Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Medicine

Tavşanlarda Komple Dakriyoadenektomi Kullanarak Şiddetli Kuru Göz Modelinin Oluşturulması

doi: 10.3791/60126 Published: January 8, 2020

Summary

Yeni bir yaklaşım cerrahi tüm orbital gözyaşı bezleri kaldırarak tavşan kronik kuru göz hastalığı neden sunulmuştur. Bu yöntem, daha önce bildirilenfarklı, iyi gözyaşı fizyolojisi ve patofizyolojisi ve oküler terapötik çalışma için uygun sulu eksik kuru göz istikrarlı, tekrarlanabilir bir model üretir.

Abstract

Kuru göz hastalığı (DED) birden fazla etiyolojisi ve değişken semptomları olan, göz yüzeyi iltihabının temel patofizyolojik adım olarak sahip olduğu karmaşık bir hastalıktır. DED anlayışımızdaki gelişmelere rağmen, önemli bilgi boşlukları devam etmektedir. Gelişmeler kısmen bilgilendirici hayvan modellerinin eksikliği nedeniyle sınırlıdır. Yazarlar son zamanlarda lektin konkain A ile tüm orbital gözyaşı bezi (LG) dokuları enjekte ederek indüklenen DED bir yöntem bildirdi. Burada, tüm orbital LG (dakriyoadenektomi) dokularının cerrahi rezeksiyonuna dayalı olarak sulu-eksik DED'nin yeni bir modelini sunuyoruz. Her iki yöntem de tavşanları insan gözlerine olan benzerlikleri nedeniyle göz yüzeyinin büyüklüğü ve yapısı açısından kullanırlar. Bir hafta sonra nicitating membran kaldırılması, orbital üstün LG cerrahi anestezi altında kaldırıldı, palpebral superior LG kaldırılması takip, ve nihayet inferior LG. Dakriyoadenektomi indüklenen şiddetli DED, bir kanıt gözyaşı break up zaman testi ve Schirmer gözyaşı testi nde belirgin azalma ve önemli ölçüde gözyaşı ozmolalarity ve gül bengal boyama arttı. Dakriyoadenektomiye bağlı DED en az sekiz hafta sürdü. Herhangi bir komplikasyon yoktu ve hayvanlar prosedürü iyi tolere etti. Bu teknik, yeterli cerrahi deneyime ve ilgili tavşan anatomisi takdirine sahip olanlar tarafından nispeten kolay bir şekilde ustalatabiliyor. Bu model insan sulu-eksik DED özelliklerini özetler bu yana, oküler yüzey homeostaz çalışmaları için uygundur, DED, ve aday terapötik.

Introduction

Göz altı yüzeyinin korunması ve korneanın optik özelliklerinin korunması için gözyaşı gereklidir. Bunlar üç katmandan oluşur: bir iç müsin kaplama, bir orta sulu bileşen, ve bir lipid kaplama1. Müsin tabakası ağırlıklı olarak konjonktivanın goblet hücrelerinde, ağırlıklı olarak gözyaşı bezlerinde (LGs) sulu bileşende ve ağırlıklı olarak Meibomian bezlerinde lipid tabakasında üretilir1,2. Orbital LGs gözyaşı sulu bileşeni için ana kaynak ve bakteriyel saldırı yüzeyi korumak proteinlerin çoğu için3. Oküler yüzey hastalıkları sulu gözyaşı üretimi kritik bir seviyenin altında azaldığında ortaya çıkar, sulu bileşenin gözün epitel yüzeylerini ve büyüme faktörleri, izozim ve laktoferrin dahil olmak üzere önemli gözyaşı bileşenlerini yoksun bırakarak. LG'ler tarafından yırtılma üretiminin azalması durumunda, konjonktiva ve kornea dokuları değişmiş ortamı telafi etmek için adaptasyonlara tabi tutulmaktadır.

Bu eksik olduğunda orbital LGs ve oküler yüzey kompansatör mekanizmaları türetilen gözyaşı bileşeninin katkısını anlamak, gözün ön segmentinin fizyolojisi ve patofizyolojisi bizim takdir etkiler ve, daha geniş anlamda, tüm dünyada sağlık ve hastalık. Bu konulara deneysel yaklaşım bilgilendirici bir hayvan modeli gerektirir. Sonuç olarak, çeşitli gruplar orbital LGs kaldırılır hayvan modelleri geliştirmek için çalıştılar, böylece göz sağlığı gözyaşı rolünün değerlendirilmesi kolaylaştıran. Böyle bir model son zamanlarda fare4için bildirilmiştir . Tavşan sunuyor, ancak, LG benzer anatomik ve histolojik yapıları da dahil olmak üzere kemirgen modelleri üzerinde birçok farklı avantajlar, ve belki de daha da önemlisi, kornea ve konjonktiva dokularının benzer boyut ve yüzey alanı insan meslektaşları ile karşılaştırıldığında3.

Tavşanlarda LG dokusunun cerrahi rezeksiyonu ile sulu eksik kuru göz hastalığının (DED) oluşturulması yeni değildir. Çok sayıda rapor Schirmer gözyaşı testi5ile ölçülen gözyaşı üretiminde değişken değişiklikler yansıyan değişen başarı ile LG dokularının rezeksiyon uaçık 5,6,7,8. Tavşan ın ilgili anatomisi ve anatomik terminoloji hakkında netlik ayrıntılı bir anlayış bu yöntemin çoğaltılmasında çok yararlıdır. Her ikisine de ayrıntılı bir genel bakış aşağıda verilmiştir.

Gözyaşı bezlerinin anatomisi

Tavşan iki orbital LGs vardır: büyük inferior LG (ILG) ve küçük üstün LG (SLG; Şekil 1). ILG orbital jant inferior ve arka yönü boyunca uzanır. Değişken boyut dışında, ILG'nin ön kısmı, dünya altındaki deride bir protuberance olarak görülebilir oldukça düzgün bir soğanlı görünüme sahiptir(Şekil 2). Bezin geri kalanına göre karakteristik görünümü nedeniyle, ILG'nin "başı" olarak adlandırılır. Başın bir kısmı etrafı sarar ve zigomatik kemiğin dış yüzeyinde yer alır. Bu ILG içine enjeksiyonları rehberlik ultrason biyomikroskobik yararlı bir dönüm noktası olarak hizmet vermektedir. Başın geri kalanı yörüngede daha mediasal9 yaşıyor.

Uzun ve ince olan ILG'nin kalan kısmının karakteristik görünümü nedeniyle bu bölüme "kuyruk" adı verilir. Kuyruk inferior orbital jant boyunca çalışır, ILG'nin başından orbital janta kadar inferior ve posterior orbital rimde değişken anatomi ile sonlandırır (Şekil 3A). Kuyruk, yörüngeiçeriğinden bir fasiyal bant la ayrılan zigomatik kemiğe derin (medial) uzanır ve bir kez daha zigomatik kemiğin dış yüzeyine uzandığı yörüngenin arka kenarına ulaşana kadar. ILG karotis arter dallarından kan akımı alır.

