यहां, हम पुनर्निर्माण माइक्रोसर्जरी में इस्केमिया-रिपरफ्यूजन चोट के रोगविज्ञान का अध्ययन करने के लिए एक पूर्व नैदानिक पशु मॉडल का वर्णन करते हैं। चूहे में सतही कौडल एपिगास्ट्रिक जहाजों पर आधारित यह मुफ्त त्वचा फ्लैप मॉडल इस्केमिया-रिपेरेशन चोट से संबंधित क्षति का प्रतिकार करने के लिए विभिन्न उपचारों और यौगिकों के मूल्यांकन के लिए भी अनुमति दे सकता है।
इस्केमिया-रिपरफ्यूजन इंजरी पुनर्निर्माण माइक्रोसर्जरी में फ्लैप विफलता का मुख्य कारण है। चूहा अपनी लागत प्रभावशीलता और मनुष्यों के लिए इसके अनुवाद के कारण जैव चिकित्सा अनुसंधान के कई क्षेत्रों में पसंदीदा प्रीक्लिनिकल पशु मॉडल है। यह प्रोटोकॉल इस्केमिया-रिपेरेशन इंजरी वाले चूहों में प्रीक्लीनिकल फ्री स्किन फ्लैप मॉडल बनाने की विधि का वर्णन करता है। वर्णित 3 सेमी x 6 सेमी चूहा मुक्त त्वचा फ्लैप मॉडल कई संवहनी लिगेचर और संवहनी पेडिकल के खंड के प्लेसमेंट के बाद आसानी से प्राप्त किया जाता है। फिर, इस्कीमिक अपमान और माइक्रोसर्जिकल एनास्टोमोसिस के पूरा होने के बाद 8 घंटे, मुफ्त त्वचा फ्लैप ऊतक क्षति विकसित करता है। इन इस्केमिया-रिपेरेव चोट से संबंधित नुकसान का अध्ययन इस मॉडल में किया जा सकता है, जिससे यह इस रोगोविज्ञान प्रक्रिया को संबोधित करने के लिए चिकित्सीय एजेंटों का मूल्यांकन करने के लिए एक उपयुक्त मॉडल बन गया है। इसके अलावा, इस पशु मॉडल के मूल्यांकन के लिए प्रोटोकॉल में दो मुख्य निगरानी तकनीकों का वर्णन किया गया है: ट्रांजिट-टाइम अल्ट्रासाउंड तकनीक और लेजर स्पेक्टल कंट्रास्ट विश्लेषण।
माइक्रोसर्जरी पुनर्निर्माण के लिए एक आम शल्य चिकित्सा तकनीक बन गई है जो जटिल ऊतक दोषों को बहाल करने के लिए हस्तक्षेप (उदाहरण के लिए, मुफ्त ऊतक हस्तांतरण) की अनुमति देती है, विच्छेदित अंगों का पुनर्रोपण, और यहां तक कि समग्र ऊतक एलोट्रांसप्लांटेशन भी।
माइक्रोसर्जिकल पुनर्निर्माण दर्दनाक चोटों, जलने या ऑन्कोलॉजिकल रिसेक्शन के कारण होने वाले दोषों की एक विस्तृत विविधता के लिए आदर्श हैं। हालांकि, फ्री फ्लैप फेलियर का कम प्रतिशत है, जिसमें से इस्केमिया-रिपरफ्यूजन (आई/आर) चोट मुख्य जिम्मेदार कारकों में से एक है । सभी माइक्रोसर्जिकल रूप से स्थानांतरित ऊतक इस्केमिया की एक अनिवार्य अवधि सहन करते हैं जिसके बाद रिपरफ्यूजन होता है। प्राथमिक इस्केमिया की यह अवधि आमतौर पर अच्छी तरह से सहन की जाती है; इस प्रकार, माइक्रोसर्जिकल प्रक्रियाओं की सफलता दर 90%1,2से अधिक है . हालांकि, शल्य चिकित्सा संशोधन की आवश्यकता वाले फ्लैप का केवल 63.7% पूरी तरह से बचाया जा सकता है3। इसके अलावा, उंगली में आक्षेप चोटों के पुनर्रोपण के मामलों में, सफलता दर 66%4है; और समग्र ऊतक एलोट्रांसप्लांटेशन पीड़ित I/R चोट के मामलों में, अस्वीकृति प्रतिशत बढ़ जाता है क्योंकि आई/आर चोट जन्मजात प्रतिरक्षा5,6को सक्रिय करती है ।
इसलिए, इस रोगविज्ञानी घटना का अध्ययन रुचि का है। पशु मॉडल शारीरिक तंत्र की जांच और उपन्यास चिकित्सा का आकलन करने से पहले यह मनुष्यों के लिए लागू किया जा सकता है7के लिए आवश्यक हैं । पोत शरीर रचना विज्ञान और चूहों और मनुष्यों के बीच शारीरिक समानताएं चूहों को आई/आर चोट जैसी जैविक प्रक्रियाओं की जांच के लिए एक आदर्श मॉडल बनाती हैं ।
