. 500 (7461), 168-174 (2013).
- Shekhar, K., et al. Comprehensive Classification of Retinal Bipolar Neurons by Single-Cell Transcriptomics. Cell. 166 (5), 1308-1323 (2016).
- Wu, S. M., Gao, F., Maple, B. R. Functional architecture of synapses in the inner retina: segregation of visual signals by stratification of bipolar cell axon terminals. The Journal of Neuroscience. 20 (12), 4462-4470 (2000).
- Sun, W., Li, N., He, S. Large-scale morphological survey of mouse retinal ganglion cells. The Journal of Comparative Neuroscience. 451 (2), 115-126 (2002).
- Volgyi, B., Chheda, S., Bloomfield, S. A. Tracer coupling patterns of the ganglion cell subtypes in the mouse retina. The Journal of Comparative Neuroscience. 512 (5), 664-687 (2009).
- Kong, J. H., Fish, D. R., Rockhill, R. L., Masland, R. H. Diversity of ganglion cells in the mouse retina: Unsupervised morphological classification and its limits. The Journal of Comparative Neuroscience. 489 (3), 293-310 (2005).
- Sumbul, U., et al. A genetic and computational approach to structurally classify neuronal types. Nature Communications. 5, 3512 (2014).
- Baden, T., et al. The functional diversity of retinal ganglion cells in the mouse. Nature. 529 (7586), 345-350 (2016).
- Lindstrom, S. H., Ryan, D. G., Shi, J., DeVries, S. H. Kainate receptor subunit diversity underlying response diversity in retinal Off bipolar cells. The Journal of Physiology. 592, Pt 7 1457-1477 (2014).
- Euler, T., Haverkamp, S., Schubert, T., Baden, T. Retinal bipolar cells: elementary building blocks of vision. Nature Reviews Neuroscience. 15 (8), 507-519 (2014).
- Yoshida, K., et al. A key role of starburst amacrine cells in originating retinal directional selectivity and optokinetic eye movement. Neuron. 30 (3), 771-780 (2001).
- Pearson, R. A., et al. Restoration of vision after transplantation of photoreceptors. Nature. 485 (7396), 99-103 (2012).
- Saszik, S. M., Robson, J. G., Frishman, L. J. The scotopic threshold response of the dark-adapted electroretinogram of the mouse. The Journal of Physiology. 543, Pt 3 899-916 (2002).
- Reuter, J. H., Sanyal, S. Development and degeneration of retina in rds mutant mice: the electroretinogram. Neuroscience Letters. 48 (2), 231-237 (1984).
- Woodward, W. R., et al. Isoflurane is an effective alternative to ketamine/xylazine/acepromazine as an anesthetic agent for the mouse electroretinogram. Documenta Ophthalmologica. 115 (3), 187-201 (2007).
- Cahill, H., Nathans, J. The optokinetic reflex as a tool for quantitative analyses of nervous system function in mice: application to genetic and drug-induced variation. PLoS One. 3 (4), 2055 (2008).
- Prusky, G. T., Alam, N. M., Beekman, S., Douglas, R. M. Rapid quantification of adult and developing mouse spatial vision using a virtual optomotor system. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 45 (12), 4611-4616 (2004).
- Lu, Q., Ganjawala, T. H., Hattar, S., Abrams, G. W., Pan, Z. H. A Robust Optomotor Assay for Assessing the Efficacy of Optogenetic Tools for Vision Restoration. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 59 (3), 1288-1294 (2018).
- Xue, T., et al. Melanopsin signalling in mammalian iris and retina. Nature. 479 (7371), 67-73 (2011).
- Yilmaz, M., Meister, M. Rapid innate defensive responses of mice to looming visual stimuli. Current Biology. 23 (20), 2011-2015 (2013).
- De Franceschi, G., Vivattanasarn, T., Saleem, A. B., Solomon, S. G. Vision Guides Selection of Freeze or Flight Defense Strategies in Mice. Current Biology. 26 (16), 2150-2154 (2016).
- Temizer, I., Donovan, J. C., Baier, H., Semmelhack, J. L. A Visual Pathway for Looming-Evoked Escape in Larval Zebrafish. Current Biology. 25 (14), 1823-1834 (2015).
- Guest, B. B., Gray, J. R. Responses of a looming-sensitive neuron to compound and paired object approaches. Journal of Neurophysiology. 95 (3), 1428-1441 (2006).
- McMillan, G. A., Gray, J. R. A looming-sensitive pathway responds to changes in the trajectory of object motion. Journal of Neurophysiology. 108 (4), 1052-1068 (2012).
- Vagnoni, E., Lourenco, S. F., Longo, M. R. Threat modulates neural responses to looming visual stimuli. Eur The Journal of Neuroscience. 42 (5), 2190-2202 (2015).
- Coker-Appiah, D. S., et al. Looming animate and inanimate threats: the response of the amygdala and periaqueductal gray. Social Neuroscience. 8 (6), 621-630 (2013).
- Tyll, S., et al. Neural basis of multisensory looming signals. Neuroimage. 65, 13-22 (2013).
- Wei, P., et al. Processing of visually evoked innate fear by a non-canonical thalamic pathway. Nature Communications. 6, 6756 (2015).
- Shang, C., et al. Divergent midbrain circuits orchestrate escape and freezing responses to looming stimuli in mice. Nature Communications. 9 (1), 1232 (2018).
- Salay, L. D., Ishiko, N., Huberman, A. D. A midline thalamic circuit determines reactions to visual threat. Nature. 557 (7704), 183-189 (2018).
- Vale, R., Evans, D., Branco, T. A Behavioral Assay for Investigating the Role of Spatial Memory During Instinctive Defense in Mice. Journal of Visualized Experiments. (137), 56988 (2018).
- Tungtur, S. K., Nishimune, N., Radel, J., Nishimune, H. Mouse Behavior Tracker: An economical method for tracking behavior in home cages. Biotechniques. 63 (5), 215-220 (2017).