SLG'nin insana benzer iki bileşeni vardır. Bunlardan biri, tarsal plakanın üst arka göz kapağı medial'ında bulunan palpebral superior LG (PSLG). Doğada soğanlı görünür ve daha kolay% 2 floresan ile kaplı görülür sulu gözyaşı sıvısı drenaj çok sayıda delinme açıklıkları vardır(Şekil 3B).

İkinci orbital üstün LG (OSLG), üstün yörüngede bir medial pozisyonda ikamet eden (Şekil 3C). Kafatasının orta çizgisine yakın konumu nedeniyle, zamansal veya alt yörüngeden dış cerrahi yaklaşımlar kullanarak başarılı bir şekilde tanımlamak mümkün olmamıştır. Taze nekropsi örneklerinde veya cerrahi vakalarda, bu bez, dünyaya hafif medial basınç uygulandığında kafatasının sırt yüzeyinde bulunan posterior incisure ile prolapsed edilebilir. Bu glandüler dokunun prolapsusu ultrason biyomikroskopisi ile belgelenebilir.

PSLG ve OSLG bitişik yapılardır. OSLG, duktal mimarisi ana boşaltım kanalında birleşen bir tübuloalveolar yapıdır. Bu kanal supra-orbital sırt altından geçer ve PSLG sonlandırıcı üst kapak dokularında çalışır. Boşaltım kanalı boyunca Davis'in orijinal tanımlarına uygun glandüler doku10 (Şekil 3D)tespit edilmiştir.

Terminoloji üzerine bir not

Mükemmel ve kapsamlı anatomik açıklamalar da değişen terminoloji kullanın. Davis tarafından klasik orbital anatomi sadece bir üst ve alt LG tanımlar10. Ancak, üst LG yaptığı açıklama açıkça daha özel burada PSLG ve OSLG olarak tanımlanan bölümleri ayrıntıları, alt LG yaptığı açıklama iLG baş ve kuyruk olarak burada tanımlanan bölümleri ayrıntıları. Daha yeni ve kapsamlı anatomik atlas11 zigomatik bezi ve aksesuar LG olarak bu dokuları tanımlar. "Lakrimal bez" terimi burada söz konusu PSLG ve OSLG'yi kapsayacak şekilde kullanılmaktadır. Bu terminoloji daha fazla gereksiz karışıklık olmadan bu yöntemi çoğaltmak için uygundur.

Protocol

Tüm omurgalı hayvan çalışmaları ilgili tüm düzenleyici ve kurumsal yönergelere uygun olarak tamamlanmıştır. Tüm çalışmalar Stony Brook Üniversitesi Kurumsal İnceleme Kurulu tarafından onaylanmış ve Görme ve Oftalmoloji Araştırma Derneği (ARVO) oftalmik ve görme araştırma hayvanların kullanımı için beyanı uyarınca yapılmıştır.

1. Hayvanlar ve konut

  1. 2−3 kg ağırlığında Yeni Zelanda Beyaz (NZW) tavşan kullanın.
  2. Tavşanları tek tek sıkı bir şekilde kontrol edilen bir ortamda barındırın: sıcaklık (65 ± 5 °F), nem (%45 ± %5) ve aydınlatma (12 saat açık/kapalı çevrim).
    NOT: Genellikle grup içinde bulunan tavşanlar arasında sergilenen saldırgan davranışlar nedeniyle, yanlışlıkla oküler yaralanmayı önlemek için hayvanları ayrı kafeslerde tutun.
  3. Tavşanstandart tavşan yemek ve su sınırsız erişim verin.
  4. Kuru gözü etkileyebilecek yanlışlıkla A vitamini takviyesi önlemek için başka bir diyet zenginleştirme ler sağlayın.
  5. DED parametrelerini kaydetmeden en az iki hafta önce tavşanlara alışın.

2. Nitüritasyon zarının çıkarılması

NOT: Basitlik için sağ göz tekniği aşağıda açıklanmıştır. Aynı şekilde sol göz üzerinde bu işlemi tamamlayın.

  1. Alışma döneminde (genellikle ilk hafta) nitritasyon zarını iki taraflı olarak çıkarın.
  2. Uygun büyüklükte bir yasaklama torbasına tavşan yerleştirin.
  3. Tavşanı sakinleştirmek için 1 cc şırınga ve 26 G iğne kullanarak omuzlara aspromazin (1 mg/kg) deri altı enjeksiyon uygulayın. Bu hafif sedasyon için son nokta hayvan normal tarama hareketleri olmadan rahat bir baş pozisyonu korur ve kulakları artık tamamen dik olmasıdır.
  4. Mikropipet kullanarak, 25 μL koruyucu içermeyen lidokain uygulayın (%1) göze. Göz kapakları arasına bir tel kapak spekulumu takın.
  5. 0,3 forseps (veya eşdeğeri) ile apekste nictitating membran kavramak ve kornea yüzeyi üzerinde çekin. 26 G iğne kullanarak nikonjonktival boşluğuna 1:100.000 epinefrin ile %1 lidokain enjekte edin. Nictitating membran üzerinde mütevazı büyüklükte bir leke oluşturmak için yaklaşık 0,3 mL enjekte edin. 1 mL üzerindeki enjeksiyon hacimleri tavşanlar için güvenli doz aralığındadır (2−4 mg/kg).
  6. Tel spekulumu çıkarın. Lidokain ve epinefrin etkisi için yaklaşık 5 dk bekleyin. Bu süre zarfında, adam göz aynı işlemi gerçekleştirin.
  7. Tel kapak spekulumu değiştirin. 0.3 forceps kullanarak kornea yüzeyi üzerinde nictitating membran kavramak ve genişletmek. Tabanındaki membranı tenotomi makasla veya eşdeğeri ile kesin.
    NOT: Kanama genellikle minimaldir, ancak yakın bir yüksek sıcaklık pil kateter ünitesi tutmak ve kanamayı en aza indirmek için gerektiği gibi kullanın. Nicitating membran kesme tabanı üzerinde doğrudan basınç da oluşursa küçük kanamadurdurmak için kullanılabilir.
  8. Tel kapak spekulumu çıkarın. Kornea yüzeyine topikal antibiyotik merhem (neomisin, polimisin, bacitracin ve hidrokortizon) yerleştirin.
  9. Protokolde belirtildiği gibi, göz arkadaşıyla aynı işlemi gerçekleştirin.
  10. Hayvanları tek tek kafeslere yerleştirin ve daha fazla tahlil veya müdahale yapmadan önce, konjonktiva yüzeyi klinik açıdan tamamen iyileşene kadar en az bir hafta boyunca iyileşmesini bekleyin.
    NOT: Komple klinik iyileşme konjonktiva yüzeylerinden herhangi bir şişlik, enjeksiyon veya akıntı eksikliği ile gösterilir. Hayvanlar, koruyucu ptosis olmadan gözlerini normal olarak açık tutmalıdır.