यहां, हम I/R चोट के साथ एक चूहा मुक्त त्वचा फ्लैप मॉडल के निर्माण के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल पेश करते हैं, साथ ही अंतर और पश्चात आकलन के लिए विभिन्न संभावनाएं हैं । इस विधि का समग्र लक्ष्य I/R चोट और संभावित उपचार का अध्ययन करने के लिए एक उपयोगी पूर्वनैदानिक मॉडल का वर्णन करने के लिए अपनी संबंधित क्षति को कम करने के लिए है ।
माइक्रोसर्जिकल मुक्त ऊतक हस्तांतरण बड़े दोषों के पुनर्निर्माण के लिए पसंद की विधि बन गए हैं। इसकेमिया की अवधि ऐसे मुक्त ऊतक स्थानान्तरण के दौरान होती है। जब यह अवधि ऊतक की सहिष्णुता से अधिक होती है, तो I/R चोट अभ्यास मुक्त फ्लैप9की विफलता का कारण बन सकती है । पुनर्निर्माण माइक्रोसर्जरी में I/R चोट का अध्ययन करने के लिए लागत प्रभावी और ट्रांसलेशनल प्रीक्लिनिकल मॉडल विकसित करने की पद्धति का विवरण इस रोगोफिजियोलॉजिकल प्रक्रिया का प्रतिकार करने के लिए विभिन्न यौगिकों के अध्ययन का नेतृत्व करने में मदद कर सकता है ।
वर्णित पशु मॉडल में, संवहनी लिगेचर रखे जाने और मुफ्त फ्लैप उठाए जाने के बाद, कोई हिंदअंग रक्त प्रवाह समझौते नोट नहीं किए गए थे, न ही दर्द या लंगड़ा। जैसा कि कोच्चि एट अल10 ने बताया, हमारे मॉडल ने इंट्रामस्कुलर नेटवर्क के माध्यम से तीन जमानत मार्गों को भी छोड़ दिया।
मुफ्त फ्लैप की निगरानी प्रमुख महत्व11का है, क्योंकि निस्तारण इस्केमिया शुरुआत और इसकी नैदानिक मान्यता के बीच की अवधि से विपरीत संबंधित है। इस उद्देश्य के लिए, मुफ्त फ्लैप का इंट्रा-और पश्चात का अध्ययन किया जाना चाहिए।
इंट्राऑपरेटिव रूप से, व्यापक रूप से उपयोग किया जाने वाला खाली और रिफिल परीक्षण या ध्वनिक डॉप्लर पहचान को सक्षम करता है लेकिन एनास्टोमोसिस12के माध्यम से प्रवाह उपस्थिति या अनुपस्थिति की मात्रा निर्धारित नहीं करता है। इस कारण से, हमने ट्रांजिट-टाइम अल्ट्रासाउंड तकनीक का उपयोग किया, एक उपन्यास विधि जो सर्जनों को माइक्रोसर्जिकल एनास्टोमूसा13के रक्त प्रवाह की मात्रा निर्धारित करने की अनुमति देती है। हमारे अध्ययन में, सभी माइक्रोसर्जिकल एनास्टोमूसा 8 घंटे के इस्कीमिक अपमान के साथ-साथ अध्ययन के अंत में पेटेंट थे। माइक्रोसर्जिकल एनास्टोमूसा के निर्माण के तुरंत बाद, हमने साहित्य8में अनुशंसित न्यूनतम की तुलना में उच्च रक्त प्रवाह की मात्रा को नोट किया। यह अध्ययन के अंत में अच्छा पेडिकल perfusion की भविष्यवाणी की, प्रदर्शन है कि परिणाम microsurgical तकनीक से प्रभावित नहीं थे बल्कि घटनाओं के I/R चोट झरना से । हालांकि, यह तकनीक सीमाओं से मुक्त नहीं है। विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए, माइक्रोसर्जिकल जांच पोत के विमान के लिए तटस्थ आयोजित किया जाना चाहिए, इसे खींच या किसी भी तनाव पैदा नहीं । एक उचित संकेत प्राप्त करने के लिए एक अच्छा ध्वनिक युग्मन की आवश्यकता होती है, जिसे अल्ट्रासोनिक जेल या खारा का उपयोग करके प्राप्त किया जा सकता है। उपकरण द्वारा प्रदान किया गया एक उच्च गुणवत्ता वाला युग्मन संकेत, माप के दौरान विचार करने के लिए एक महत्वपूर्ण पैरामीटर है।