3. Kuru göz parametrelerinin ölçülmesi ve gözyaşı örneklerinin toplanması

  1. Aşağıdaki DED parametrelerini deneysel protokole uygun olarak ölçün: gözyaşı ozmola süresi, Schirmer'in gözyaşı testi ve gül bengal boyama. Daha önce açıklandığı gibi gerçekleştirin12, en az iki araştırmacı bir ekip ile.
    NOT: En az iki araştırmacıdan oluşan bir ekip, aynı saat içinde daha büyük hayvan gruplarının (6 veya daha fazla) etkin bir şekilde ölçülmesine izin vererek olası sirkadiyen varyasyonun sonuçları etkilemesini önler.

4. Cerrahi hazırlık ve anestezi

  1. Yukarıdaki gibi deri altı acepromazin (1 mg/kg) ile bir kısıtlama torbasına yerleştirilen hafifçe yatıştıran hayvanlar.
  2. Cerrahi işaretleri görselleştirmek için kafatasının yüz ve sırt yüzeyindeki tüm kürk kaldırın.
    1. Kesme makası ile trim kürk uzunluğu yaklaşık 1 mm(Şekil 4A, sol) kalıntı ince kürk bırakarak.
    2. Üreticinin talimatlarına uygun hafif tüy dökücü krem kullanarak tüm artık kürk kaldırın(Şekil 4A, sağ).
  3. Cerrahi kesi bölgelerini cerrahi kalemle işaretleyin.
    1. OSLG prolapsusundan sonra arka incisure üzerinde deride küçük bir şişkinlik gelişmesine neden dünyaya medial basınç uygulayarak posterior incisure üzerinde kesi bölgesini belirleyin.
    2. Cerrahi işaretleme kalemi ile kafatasının sırt yüzeyi üzerinde deri üzerinde ön/posterior yönde doğrusal 2 cm işareti yapın.
    3. ILG'nin çıkarılması için kesi planlarken, arka (temporal) yörüngeden anterior (medial) kanthus'a kadar uzanan göz çevresinde uzun, kıvrımlı bir çizgi (alt ve temporal kapak marjından 1 cm) işaretleyin. İşaretlemenin arka yörünge boyunca medial kanthus seviyesine kadar uzatılmasını veya bundan sadece üstün olmasını sağlayabilir (Şekil 4B). Bazı diseksiyonlarda, OSLG ve ILG'yi çıkarmak için kesiler bağlanır.
      NOT: İki taraflı ameliyat yaparken, şu anda her iki yörüngeyi işaretleyin.
  4. Bir monopolar kateter plaka yerleştirilmesine izin vermek için her uyluk lateral yüzeyi üzerinde makas ile kürk 2 ila 3 cm genişliğinde bir yama kırpın.
    1. Monopolar kateter plakası ile iyi bir elektrik selamu mukavebei sağlamak için ultrason jeli uygulayın.
  5. Gerekirse ilaç veya sıvı ları vermek için kulağın marjinal damarlarından birine 25 G intravenöz (IV) kateter yerleştirin.
  6. Anestezinin ilk indüksiyonu için subkutan ksilazin (1 mg/kg) ve IV ketamin (15 mg/kg) verin (IV erişim yoluyla).
    NOT: Eğer tavşan adım 2.3'te açıklanan bitiş noktasını korumak için acepromazine ile önceden uyuşturulmuşsa, alternatif olarak isoflurane ile gaz maskesi sedasyonu kullanın.
  7. Hava yolunu korumak ve korumak için elastik bir bant veya dize kullanarak tutulan bir gırtlak maskesi hava yolunu yerleştirin.
    1. Maskeyi 1 L/dk'da oksijen akışı ile anestezi makinesine bağlayın.
    2. Başlangıçta% 5 olarak isofluran ayarlayın ve daha sonra hayvan sedasyon düzeyine göre tolere olarak azaltmak.
    3. Son yara kapanana kadar isoflurane'yi %2 veya üzerinde koruyun.
      NOT: Cerrahi veya ağrılı uyaranlara yanıt olarak solunum hızı ve hareketlerini izleyerek sedasyon düzeyini değerlendirin. Solunum hızı dakikada 10 nefesin üzerine çıkarsa, tavşan hava yolunu çiğnemeye başlarsa veya ağrılı uyaranlara yanıt olarak herhangi bir hareket görülürse anestezi nin derinliğini artırın.
  8. Çok parametreli bir izleme cihazı veya diğer uygun cihazları kullanarak nabız oksimini, kapnografiyi, kan basıncını, rektal vücut ısısını ve kalp hızını izleyin.
    1. İşlem sırasında hayati değerleri sürekli olarak izleyin ve her 10-15 dakikada bir kaydedin.
  9. Hipotermiyi önlemek için tavşanı ameliyathane (OR) masasına Bir ısıtma yastığının üzerine yerleştirin. Kanamayı en aza indirmek için masayı yaklaşık 30° ters trendelenburg pozisyonunda yatırın.
  10. Steril bir alanı korumak için steril su ve perde ile yarı mukavemetli seyreltilmiş bir povison-iyot çözeltisi ile cerrahi alanı hazırlayın.

5. Komple cerrahi dakriyoadenektomi

NOT: Burada açıklandığı gibi cerrahi dakriyodenektomi 0.3 doku forceps, tenotomi makası, dişli olmayan doku forceps ve makas kullanılarak yapıldı. Bu aletler, cerrahın tercihine göre aynı işlevi gören benzer aletlerle değiştirilebilir.

  1. Önce OSLG'yi çıkarın.
    1. Kesi bölgelerine (cerrahi işaretleme kalem çizgileri ve üst posterior kapak) 1:100.000 epinefrin ve %0.5 bupivacain e-pinefrin ile %2 lidokain karışımı ile 30 G iğneli 5 cc şırınga ile sızma(Şekil 5A).
      NOT: Şırınga ve iğne boyutu kritik değildir.
    2. Cerrahi işaretler boyunca deri kesileri yapmak için bir elektrocerrahi birimine bağlı bir Colorado iğnekullanın. Ayarlar klinik yanıta göre değişebilir ve genellikle hem kesim hem de pıhtılaşma için 10 ila 15 birim arasındadır(Şekil 5B).
    3. Dokuları ayırmak ve altta yatan frontoscutularis kas liflerini ortaya çıkarmak için cilt kesi boyunca karşıt gerginlik uygulayın.
    4. Frontoscutularis kas liflerine sadece medial veya derin konumda bulunan şişkin doku olarak görülen OSLG'nin görselleştirilmesine yardımcı olmak için dünya üzerinde medial basınç uygulayın. Gerekirse, altta yatan incisure ortaya çıkarmak için yan bu kas lifleri taşıyın.
    5. Dişli forceps ile (0.3) ve capsulotomy makası, yavaşça geri çekmek ve OSLG örten fibröz kapsül kesti. OSLG genellikle soluk bir tan rengine sahiptir (Şekil 5C).
    6. Dişli veya dişli olmayan forsepskullanarak, OSLG bezi dokusunu kavrayın ve "el teslimi" tekniğini kullanarak üstün incisure'den yavaşça dışarı çekin. Bezi yörüngedeki konumundan kurtarmak için capsulotomi makas kullanarak küçük, lifli bantları kesin(Şekil 5D).
      NOT: OSLG bezi dokusu çıkarıldığında, tüp benzeri büyük bir yapıya (ana boşaltım kanalı) birleşmeye başlayacaktır.
    7. Bezi mümkün olduğunca tamamen kaldırıldı zaman, doku char oluşturmak için Colorado iğne ile cömert cautery kullanın, mümkün olduğunca derin den derinden incisure içinde bezi kesilen. Bu daha sonra PSLG kaldırılması sırasında doğrulayıcı bir dönüm noktası olarak hizmet verecektir.
  2. PSLG'yi çıkarın.
    1. Evert üst göz kapağı bir pamuk uçlu aplikatör kullanarak. PSLG'nin soğanlı ucu genellikle kolayca görülebilir.
      NOT: Bazı anatomik diseksiyonlarda ana boşaltım kanalını 1 veya 2 mm genişliğinde soluk doğrusal bir yapı olarak görselleştirmek mümkündür.
    2. PSLG'yi dişli çertelerle (0.3) titretin ve tabandan ayıran taban etrafında kesmek için kapsulotomi makası kullanırken göz kapağı yüzeyinden geri çekin (Şekil 6A).
    3. Monopolar kateter ile orta kanamayı kontrol edin.
    4. Diseksiyon için bir doku düzlemi korumak için ayrılmış doku üzerinde sürekli çekiş uygulayın. Bu, SLG'nin ana boşaltım kanalının da çıkarılmasını sağlayacaktır (Şekil 6B).
      NOT: Diseksiyonu yapılırken, genellikle daha üstün ve medial olarak konumlanmış OSLG kaldırılmasından geride kalan katutery izlerini görmek mümkün olduğu üstün orbital jant ilerlemek olacaktır.
  3. ILG'yi yenileyin.
    1. Lokal anestezinin etkili olması için en az 5 dk bekleyin.
    2. Deri, inferior palpebra depresör kas, zigomatik kas zigomaticolabial parçası, ve Colorado mikrodiseseiğne ile orbicularis kas ve bölüm 5.1 OSLG için ayrı.
    3. Monopolar kapotery ile hemostaz koruyun.
    4. Kesi deri işaretleme yoluyla daha derin taşınır gibi, zigomatik kemik veya masseter kas yüzeysel parçası üzerinde bir fasyal düzlemparlak arayın. Bu noktada, doku düzlemini korumak ve kesme için Colorado iğne kullanarak orbital jant doğru üstün taşımak (Şekil 7A).
      NOT: ILG'yi tanımlamak amacıyla, diseksiyonun bu kısmını iLG'nin başının üzerinde gerçekleştirmek en kolay ıstırakidir ki bu da genellikle gözün ön ekstremitesine daha düşüktür.
    5. ILG'yi çevreleyen kapsülü tespit edip inşifa ettikten sonra, ILG'nin tan dokusunu tanımlayın. ILG başının sadece ön kısmı görünür olacaktır(Şekil 7B). Ancak, kafa zigomatik kemerin altından geçerken ve kuyruk içine geçerken(Şekil 7C)medially takip edilebilir.
    6. ILG kuyruğunun daha arka kısmını ortaya çıkaran inferior jant boyunca orbital septum kesmek için tenotomi makas kullanın. Doku düzlemi tanımlandıktan sonra, diseksiyonu tüm kesi hattı boyunca posteriora uzatın (Şekil 7D).
      NOT: ILG kanalı alt fibröz bağ dokularından geçerek kapağın zamansal yönüyle inferior konjonktiva alanına girer. Arka jantta, ILG'nin kuyruğu nda farklı anatomik konfigürasyonlar olabilir. Bazen posterior inferior sona erer (lateral) kanthus, diğer diseksiyonlarda ise daha üstün zamansal yörünge etrafında uzanır.
    7. ILG'nin karotis arter dallarından aldığı kan akımının yanlışlıkla hasar görmesini önlemek için aşırı özen kullanın. Diseksiyonun bu kısmında kan akımı görülebilir (Şekil 7E).
    8. Kuyruğun posterior (lateral) kanthus altında sonlandığı durumlarda, zigomatik kemik boyunca uzanan ILG'nin kuyruğunu ortaya çıkarmak için frontoscutular kasın temporal kısmını ikiye ayırmak gerekebilir.
    9. Tüm ILG izole edildikten ve açığa çıktıktan sonra çıkarın. Büyük boyutu nedeniyle, genellikle makas ile bezi ikiye kesmek ve kuyruk ayrı baş kaldırmak için tercih edilir.
    10. Yörüngedeki büyük venöz sinüse hemen bitişik olarak ILG'nin başını çıkarırken çok dikkatli ilerleyin. Cerrahi rezeksiyonlar sırasında bu yapıdan kanama meydana gelmemiş olsa da, bu riski azaltmak için bol hemostatik yardımcılar mevcuttur.
    11. Tüm bez dokusu nun çıkarılmasından sonra, birden fazla kesilen 5-0 etilen tereftalat sütür ile derin bağ dokusu düzlemi kapatın. 0.3 doku forceps ve bir iğne sürücüsü kullanarak çalışan 6-0 poliglactin 910 sütür(Şekil 7F)ile yüzeysel kasları ve cildi kapatın.

6. Usul sonrası bakım

  1. Hayvanları undrape ve steril su ile cerrahi siteleri temizlemek.
  2. Kesilere topikal oftalmik antibiyotik ve steroid merhemi (neomisin, polimiksin, bacitracin ve hidrokortizon) uygulayın. Bu uygulamaya 2 gün boyunca günde iki kez devam edin.
  3. 26 G iğne kullanarak kürek kemikleri üzerinde 20 mL normal tuzlu deri altı enjeksiyon verin.
  4. 1 cc şırınga ve 30 G iğne kullanarak ağrı kontrolü için deri altı büprenorfin 0.01 mg/kg veya ketoprofen 3 mg/kg verin.
    NOT: Hayvanlar 1−2 gün içinde normal besin alımına ve aktivitelerine geri dönmelidir. Tavşanlar insizyon bölgelerinde ilerleyici şişlik, ağrı, eritem, kalori veya pürülan akıntı ile kanıtlanan klinik enfeksiyon belirtileri için en az haftada bir değerlendirilmelidir. Hayvanlar da kesi siteleri / dikiş hatları kaşımaya başlamaz emin olmak için gözlenmelidir. Dakriyoadenektomi öncesi tüm pençelerin kesilmesi bu konuda yararlı olabilir. Kesi hatlarının çizilmesi gözlenirse, kendine zarar vermemek için standart koruyucu yakalar kullanılabilir.
  5. Anesteziyi tersine çevir.
    1. Hayvan uyaranlara yanıt verdikten ve spontan çiğneme göstermeye başladıktan sonra ancak hava yolu bakıcısı zarar görmeden önce hava yolu bakımını çıkarın.
    2. Hayvanları yaklaşık 1−2 saat veya kafeslerindeki spontan hareketle kanıtladıkları gibi anesteziden tamamen iyileşene kadar izleyin.
    3. Ağrı için hayvanları değerlendirin ve uygun tedavi.
  6. DED herhangi bir klinik önlemler yapmadan önce hayvanların ameliyattan sonra en az 1 hafta boyunca kurtarmak için izin verin.