हमने LASCA का उपयोग किया है, जिसे लेजर स्पेक्टल कंट्रास्ट इमेजिंग या लेजर स्पेक्टल इमेजिंग, पश्चात14के रूप में भी जाना जाता है। यह तकनीक यहां सत्यापित के रूप में मुक्त फ्लैप के भीतर प्रवाह के अर्ध-मात्रात्मक वास्तविक समय मानचित्रण के लिए एक मूल्यवान तकनीक का प्रतिनिधित्व करती है। सीमाओं में से एक यह है कि परिणाम मनमाने ढंग से इकाइयों में प्रदान किए जाते है और सीधे वास्तविक प्रवाह मूल्यों से संबंधित नहीं है । इस अर्थ में, इस सहसंबंध को मान्य करने के लिए आगे अनुसंधान की आवश्यकता है। लेजर डॉप्लर फ्लोमेट्री का उपयोग आमतौर पर किया जाता है लेकिन इस तथ्य से सीमित होता है कि यह केवल फ्लैप में एक बिंदु में परफ्यूजन का उपाय करता है, जबकि लाससीए फ्लैप15के भीतर त्वचा परफ्यूजन में क्षेत्रीय परिवर्तनों का पता लगाने की अनुमति देता है। इसके अलावा, हाल ही में एक अध्ययन16 ने संकेत दिया कि LASCA पश्चात फ्लैप परिगलन के उच्च जोखिम पर क्षेत्रों की भविष्यवाणी कर सकता है । हमारे परिणाम बताते हैं कि एलसीए मुफ्त फ्लैप की पेरी और पश्चात निगरानी के लिए एक आशाजनक तकनीक है।
The authors have nothing to disclose.
अनुसंधान परियोजना जेसुस Usón Minimally इनवेसिव सर्जरी सेंटर (CCMIJU), आईसीटी नांबायोसिस का हिस्सा में किया गया था । अध्ययन निम्नलिखित नानबायोसिस इकाइयों से सहायता के साथ किया गया था: U21, प्रयोगात्मक ऑपरेटिंग रूम; U22, पशु आवास; और U14, सेल थेरेपी। इस काम को आईएससीआईआई परियोजना PI16/02164 द्वारा समर्थित किया गया था। अध्ययन डिजाइन, डेटा संग्रह और विश्लेषण, प्रकाशित करने के निर्णय, या पांडुलिपि तैयार करने में funder की कोई भूमिका नहीं थी। आंकड़ों को तैयार करने और वैज्ञानिक ग्रंथसूची का समर्थन करने के लिए आंकड़ों को तैयार करने और फर्नांडा कैरिज़ोसा के लिए मारिया पेरेज को विशेष धन्यवाद दिया जाता है।
AureFlo Unit | Transonic (Ithaca, USA) | N/A | Transit-time ultrasound flowmeter equipment |
Commbined Basic Hand- and Reconstructive Surgery Set (round handle) | S&T AG (Neuhausen, Switzerland) | RHR-SET. Art.No.00795 | Set of microsurgical instruments |
FLOW-i | Maquet Critical Care AB (Solna, Sweeden) | N/A | Anesthesia Delivery System |
Micro clamps ABB-1 | S&T AG (Neuhausen, Switzerland) | 00408V | Double microvascular clamp with frame |
Micro clamps ABB-11 | S&T AG (Neuhausen, Switzerland) | 00414V | Double microvascular clamp without frame |
Micro clamps B-1 | S&T AG (Neuhausen, Switzerland) | 00396V | Sigle microvascular clamp |
Nylon suture 10/0 | Laboratorio Aragó (Barcelona, Spain) | 19921 | Microsurgical suture |
OPMI Pentero 800 | Carl Zeiss AG (Oberkochen, Germany) | N/A | Surgical microscope |
PeriCam PSI System | Perimed AB (Järfälla, Sweden) | N/A | Laser speckle contrast analysis equipment |
Philips Intellivue MX450 | Philips Medizin Systeme (Böblingen, Germany) | N/A | Monitoring system |
Protector posoperatorio para roedores | Fundación Centro de Cirugía de Mínima Invasión Jesús Usón (Cáceres, Spain) | P201400272 | Postoperative protector for rodents |