Representative Results

Burada açıklanan tam dakriyoadenektomi yöntemi 8 hayvanüzerinde uygulandı. Orta derecede cerrahi beceri gerektirir. Ameliyat süresi, ayrı ayrı yapılan ve <10 dakika gerektiren nitritasyon zarının çıkarılması hariç, bilateral cerrahi için ortalama 2,2 saat olarak tahmin edildi. Hiçbir ölüm veya intraoperatif komplikasyonlar ve hiçbir tavşan mütevazı kateter dışında herhangi bir hemostatik yardım gerekli vardı.

Cerrahi yaklaşımımız tüm gözlerde kuru gözü başarıyla indükledi. Bu ded klinik ve laboratuvar belirteçleri bir panel tarafından doğrulandı(Tablo 1). 8 haftalık gözlem sırasında ortalama TBUT preoperatif seviyelerin %75'inden fazlası tarafından bastırıldı (p < tüm zaman puanları için 0.0001). Benzer şekilde, Schirmer'in gözyaşı testi yaklaşık %50 oranında azaldı ve 8 haftalık gözlem için bu şekilde kaldı; takip döneminde iyileşme eğilimi göstermedi. Postoperatif olarak, gözyaşı ozolaritesi DED ile tutarlı% 10 artış gösterdi, postoperatif en az 8 hafta boyunca sürdürülen. Korneada gül benenboy boyama da artmış ve takip 8 hafta boyunca iyileşme belirtileri göstermedi(Şekil 8). Tam dakriyoadenektomi yapılan tüm gözlerde goblet hücre sayılarında belirgin azalma ve kuru göz (konjonktiva gösterim sitolojisi) ile uyumlu epitel değişiklikleri saptandı.

Figure 1
Şekil 1: Tavşan gözyaşı bezi anatomisi (sağ göz). Orbital superior gözyaşı bezi (OSLG) daha büyük bir orbital parça ve daha küçük palpebral bileşenden oluşur. Daha büyük inferior gözyaşı bezi (ILG) anterior/baş ve posterior/kuyruk kısımlarından oluşur. Koordinat eksenleri, metin içinde kullanılan tüm yönlendirme tanımları için kullanılan terminolojiyi gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 2
Şekil 2: ILG başkanının konumu. Kürk çıkarıldıktan sonra sağ yüzün yanal görünümü. Ön yörüngeden aşağı deri konturundaki bir çıkıntı (kalın oklarla gösterilir) iLG'nin başının konumunu gösterir ve bu konumda ki zigomatik kemiğin dış yüzeyinde yer alır. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 3
Şekil 3: Orbital gözyaşı bezleri. (A) Sağ inferior lakrimal bezi (ILG) Evans mavi boya ile boyama sonra ILG kuyruk yakın yakınlığı gösteren (kırmızı ok) sadece zigomatik kemik medial (siyah ok) ve dünya aşağı. (B) Palpebral superior gözyaşı bezinden (PSLG) gözyaşı üretimi. % 2 floresan topikal uygulamadan sonra çekilen hızlandırılmış fotoğraflar. PSLG'den yayılan sulu sıvı, başlangıçta ki koyu mavi veya siyah floresan boyayı parlak sarı yeşile çevirerek (Seidel testine benzer) seyreltiyor. (C) Orbital SLG 'nin (OSLG) tavşan kafatasındaki konumu, kafatasının orta çizgisine yakın bir yerde (noktalı çizgi) posterior incisure (ok) içinde yer alır. Evans mavi boya OSLG ve palpebral superior gözyaşı bezi içine enjekte edildi. (D) OSLG'nin ana boşaltım kanalından histoloji bölümü, sağ üst göz kapağının posterior (temporal) yönüyle alınan hematoksin ve eozin boyaları ile boyanmış histopatolojik kesitte az miktarda glandüler doku (ok) ile çevrilidir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 4
Şekil 4: Cerrahi alan hazırlığı. (A) Sol üst panel: Makaslarla uzun kürkün çıkarılması. Tüm artık ince kürk daha sonra hafif bir tüy dökücü krem ile kaldırılır. Sağ üst panel: ILG'nin cerrahi işaretleme ve yüksek kaliteli ultrasonunun yapılmasını sağlayan tam kürk çıkarılmasından sonra son görünüm. (B) Sağ periorbital bölgenin uygun cerrahi işaretleri gösterilmiştir; Bu örnekte, OSLG ve ILG kaldırmak için kesiler uzun bir eğrilikikesi oluşturmak için bağlanmıştır. Posterior incisure konumu eğrilikidoğrusal kesi site işaretleme (ok) üzerinde küçük bir karma işareti ile gösterilir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 5
Şekil 5: OSLG'nin kaldırılması. (A) Cerrahi bölgeler, işlem sırasında rahatsızlığı en aza indirmek için üst kapak içine ve kesi hatlarıboyunca enjekte edilen 1:100.000 epinefrin ve %0.5 bupivacaine ile %2 lidokain 50:50 kombinasyonu kullanılarak anestezi ile sızılır. (B) Colorado mikrodisesiksiyon iğnesi, önceden işaretlenmiş cerrahi kesi bölgeleri boyunca deri ve yüzeysel kas tabakalarını incitmek için kullanılır. Diseksiyon düzleminin oluşturulmasına yardımcı olmak için yara üzerinde nazik çekiş uygulanır. Küçük pinpoint yanıklar (ok) en iyi yara kapanması sırasında dokuları yeniden hizalamak yardımcı olmak için kesi hattı boyunca eşit uzak noktalarda Colorado iğne ile yapılmıştır. (C) OSLG, posterior incisure'yi örten dokular seferber edildikten sonra (ok) açığa çıkarır. Bezin kapsülü inşildi. OSLG, kaldırılmayı kolaylaştıran dünyaya medial basınç uygulayarak prolapsed olabilir. (D) Forceps OSLG meşgul ve yavaşça arka incisure ile yörünge içinde daha derin konumundan kaldırmak için kullanılır. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 6
Şekil 6: Palpebral superior gözyaşı bezinin (PSLG) ve boşaltım kanalının çıkarılması. (A) Üst göz kapağının eversiyonunu takiben PSLG'nin soğanlı kısmı bülbüllerle meşgul olur ve makas kullanılarak tarsus'tan kesilir. PSLG'ye forceps ile uygulanan çekiş, cerrahi düzlemin bakımı için çok önemlidir. (B) PSLG ve ana lakrimal kanalın diseksiyonu, uygun cerrahi düzlemi korumak için bezi ve kanal dokularında keskin diseksiyon ve sürekli çekiş kullanılarak orbital janta doğru üstün bir şekilde taşınır. Diseksiyon OSLG kaldırıldı noktaya devam etmelidir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 7
Şekil 7: ILG'nin kaldırılması. (A) Deri ve yüzeysel kas, zigomatik kemiğin üzerini örten fasyal düzleme veya masseter kasının yüzeysel kısmına ulaşılına kadar kesilir. ILG başkanı genellikle ön limbus altında bulunan küçük bir çıkıntı olarak açıkça belirgindir. (B) ILG'nin fibröz kapsülü ILG'yi açığa çıkaran makasla kesilir. Kapsül inşifed sonra, bezinin derin bölümleri kolayca kaldırılabilir. (C) ILG başının zigomatik kemik üzerinde yatan en dış kısmı maruz kalmış ve altta yatan zigomatik kemiği ön olarak yansıtmıştır. (D) Inferior jant boyunca orbital septum insizyonu ILG kuyruk ortaya çıkarır. (E) Dış karotis arterin bir dalı ILG'nin (ok) kuyruğunu besler. (F) Tam dakriyoadenektomi sonrası deri kesilerinin kapanmasını takiben görünüm. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 8
Şekil 8: Kornea yüzeyinde Gül Bengal boyama. Dış fotoğraf belirgin boyama gösteren, en burun kadranda dikkat çekici. Tam dakriyoadenektomi geçiren tüm gözlerde ameliyattan 1 hafta sonra belirgin olan ve en az 6 hafta süren benzer değişiklikler gelişti. Dikkat dikkat, halka flaş ışık refleks kuru bir oküler yüzeyden nasıl kuru göz olumsuz görme etkileyebilir gösteren bozulma gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Dakriyoadenektomi
ortalama ± SEM; n = 16 göz
Temel 2. Hafta
Gözyaşı ayırma zamanı, s 60.0 ± 0.0 4.5 ± 1.2
p & 0,0001
Gözyaşı osmolarite, mOsm 291.2 ± 3.7 315.3 ± 5.5
p = 0,001
Schirmer gözyaşı testi, mm 18.3 ± 1.3 10.5 ± 1.6
p = 0,0006
Rose bengal, modifiye NEI puanı 0.0 ± 0.0 4,28 ± 0,6
p & 0,0001
İşletilen vs. temel: Dakriyoadenektomi: TBUT, p < 0.0001; gözyaşı osmolarite, p < 0.001; Schirmer gözyaşı testi, p < 0.0006); ve gül bengal.

Tablo 1: Postoperatif hafta 2'de kuru göz parametreleri.

Discussion

DED, gözyaşı film stabilitesi üzerindeki etkisine göre iki ana gruba ayrılır: sulu eksiklik (gözyaşı filminin sulu bileşeninin üretimi azaldı; ~DED'nin ~%20'si) ve buharlaştırıcı (gözyaşı filminin buharlaşmasının artması; DED'nin ~%50'si). DED hastalarının yaklaşık %30'u her ikisine de kanıt göstermektedir (karışık DED). İltihap ded olan çeşitli etiyolojileri yakınsamaçekirdek mekanizmasıdır 13,14. Bizim yöntem modelleri sulu-eksik DED.

Daha önce de belirtildiği gibi, bizim yöntem çoğaltma önemli ilk adımlar tavşan orbital gözyaşı bezlerinin anatomisi ince noktalarıbir takdir ve çeşitli ve bazen çelişkili anatomik terminoloji ile karışıklık kaçınarak vardır. Popesko ve ark.11 tarafından anatomik atlas son derece kapsamlıdır. Tavşan anatomisi ile daha az rahat olanlar için, nekropsi örneklerinin diseksiyon bu yapılar ile kolay aşinalık sağlar ve yaşayan örneklerde cerrahi kaldırma yardımcı olur.

Hayvan barınma ve iklimlendirme konusunda kritik tavsiyeler bizim arkadaşı yayın12verilmiştir. Aynı makale de her iki yöntemde kullanılan DED parametreleri atamak için yararlı yorumlar sunuyor.

Önceki yöntemin aksine12, Bu bir lgs kaldırmak için gerekli tekniklerin ölçüde ve daha invaziv doğası nedeniyle cerrahi beceri daha yüksek bir düzeyde gerektirir. Bu rezeksiyonlar sırasında en büyük risk, karotis arter dalları gibi LG'lere yakın olan majör damarların yaralanması sonucu oluşan feci kanamadır. Bu, her LG'nin ve cerrahi alandaki marjlarının yeterince görselleştirilmesiyle önlenir. Son olarak, nictitating membran aşırı gayretli çıkarılması Harderian bezinin prolapsusuna yol açabilir, hangi gözyaşı film değerlendirmesi bozabilir.

Tekrarlanabilirliği artıran ve DED'nin şiddetini artıran yöntemimizin yeni bir yönü olan PSLG'nin kaldırılmasıyla konjonktiva bozulmasının miktarını en aza indirmeye özen izlenmelidir. Diseksiyonu yapmak ve dokulara çekiş uygulandığı sürece onu üstün orbital sırta geri taşımak şaşırtıcı derecede kolaydır. OSLG'nin kesilmesinden kaynaklanan kedutery izlerini görebilmek güven vericidir; onlar bezinin ana boşaltım kanalının tam olarak çıkarılmasını onaylarlar.

ILG'nin bütünüyle kaldırılması da zorluklar alabiliyorum. Bu görselleştirmek için en kolay parçası olarak, ilk bezinin başını izole. Bez dokusunun tüm baş çevre dokulardan kolayca ayrılır; ancak, iLG'nin başına ortayda yatan büyük venöz sinüsün zarar görmesini önlemek için bazı bakımlar kullanılmalıdır. ILG'nin kuyruğu zigomatik kemiğin altından geçerken takip edilebilir. Kuyruğun büyük bir kısmını izole etmek kolaydır. Ancak, kuyruk en posterior yönü değişken anatomi ve karotid bir orta ölçekli dalı yakınlığı nedeniyle daha zorlu kanıtlayabilirim. Dikkatli diseksiyonu, ILG'nin tüm marjlarının net bir şekilde görülmesini sağlayarak tamamen kaldırılmasını kolaylaştırmalıdır. Araştırmacı, gözyaşı bezlerinin anatomisi daha önceki tartışmada açıklandığı gibi, bezin kuyruğulateral kanthus altında biter durumlarda daha üstün diseksiyon taşımak için hazır olmalıdır. Not, yazarlar zamansal ve alt dünya boyunca bir eğrisel kesi ile ILG diseksiyon OSLG herhangi bir bölümünü tanımlamak mümkün olmamıştı. Bu teknik olarak mümkün olsa da, bu cerrahi yaklaşım ciddi kanama için çok yüksek bir risk taşır. OSLG'ye arka kesici silik ile yaklaşmak çok daha güvenli olduğunu kanıtlıyor.

ILG'nin boşaltım kanalı alt konjonktiva fornix'e geçerken inferior fasyal düzlemden geçerken görülebilir. Bazen, glandüler görünen doku küçük lobüller burada da görülür ve dikkatle çıkarılabilir.

Burada sunulduğu gibi LG rezeksiyon düzenini korumak için çok yararlıdır. Önce ILG kaldırılırsa, OSLG'nin izolasyonu teknik olarak çok daha zor hale gelir. Bunun temel nedeni, ILG'nin kaldırılmasından sonra OSLG'nin kolayca prolapsed ve bu nedenle tespit edilememesidir.

Modelimizin önemli bir avantajı "modüler" olabiliyor olmasıdır. Başka bir deyişle, dakriyoadenektomi ile indüklenen DED derecesi deneysel ihtiyaçlara hizmet etmek için kalibre edilebilir. Örneğin, tüm LGs rezeksiyonmmülal DED neden olur, ancak sadece SLG rezeksiyon DED hafif formu neden olur ve sadece ILG rezeksiyonu orta şiddette hastalık yaratacak.

Gözyaşı üretiminin azalmasının farklı patofizyolojik olayını özetleyen yaklaşımımız, önceden bildirilen yöntemlere göre ek avantajlar sunmaktadır. Kısaca, başka hiçbir cerrahi model tüm orbital LGs tarafından gözyaşı üretimini ortadan kaldıran5,6,7,15,16; LGs parasempatik denervasyon dahil17, ve gözyaşı üretiminin farmakolojik baskılanması18,19, son iki önemli kurucular olarak off-hedef etkileri olan. Son olarak, bu model, cerrahi teknik onların tam görselleştirme göze bu yana, ana araştırmacı bağımlı önyargı en aza indirir, yani LGs eksik rezeksiyon; bu aslında hiçbir hemostaz, cautery dışında, gerekli olduğu tarafından desteklenir.

Araştırmacı, tüm orbital LG'lerin tam rezeksiyonunun tam gözyaşı yokluğu yaratmadığını niçin anlamalı ve örneğin Schirmer'in sıfıra yaklaşan gözyaşı testi değerleri beklenmemelidir. Bu wolfring ve Krause ve konjonktiva damarları20,21,22aksesuar LGs ve plazma sızıntısı gibi gözyaşı sıvısı her zaman diğer kaynakları olması nedeniyle. Deneysel açıdan bakıldığında, bu oküler yüzeyi korur gibi yöntemin olumlu bir yönü olarak görülmelidir; tam xerophthalmia tamamen modelin yararlılığını ingating kornea yok olur. Ayrıca, mevcut şekillenme, bu model bu küçük bölmeler arasında bu tür telafi mekanizmaları ve sıvı taşıma çalışma için mükemmel bir fırsat sunuyor.

Sonuç olarak, burada gözyaşı fizyolojisi, DED patogenezi ve bu endikasyon için geliştirilen terapötik ajanların çalışma kendini ödünç sulu-eksik DED indükleyen bir roman ve çok yönlü yöntemin özellikleri sunulmaktadır.

Disclosures

Yazarlar Medicon Pharmaceuticals, Inc ve Apis Therapeutics, LLC bir özkaynak pozisyonu na sahip BR dışında hiçbir rakip çıkarları beyan; ve LH, Apis Therapeutics, LLC bir özkaynak pozisyonu ile Medicon İlaç, Inc bir çalışanı.

Acknowledgments

Stony Brook Üniversitesi Tıp Fakültesi'nden hedeflenen Araştırma Fırsatları hibesi ve Medicon Pharmaceuticals, Inc., Setauket, NY'den gelen bir araştırma hibesinin finansal desteğini kabul ediyoruz. Michele McTernan'a editörlük desteği için teşekkür ederiz.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
acepromazine, Aceproinj Henry Schein Animal Health, Dublin, OH NDC11695-0079-8 0.1ml/kg subcutaneously injection for rabbit sedation
anesthesia vaporizer VetEquip, Pleasanton, CA Item # 911103 Protocol 4.8
animal restraining bag Henry Schein Animal Health, Dublin, OH Jorvet J0170 Use appropriately sized bag.
bupivacaine, 0.5% Hospira Inc, Lake Forest IL NDC: 0409-1162-02 Mixed 50:50 with 2% lidocaine with 1:100,000 epinephrine for infiltration of incision sites, protocol 5.1
buprenorphine Henry Schein Animal Health, Dublin, OH 0.01 mg/kg, for postprocedural care, 6.1.4
cautery unit, high-temperature, battery-powered Medline Industries Inc, Northfield, IL REF ESCT001 Keep on hand in case of bleeding, protocol 2.7
clipper, Wahl Mini Arco Henry Schein Animal Health, Dublin, OH No. 022573 Cordless shears for fur removal, protocol 4.2
Colorado needle Stryker Craniomaxillofacial, Kalamazoo, MI N103A Use with electrosurgical unit to make incisions, protocol 5.1 & 5.3
electrosurgical unit with monopolar cautery plate Valleylab, Boulder, CO Force FXc Use with electrosurgical unit to make incisions, protocol 5.1 & 5.3
fluorescein, Ak-Fluor 10% AKRON, Lake Forest, IL NDC17478-253 Dilute to 0.2% with PBS to measure TBUT, measurement of dry eye parameters, protocol 3.1
foceps, curved dressing Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ Storz E1406 delicate serrated dressing forceps
forceps, 0.3 Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ ET6319 For removal of nictating membrane, protocol 2.5
forceps, Bishop Harmon Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ E1500-C Use toothed forceps for dacryoadenectomy, protocol 5.1 & 5.2
hair remover lotion, Nair Widely available Softening Baby oil Dipilitory cream for sensitive skin, protocol 4.2
isoflurane Henry Schein Animal Health, Dublin, OH 29405 Possible alternative sedation, protocol 4.7
IV catheter, Terumo Surflo ETFE 24-gauge Terumo, Tokyo, Japan; available from Fisher Sci., VWR, McKesson, etc. SR-OX2419CA 25-gauge for smaller rabbits; protocol 4.6
ketamine Henry Schein Animal Health, Dublin, OH NDC 11695-0701-1; NADA 200-055 15 mg/kg, protocol 4.7
ketoprofen Hospira, Inc., Lake Forest, IL 3 mg/kg, for postprocedural care, 6.1.4
laryngeal mask airway Docsinnovent Ltd, London, UK Vgel R3 Protocol 4.8
lid speculum, wire Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ Barraquer SUH01 For removal of nictating membrane, protocol 2.4
lidocaine 2% with epinephrine 1:100,000; 50:50 mixture Hospira Inc, Lake Forest IL NDC 0409-3182-02 Pre-treat before removal of nictating membranes, protocol 2.4
lidocaine, preservative-free Sigma-Aldrich, St. Louis, MO L5647 1% in PBS for anesthesia agent, for application to eye, protocol 2.4
micropipette Eppendorf Research Plus 100 uL For application of preservative-free lidocaine to eye, protocol 2.4
micropipette tips World Wide Medical Products 41071052 For application of preservative-free lidocaine to eye, protocol 2.4
monitoring device, multi-parameter SurgiVet, Waukesha, WI V9201 For monitoring of vitals, protocol 4.9
needle, 26-gauge BD, Franklin Lakes, NJ REF 305115 For injection of lidocaine/epinephrine, protocol 2.3 & 2.5
needle, 30-gauge BD, Franklin Lakes, NJ REF 305106 For infiltration of incision sites; syringe and needle size are not critical, protocol 5.1
osmolarity tips TearLab Corp., San Diego, CA #100003 REV R Measure tear osmolarity measurement of dry eye parameters, protocol 3.1
osmometer, TearLab TearLab Corp., San Diego, CA Model#200000W REV A Measure tear osmolarity, measurement of dry eye parameters, protocol 3.1
povidone-iodine solution Medline Industries Inc, Northfield, IL PVP Prep Solution, NDC: 53329-939-04, REF MDS 093944 To maintain sterile field, protocol 4.11
rabbit, New Zealand White Charles River Labs, Waltham, MA (NZW) 2-3 kg Research animals
Rose bengal stain Amcon Laboratories Inc., St. Louis, MO NDC51801-004-40 1% in PBS, for staining the ocular surface, measurement of dry eye parameters, protocol 3.1
saline, normal B. Braun Medical, Irvine, CA REF R5200-01 For postprocedural care, protocol 6.1.3
Schirmer Tear Test strips Eaglevision, Katena products. Denville, NJ AX13613 Measure tear production, measurement of dry eye parameters, protocol 3.1
scissors, Vannas McKesson Medical-Surgical, San Francisco, CA Miltex 2-130 Capsulotomy scissors for dacryoadenectomy, protocol 5.1 & 5.2
scissors, Westcott tenotomy McKesson Medical-Surgical, San Francisco, CA Miltex 18-1480 For removal of nictating membrane, protocol 2.7
sedation gas mask DRE Veterinary, Louisville, KY #1381 Possible alternative sedation, protocol 4.7
surgical marking pen Medical Action Industries, Arden, ND REF 115 Protocol 4.2
sutures, 5-0 Mersilene Ethicon US, LLC Ethylene terephthalate sutures, used for deep connective tissue closure, protocol 5.3.11
sutures, Vicryl 6-0 Ethicon US, LLC Polyglactin 910 sutures, used for superficial muscle and skin closure, protocol 5.3.11
syringe, 1 cc BD, Franklin Lakes, NJ ref 309659 For injection of lidocaine/epinephrine, protocol 2.3 & 2.5
syringe, 5 cc BD, Franklin Lakes, NJ REF 309603 For infiltration of incision sites; syringe and needle size are not critical, protocol 5.1
tissue forceps, 0.8mm Graefe Roboz Surgical Store, Gaithersburg, MD RS-5150 Curved Weck forceps
topical antibiotic ointment (neomycin, polymyxin, bacitracin, and hydrocortisone) Bausch and Lomb, Tampa, FL NDC 24208-785-55 Applied after removal of nictating membrane, protocol 2.8, and for postprocedural care, protocol 6.1.2
ultrasound gel Parker Laboratories, Inc., Fairfield, NJ Aquasonic 100 To ensure electrical contact with monopolar cautery plate, protocol 4.5
xylazine Henry Schein Animal Health, Dublin, OH NADA: 139-236 1 mg/kg, protocol 4.7

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gillan, W. D. H. Tear biochemistry: A review. South African Optometrist. 69, (2), 100-106 (2010).
  2. Conrady, C. D., Joos, Z. P., Patel, B. C. Review: The Lacrimal Gland and Its Role in Dry Eye. Journal of Ophthalmology. 2016, 7542929 (2016).
  3. Schechter, J. E., Warren, D. W., Mircheff, A. K. A lacrimal gland is a lacrimal gland, but rodents' and rabbits' are not human. Ocular Surface. 8, (3), 111-134 (2010).
  4. Shinomiya, K., Ueta, M., Kinoshita, S. A new dry eye mouse model produced by exorbital and intraorbital lacrimal gland excision. Scientific Reports. 8, (1), 1483 (2018).
  5. Bhattacharya, D., et al. Tear Production After Bilateral Main Lacrimal Gland Resection in Rabbits. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56, (13), 7774-7783 (2015).
  6. Chen, Z. Y., Liang, Q. F., Yu, G. Y. Establishment of a rabbit model for keratoconjunctivitis sicca. Cornea. 30, (9), 1024-1029 (2011).
  7. Li, N., et al. Establishment of the mild, moderate and severe dry eye models using three methods in rabbits. BioMed Central Ophthalmology. 13, 50 (2013).
  8. Honkanen, R., et al. A New Rabbit Model of Chronic Dry Eye Disease Induced by Complete Surgical Dacryoadenectomy. Current Eye Research. 1-10 (2019).
  9. Nisha, S., Deepak, K. An Insight Into Ophthalmic Drug Delivery System. International Journal of Pharmaceutical Studies and Research. 3, (2), 9-13 (2012).
  10. Davis, F. A. The Anatomy and Histology of the Eye and Orbit of the Rabbit. Transactions of the American Ophthalmological Society. 27, (1929).
  11. Popesko, P., Rajitova, V., Horak, J. Rabbit - Guinea Pig. A Colour Atlas of the Anatomy of Small Laboratory Animals. 1, Saunders. Philadelphia, PA. (1992).
  12. Honkanen, R. A., Huang, L., Rigas, B. A rabbit model of aqueous-deficient dry eye disease induced by concanavalin A injection into the lacrimal glands: Application to drug efficacy studies. Journal of Visualized Experiments. e59631 (2019).
  13. Wei, Y., Asbell, P. A. The core mechanism of dry eye disease is inflammation. Eye & Contact Lens. 40, (4), 248-256 (2014).
  14. Pflugfelder, S. C., de Paiva, C. S. The Pathophysiology of Dry Eye Disease: What We Know and Future Directions for Research. Ophthalmology. 124, (11S), S4-S13 (2017).
  15. Gilbard, J. P., Rossi, S. R., Gray, K. L. A new rabbit model for keratoconjunctivitis sicca. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 28, (2), 225-228 (1987).
  16. Odaka, A., et al. Efficacy of retinol palmitate eye drops for dry eye in rabbits with lacrimal gland resection. Clinical Ophthalmology. 6, 1585-1593 (2012).
  17. Toshida, H., Nguyen, D. H., Beuerman, R. W., Murakami, A. Evaluation of novel dry eye model: preganglionic parasympathetic denervation in rabbit. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 48, (10), 4468-4475 (2007).
  18. Burgalassi, S., Panichi, L., Chetoni, P., Saettone, M. F., Boldrini, E. Development of a simple dry eye model in the albino rabbit and evaluation of some tear substitutes. Ophthalmic Research. 31, (3), 229-235 (1999).
  19. Xiong, C., et al. A rabbit dry eye model induced by topical medication of a preservative benzalkonium chloride. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 49, (5), 1850-1856 (2008).
  20. Shiue, M. H., et al. Pharmacological modulation of fluid secretion in the pigmented rabbit conjunctiva. Life Science. 66, (7), 105 (2000).
  21. Li, Y., et al. Rabbit conjunctival epithelium transports fluid, and P2Y2(2) receptor agonists stimulate Cl(-) and fluid secretion. American Journal of Physiology: Cell Physiology. 281, (2), C595-C602 (2001).
  22. Dartt, D. A. Regulation of mucin and fluid secretion by conjunctival epithelial cells. Progress in Retinal and Eye Research. 21, (6), 555-576 (2002).
Tavşanlarda Komple Dakriyoadenektomi Kullanarak Şiddetli Kuru Göz Modelinin Oluşturulması
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Honkanen, R. A., Huang, L., Huang, W., Rigas, B. Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits. J. Vis. Exp. (155), e60126, doi:10.3791/60126 (2020).More

Honkanen, R. A., Huang, L., Huang, W., Rigas, B. Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits. J. Vis. Exp. (155), e60126, doi:10.3791/60126 (2020).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter