Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

تقييم تخطيط صدي لتشريح القلب ووظيفته في الفئران البالغة

Published: December 13, 2019 doi: 10.3791/60404
* These authors contributed equally

Summary

ويرد في الدراسة الحالية بروتوكول غير الغازية لتقييم التخطيط صدي القلبية الصدرية لتشريح القلب ووظيفة للفئران الكبار. يتم دراسة صمامات القلب ، وجميع غرف القلب الاربعه والشريان الابهر التصاعدي ، وقوس الابهر ، والشريان الابهري النازل بالتفصيل.

Abstract

أصبح استخدام النماذج الحيوانية التجريبية أمرا حاسما في علوم القلب والاوعيه الدموية. تركز معظم الدراسات التي تستخدم نماذج القوارض علي التصوير ثنائي الابعاد لدراسة تشريح القلب في البطين الأيسر والصدى M-mode لتقييم ابعاده. ومع ذلك ، فان هذا يمكن ان يحد من دراسة شامله. هنا ، ونحن وصف البروتوكول الذي يسمح لتقييم حجم غرفه القلب ، وظيفة البطين الأيسر (الانقباضي والانبساطي) ووظيفة صمامي. وقد استخدمت اله الموجات فوق الصوتية الطبية التقليدية في هذا البروتوكول وتم الحصول علي وجات النظر صدي مختلفه من خلال اليسار parasternal ، قمي والنوافذ سوبرااسترانال. في النافذة اليسرى ، تم الحصول علي المحور الطويل والقصير لتحليل ابعاد الغرفة اليسرى ، والبطين الأيمن وابعاد الشريان الرئوي ، ووظيفة الصمام التاجي والرئوي والاورطي. يسمح الإطار قمي قياس ابعاد غرفه القلب وتقييم المعلمات الانقباضي والانبساطي. كما انه يسمح بتقييم دوبلر مع الكشف والتقدير الكمي لاضطرابات صمام القلب (قلس أو تضيق). يتم تصور الأجزاء والجدران المختلفة للبطين الأيسر في جميع المناظر. وأخيرا ، يمكن ان يكون الشريان الابهر التصاعدي ، والقوس الابهري ، والشريان الابهري التنازلي من خلال النافذة فوق الفوقية. وقد تم الحصول علي مزيج من التصوير بالموجات فوق الصوتية ، وتدفق دوبلر والانسجه دوبلر التقييم لدراسة المورفولوجية القلب ووظيفة. وهذا يمثل مساهمه هامه لتحسين تقييم وظيفة القلب في الفئران البالغين مع تاثير للبحوث باستخدام هذه النماذج الحيوانية.

Introduction

امراض القلب والاوعيه الدموية هي السبب الرئيسي للوفاة في أوروبا ، والمسؤولة عن أكثر من 4,000,000 وفاه سنويا ، علي الرغم من التقدم في العلاج والتشخيص والرصد التي تحسنت نتائج المرضي في السنوات الاخيره. وقد ساهم التطور التكنولوجي السريع في التقدم في رعاية المرضي القلب والاوعيه الدموية. وفي اطار هذه الاداات التشخيصية ، تم إيلاء اهتمام خاص للتصوير الطبي الإحيائي ، الذي يسمح باجراء تقييم تشريحي ووظيفي بطريقه غير تدخليه1و2و3. المثل ، يستفيد الطب من نتائج البحوث الطبية الحيوية. نماذج الحيوانية التجريبية هي مفيده جدا لاختبار فرضيات مستمده من الاعداد السريرية وتطوير العلاجات المبتكرة4،5.

هناك اهتمام متزايد في استخدام تخطيط صدي كاداه بحثيه في النماذج الحيوانية التجريبية ، مما يسمح بالحصول علي قياسات متعددة من الحيوانية واحده في الدراسات الطولية. من المهم ان نلاحظ ان هناك بعض المزايا في استخدام نماذج murine أو القوارض. الفترة القصيرة الحمل ، وانخفاض تكلفه تربيه والإسكان ، ومعرفه الجينوم وامكانيه تطوير الكائنات المحورة وراثيا هي المزايا الرئيسية لهذه الأنواع ، مما يجعلها جذابة لدراسة أليات المعنية في امراض القلب والاوعيه الدموية4،5،6،7،8،9. علي الرغم من ان نماذج الفئران والفار تظهر مزايا مماثله, الفئران هي الخيار الكلاسيكي في دراسات القلب والاوعيه الدموية بسبب البعد المادي الأكبر وانخفاض معدل ضربات القلب التي توفر صورا أفضل في دراسات تخطيط صدي4,5,6,7,8,9,10.

نحن وصف بروتوكول تخطيط صدي باستخدام معدات الموجات فوق الصوتية الطبية التقليدية لتقييم غرف القلب وصمامات القلب (التشريح والوظيفة) باستخدام الفئران Wistar. هذا بروتوكول مختصر وكامل للصور القصيرة والحلقات التي تسمح بالقياسات غير المتصلة ، والتي يمكن مراجعتها لاحقا لدمج متغيرات أو قياسات جديده مع مرور الوقت.

Protocol

تم تنفيذ جميع الإجراءات الحيوانية وفقا للتوجيه 2010/63/EU. تمت الموافقة علي الإجراءات من قبل هيئه رعاية الماشية المؤسسية ، المرخصة من قبل DGAV ، السلطة البرتغالية المختصة لحماية الماشية (رقم الترخيص 0421/000/000/2018).
ملاحظه: واستخدمت الإناث Wistar هان IGS (Crl: وأي (هان) من مختبرات نهر تشارلز (12-16 أسابيع--العمر). وهذا البروتوكول محدد للفئران بمعزل عن السلالة أو العمر أو نوع الجنس.

1. اعداد الفئران لتخطيط صدي: التخدير والارتداد البروتوكول

  1. تزن الفئران.
  2. اعداد مخدر ثلاثه مكونات تتكون من ميدازولام (4.76 ملغ/كغ) ، medetomidine (0.356 مغ/كغ) و الفنتانيل (0.012 ملغم/كغ) ، وفقا لوزن الفئران.
  3. حقن التخدير داخل الصفاق. تحقق من عدم وجود ردود فعل سحب دواسة لتقييم عمق التخدير.
  4. حلق الشعر من منطقه الجذع.
  5. تطبيق هلام دائم لكلا العينين لمنع تجفيف الصلبة.
  6. وضع الفئران تخدير في موقف ضعيف علي قمة لوحه التدفئة من أجل الحفاظ علي درجه حرارة الجسم (37.0 درجه مئوية ± 0.5 درجه مئوية).
  7. تطبيق طبقه من الموجات فوق الصوتية مسخن (قريبه من درجه حرارة الجسم) إلى الصدر ، وبشكل رئيسي في المنطقة التي تغمر القلب. تجنب فقاعات الهواء في الهلام التي يمكن ان تتداخل مع التصوير بالموجات فوق الصوتية.
  8. التخدير العكسي من خلال الحقن تحت الجلد باستخدام atipamezole (0.94 مغ/كغ) و فلومازينيل (0.2532 ملغم/كغ) ، مباشره بعد نهاية التخطيط صدي.
    ملاحظه: توفر هذه التركيبة المخدرة ما يصل إلى 45 دقيقه للتصوير التخطيط صدي. البروتوكول التخطيط صدي الموصوف أدناه متوافق مع اي بروتوكول تخدير آخر.

2-تخطيط صدي

ملاحظه: يتم تنفيذ تخطيط صدي مع معدات تخطيط صدي السريرية التقليدية ، مع مسبار القلب 12 ميغاهيرتز ، وتشمل الصور الثابتة المكتسبة والحلقات في parasternal (المحور الطويل والمناظر المحور القصير) ، قمي (4 ، 5 ، 2 و 3 غرف) والإطلالات الفوقية. ويتم تسجيل تخطيط كهربية القلب لتحديد النهاية-systole ونهاية-انبساط ، لإجراءات القياس واكتساب حلقه (ECG الناجمة)11،12. ويستخدم مسبقا للحفاظ علي تعريف الصورة مستقره بين الفئران: تردد 5-10 ميغاهيرتز ، عمق 2.5 سم ، معدل الإطار 125 اطارا في الثالثة ، دوبلر عينه 1.0 مم واللون دوبلر التعرج السرعة 40 سم/ثانيه. وسجلت حلقات مع ما لا يقل عن 3 نبضات القلب.

  1. عرض المحور الطويل الأيسر
    ملاحظه: وضع المسبار علي الجانب الأيسر من القص وعلامة الفهرس تحولت إلى الكتف الأيمن.
    1. سجل M-وضع الصور في الصمام الابهري, الصمام التاجي المنشورات والبطين الأيسر منتصف تجويف (المؤشر في نصائح الصمام التاجي أو مستوي cordal)1,2,3,4. يجب ان يكون مؤشر الوضع M متعامدا مع بنيه الفائدة1,3,10.
    2. تسجيل حلقه 2D من كافة طرق العرض.
    3. تسجيل حلقه 2D مع التكبير في المسالك التدفق البطين الأيسر.
    4. تسجيل حلقه 2D مع التصوير دوبلر اللون في وقت واحد في الصمامات الابهري والتاجي.
  2. عرض المحور القصير الأيسر
    ملاحظه: ضع المسبار علي الجانب الأيسر من القص مع علامة المؤشر استدارة إلى الكتف الأيسر.
    1. الحصول علي صوره عند مستوي الصمام الابهري عن طريق أماله المسبار قليلا.
    2. تسجيل حلقه 2D من كافة طرق العرض.
    3. تسجيل حلقه 2D مع التصوير دوبلر اللون في وقت واحد في الصمامات الابهري والرئوي.
    4. الحصول علي صوره دوبلر الطيفية النبضي في الشريان الرئوي. يجب ان يكون المؤشر موازيا للتدفق1,3.
    5. الحصول علي صوره من البطين الأيسر علي مستوي العضلات الحليمة عن طريق أماله المسبار إلى أسفل قليلا.
    6. تسجيل حلقه 2D من كافة طرق العرض.
  3. Apical 4-غرفه العرض
    ملاحظه: وضع المسبار في منطقه قمي في الخط الابطيه الاماميه ومع علامة الفهرس تحولت إلى الكتف الأيسر.
    1. تسجيل حلقه 2D من كافة طرق العرض.
    2. تسجيل حلقه من 2D والانسجه دوبلر التصوير بما في ذلك جميع الغرف 4.
    3. التركيز علي غرف القلب اليسرى.
      1. تسجيل حلقه 2D مع التكبير في الأذين الأيسر.
      2. تسجيل حلقه 2D مع التصوير دوبلر اللون في الصمام التاجي والأذين الأيسر.
      3. سجل الصورة المتزامنة M-الوضع واللون دوبلر لتدفق انتشار البطين الأيسر.
      4. الحصول علي موجه نبضيه طيفيه (PW) دوبلر في الصمام التاجي لتدفق البطين الأيسر. ضع العينة في نصائح النشرة التاجية ، في موضعها الانبساطي المفتوح بالبالكامل1،2،3،11،12.
      5. أضافه صوره دوبلر الموجه المستمر (CW) في الصمام التاجي ، إذا كان هناك قلس الصمام التاجي.
      6. الحصول علي صوره دوبلر النسيجية الطيفية في الحلقة التاجية (جدران البطين الأيسر الجانبي والحاجز). محاذاة مؤشر دوبلر PW مع محور طويل من القلب من أجل إنتاج الحد الأقصى للاشاره دوبلر1،2،3،13.
      7. سجل M-وضع الحلقة التاجية لقياس الرحلة الانقباضية للطائرة التاجية (المؤشر في جدار البطين الأيسر الجانبي).
    4. التركيز علي غرف القلب اليمني.
      1. تسجيل حلقه 2D مع التكبير في الأذين الأيمن.
      2. تسجيل حلقه 2D مع التصوير دوبلر اللون في الصمام ثلاثي الابعاد والأذين الأيمن.
      3. احصل علي صوره دوبلر النسيجية الطيفية في الحلقة ثلاثية الحمامات (جدار البطين الأيمن).
      4. سجل M-وضع للرحلات الانقباضية الطائرة ثلاثية الابعاد (TAPSE) عن طريق وضع المؤشر 2D في الحلقة الجانبية ثلاثي الزوايا.
  4. Apical 5-غرفه العرض
    ملاحظه: من 4-غرفه العرض ، أماله المسبار الامامي قليلا إلى الصدر.
    1. تسجيل حلقه 2D من كافة طرق العرض.
    2. تسجيل حلقه 2D مع التصوير دوبلر اللون في الصمام الابهري والمسالك المتدفقة البطين الأيسر.
    3. الحصول علي صوره الموجه النبضي الطيفية دوبلر في المسالك التدفق البطين الأيسر. وضع المؤشر موازيه للتدفق ووضع العينة في القناة اليسرى تدفق البطين4,14.
    4. الحصول علي صوره دوبلر الطيفية موجه النبضي في البطين الأيسر منتصف تجويف لتدفق البطين الأيسر المتزامن وموجات التدفق.
    5. الحصول علي صوره دوبلر موجه مستمرة الطيفية في الصمام الابهري. ويسجل التدفق عبر الوريد تحت خط الأساس والقلس ، إذا كان موجودا ، فوق خط الأساس.
  5. Apical 2-غرفه العرض
    ملاحظه: العودة إلى عرض 4-غرفه وتدوير المسبار 90 درجه عكس اتجاه عقارب الدقيقة.
    1. تسجيل حلقه 2D من كافة طرق العرض.
    2. تسجيل حلقه 2D مع التصوير دوبلر اللون في الصمام التاجي.
  6. Apical 3-غرفه العرض
    ملاحظه: أماله المسبار قليلا الجمجمة.
    1. تسجيل حلقه 2D من كافة طرق العرض.
    2. تسجيل حلقه 2D مع دوبلر اللون في وقت واحد في الصمامات الابهري والتاجي.
  7. النافذة فوق الفوقية
    ملاحظه علي الجانب الأيسر من الفضاء فوق الترقوة مع مسبار الموجهة إلى الأسفل
    1. تسجيل حلقه 2D من قوس الابهر.
    2. الحصول علي صوره الموجه النبضي الطيفية دوبلر في الشريان الابهر التصاعدي.
    3. الحصول علي صوره الموجه النبضي الطيفية دوبلر في الشريان الابهر التنازلي.

3-القياسات

  1. انتقل إلى القياسات ، بما في ذلك السلالة الطولية العالمية. قم باجراء هذه القياسات دون اتصال من أجل تقليل وقت التخدير.

Representative Results

يظهر الشكل 1 موضع المسبار علي الصدر لعرض النافذة الطويلة لعرض المحور (الشكل 2). يتيح هذا العرض قياسات دقيقه لتجويف البطين الأيسر وسماكه الجدار ، ووظيفة الانقباضي (الشكل 3) ، وقطر تدفق البطين الأيسر (للتقديم في صيغ أخرى مثل الناتج القلبي) ، وقطر الابهر التصاعدي ، وقطر الأذين الأيسر. وقد تمت فهرسه جميع ابعاد الغرفة لوزن الجسم. يسمح عرض المحور الطويل بالتصوير التشريحي (مع الصدى ثنائي الابعاد) والأداء الوظيفي (مع صور دوبلر الملونة) بتقييم الصمامات الابهري والتاجي. يسمح هذا المنظر أيضا بتحديد وقياس انصباب التامور ، إذا كان موجودا. يمكن استخدام وضع M لقياسات البطين الأيسر (الشكل 3): ابعاد الحاجز والجدران الخلفية ، وابعاد البطين الأيسر ، ووظيفة البطين الأيسر الانقباضي ، وكتله البطين الأيسر1،3،4،10،14.

يتم تقييم وظيفة البطين الانقباضي الأيسر عن طريق تقصير كسور وأيضا عن طريق تصور رحله وسماكه الجدران خلال دوره القلب (تقييمها من قبل ECG). يتم الحصول علي كتله البطين الأيسر بواسطة الصيغة:
الكتلة LV = 0.8 x 1.04 x [(الاحتجاز + LVID + PWT)3 -lvid3]
(الاحتجاز الوريدي: سمك الحاجز التدخلي الأذيني ؛ LVID: قطر البطين الأيسر الداخلي; Pwt: سمك الجدار الخلفي ، مع القياسات التي أجريت في نهاية انبساط)1،3،4،10،14.

يظهر الشكل 4 موضع المسبار علي الصدر لعرض النافذة القصيرة لعرض المحاور. يتيح هذا العرض تصور التدفق البطيني الأيمن ، والصمام الابهري ، والصمام الرئوي ، والشريان الرئوي (الشكل 5) ، وحجم تجويف البطين الأيسر (الشكل 6) والوظيفة (مع التصور ثنائي الابعاد للانقباض القطعي)1،3،4،10،11.

ويبين الشكل 7 موضع المسبار علي الصدر لعرض الآراء القمي. يمكن تقييم جميع ابعاد الغرفة الاربعه (المناطق المكونة من 4 غرف وحجم البطين الأيسر) والوظيفة في العرض الرباعي المستوي (الشكل 8). ويمكن أيضا تقييم الخصائص التشريحية والوظيفية للصمامات التاجية والثلاثية. وتم الحصول علي تدفق البطين الأيسر ، وانسياب الصمام الابهري ، والشريان الابهري التصاعدي مع العرض الذي يضم 5 غرف. ويركز العرض الثاني للغرفة (الشكل 9) علي الأذين الأيسر وحجم البطين ووظيفته. يسمح العرض الثلاثي الحجرات والغرف الخمسة بالصمام الابهري وتقييم تدفق البطين الأيسر. جميع الآراء مجتمعه للسماح لتقييم مختلف الجدران والأجزاء البطين الأيسر ودراسة مختلف المعلمات وظيفة الانقباضي والانبساطي1,3,4,10,11.

يمكن تقييم الوظيفة الانبساطية البطينية اليسرى من خلال تصوير دوبلر النبضي في الصمام التاجي (الشكل 10) ، ووقت الاسترخاء الحجمي للبطين الأيسر ، وتصوير دوبلر النسيجي في الحلقة التاجية1،3،12. يتكون التدفق التاجي الطبيعي من الانسياب المخروطي من الأذين الأيسر إلى البطين الأيسر. في الظروف العادية ، يكون التدفق المبكر مع الموجه الكترونيه اعلي من التدفق اللاحق الذي يحدث مع الانكماش الأذيني (A-الموجه).

ويمكن أيضا دراسة وظيفة البطين الأيسر الانبساطي مع التصوير دوبلر الانسجه ، الذي يحلل سرعات عضله القلب (الشكل 11). الانسجه الطيفية دوبلر دراسات التصوير الانقباضي والانبساطي وظيفة علي دوره القلب ولها 3 قمم: واحد ذروه الانقباضي ايجابيه (s'-موجه) تمثل انقباض عضله القلب واثنين من الذروات الانبساطية السلبية (e'-موجه من الاسترخاء عضله القلب الانبساطي في وقت مبكر و a'-موجه من الانكماش الأذيني النشط في أواخر انبساط) تقييمها علي مستوي التاجي، منالحاجز أو الجانبي الحلقة1،3،4،10،

توصيف وظيفة البطين الأيسر الانبساطي بواسطة التصوير دوبلر النبضي في الصمام التاجي والتصوير دوبلر الانسجه في الحلقة التاجية يجب ان تشمل المعلمات التالية: سرعه الموجه الكترونيه ، سرعه الموجه ، e/a نسبه ، e ' السرعة ، a ' السرعة ، e/e ' نسبه وتباطؤ الوقت منالموجات الكترونيه

يمكن دراسة وظيفة الانقباضي البطيني الأيسر عن طريق قياس الضغط الانقباضي للطائرة التاجية ، وتقصير الكسور (الشكل 3) ، وكسر الطرد ، وحجم السكتة الدماغية ، والإخراج القلبي ، وسرعه الموجه الانقباضية (الشكل 11)والسلالة الطولية العالمية بتشوه عضله القلب مع تحليل السلالة والسلالة

يتم احتساب الكسر الطرد مع وحدات التخزين بواسطة أسلوب سيمبسون المعدلة استنادا إلى التعقب البصرية من واجهه الدم والانسجه باستخدام وجات النظر قمي 4 و 2-الغرفة. عند مستوي الصمام القاعدي أو التاجي ، يتم إغلاق الكفاف من خلال توصيل القسمين المعاكسين من الحلقة التاجية بخط مستقيم1،3،4،10. يمثل حجم الدم الذي يشكل الكسر الطرد حجم الحد. إذا كان الصمام التاجي المختصة ، ثم وهذا يمكن ان تتضاعف بمعدل ضربات القلب لحساب الناتج القلب1،3،4. ويستند حجم السكتة الدماغية علي قياسات تدفق الدم من خلال المسالك منفذ البطين الأيسر خلال دوره القلب ، وذلك باستخدام هذه الصيغة:
SV = π x (قطر LVOT/2)2 × Vti (lvot)
(LVOT: البطين الأيسر تدفق المسالك; يتم قياس قطر LVOT في عرض المحور الطويل. [فت]([لفوت]): سرعه وقت تكامل يتتبع من نابض موجه دوبلر في [لفوت] في [ابيكال] 5 غرفه منظره)1,3.

المقياس الأكثر شيوعا القائم علي سلاله من LV العالمية وظيفة الانقباضي هو سلاله طوليه العالمية التي تم الحصول عليها من قبل تشوه عضله القلب مع سلاله وسلاله تحليل معدل1,3,4,10. وعاده ما يتم تقييمها من قبل speckle تتبع ، حيث ذروه السلالة الطولية العالمية يصف التغير النسبي في طول عضله الام LV بين نهاية انبساط ونهاية systole:
GLS (٪) = (MLs − MLd)/mld
(MLs: طول عضله القلب في نهاية-systole; MLd: طول عضله القلب في نهاية انبساط).

يجب ان تبدا القياسات بالعرض الثلاثي الابعاد لتصور إغلاق الصمام الابهري ، وذلك باستخدام نقرات فتح وإغلاق الصمام الابهري في تصوير دوبلر الطيفي أو فتح الصمام الابهري وإغلاقه علي التصوير من النمط M1و3و4و10. كما يتم تقييم وجات النظر apical 4 و 2 الغرفة ، ويتم احتساب متوسط جميع القياسات الثلاثة. يتم تقييم وظيفة الانقباضي البطيني الأيمن من خلال الطائرة ثلاثية القناات الانقباضية (TAPSE) والتصوير دوبلر الانسجه في الابطال ثلاثي الزوايا. وتدرس جميع الصمامات بالتصوير دوبلر اللون ، مما يسمح التصور المباشر لتضيق أو قلس (الشكل 13). إذا كان قلس الصمام الابهري موجودا ، فانه يمكن دراسته وتحديده كميا من قبل انكماش الوريد الأجوف ووقت الضغط النصفي مع تصوير دوبلر المستمر (الشكل 14)15. يظهر الشكل 15 الشريان الابهر التصاعدي وقوس الابهر والشريان الابهر التنازلي القريب الذي يتم تصوره في النافذة فوق الفوقية.

Figure 1
الشكل 1: التحقيق في تحديد المواقع لعرض المحور الطويل. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 2
الشكل 2: عرض المحور الطويل ثنائي الابعاد للاتريوم الأيسر (LA) والبطين الأيسر (LV) والصمام الابهري والشريان الابهر التصاعدي (Ao) والصمام التاجي (MV). يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 3
الشكل 3: M-وضع البطين الأيسر مع القياسات ، بما في ذلك سمك الحاجز التدخلي في الانبساط (ivsd) ، القطر الداخلي للبطين الأيسر في انبساط (lvidd) و انقباض (lيدس) ، سمك الجدار الخلفي (lvidd) ، وتقصير كسور (٪ FS) ، وكسر الطرد محسوبة مع أسلوب teichholz [EF (teich)] ، كتله البطين الأيسر (lvdmass) ، سمك الجدارية (الثوري الشعبي) وكتله البطين الأيسر مع حساب تتكيف مع القوارض (lvm الماوس). يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 4
الشكل 4: التحقيق في تحديد المواقع لعرض المحور القصير. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 5
الشكل 5: عرض المحور القصير ثنائي الابعاد في الصمام الابهري (Ao) ، والأذين الأيسر (LA) ، والأذين الأيمن (RA) ، والبطين الأيمن (RV) ، والشريان الرئوي (PA). يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 6
الشكل 6: عرض المحور القصير في البطين الأيسر علي مستوي العضلات الحليمة. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 7
الشكل 7: تحديد المواقع لعرض قمي 4-غرفه. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 8
الشكل 8:2D من 4-غرفه العرض بما في ذلك الأذين الأيسر (LA) ، البطين الأيسر (LV) ، الأذين الأيمن (RA) والبطين الأيمن (RV). يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 9
الشكل 9: صدي ثنائي الابعاد لعرض الغرفة الثانية بما في ذلك الأذين الأيسر (LA) والبطين (LV) والصمام التاجي (MV). يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 10
الشكل 10: الموجه النبضي في الصمام التاجي ، التي تظهر سرعه الموجه الكترونيه = 0.49 م/ث ، سرعه الموجه الموجية = 0.33 م/ث ، وقت تباطؤ الموجه الكترونيه = 35 مللي ثانيه ونسبه e/A = 1.48. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 11
الشكل 11: نسيج دوبلر الطيفي عند الحلقة التاجية الحاجزة ، التي تظهر موجات انسجه عضله القلب من انبساط (e ' و a ') ومن انقباض (s '). يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 12
الشكل 12: تحليل تشوه عضله القلب مع سلاله طوليه تقييمها في 4-غرفه العرض. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 13
الشكل 13: التصور من قلس الابهر مع اللون دوبلر. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 14
الشكل 14: دوبلر المستمر للصمام الابهري في عرض الغرفة الخامسة ، الذي يظهر قلس فوق خط الأساس مع وقت نصف الضغط يقاس من 95 مللي ثانيه. الرجاء النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 15
الشكل 15: الرؤية الفوقية للشريان الابهر التصاعدي (Asc) وقوس الابهر (القوس) والشريان الابهر التنازلي (Desc). يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Discussion

يسمح هذا البروتوكول دراسة تخطيط صدي كامله باستخدام معدات الموجات فوق الصوتية الطبية التقليدية ومسبار عالي التردد في الفئران الكبار. هذا هو جانب مهم من البروتوكول ، لان معدات الموجات فوق الصوتية مخصصه للحيوانات الصغيرة مكلفه والاستثمار ليست دائما مبرره.

كما تتطلب الدراسات التصويرية الطولية التخدير المتكرر ، واقترح مزيج من ميديميودين-ميدازولام-الفنتانيل في هذا البروتوكول لأنها أكثر ملاءمة للاستخدام التسلسلي بالمقارنة مع ايزوفلوراني أو خليط من الكيتامين-اكسيليازين ، في الفئران Wistar. ومع ذلك ، فان بروتوكول تخطيط صدي المقترح متوافق مع اي بروتوكول تخدير آخر16. كما هو موضح ، يتضمن بروتوكول تخطيط صدي لدينا تقييم العديد من المعلمات التي تمكن من تحديد التغيرات القلبية التشريحية والوظيفية.

التركيز علي توصيف التشريحية ، فمن الممكن لتقييم ابعاد جميع غرف القلب والتخفيفات الخاصة بهم ، تضخم البطين الأيسر ، التليف الليفي أو كالسيكاتشنز. فيما يتعلق بوظيفة القلب ، يمكن تحليل وظيفة الانقباضي البطيني الأيسر والانبساطي والوظيفة الانقباضية البطينية اليمني1،3،4. أيضا ، يتم دراسة تشريح صمام القلب ووظيفته ، وذلك باستخدام 2D-صدي لتوصيف التشريحية (تحديد التليف ، تكلس أو فتح غير طبيعي) واستخدام دوبلر التصوير لتوصيف وظيفية والكشف عن تضيق أو ارتجاع. التصوير دوبلر اللون يتيح الكشف عن اتجاه التدفق والاضطرابات وموجات دوبلر الطيفية تسمح قياسات السرعات والتدرجات1،3.

تم الحصول علي جوده الصورة المناسبة في جميع الفئران تقريبا (أصغر وزن من 200 غرام) ، علي الرغم من انه نظرا للاختلافات بين الافراد في علم التشريح ، لا يمكن الحصول علي وجات النظر تخطيط صدي مع التعريف نفسه بالبالضبط بين الفئران ، والتي قد يكون لها تاثير في قياسات البعد تجويف. وهناك 5% من المراقبين الداخليين الذي تم الإبلاغ عنه في قياسات البطين الأيسر17. وبصفه خاصه ، عند استخدام وضع M لقياسات البطين الأيسر ، قد توجد القيود التالية: صعوبات في الحصول علي زاوية متعامدة ؛ بما في ذلك الأجزاء القاعدية فقط (مما يؤدي إلى قياسات غير دقيقه في وجود تضخم غير متناظرة أو خلل الانقباضي الإقليمي) ؛ والافتراضات الهندسية (بالنظر إلى ان البطين الأيسر هو الاهليلجي المتاخر مع 2:1 المحور الطويل/القصير والتوزيع المتماثل لتضخم). كما ان ادراج قياسات مكعب قد يؤثر علي الدقة ، لأنه حتى خطا صغير في الابعاد قد يؤدي إلى المبالغة في تقدير الكتلة1،3،10. حتى عند استخدام وحدات التخزين وكسر الطرد المحسوب بواسطة أسلوب سيمبسون ، هناك عيوب: القمه غالبا ما تقصير ؛ التسرب الشغاف يمكن ان التحيز القياس واعمي لتشكيل تشوات لا يتصور في الاربعه والثانية 2-الغرفة وجات النظر1,3,10.

والاهم من ذلك ، يسلط هذا البروتوكول الضوء علي استخدام القياسات والتقييمات المتقدمة ، مثل سلاله البطين الأيسر ومعدل السلالة ، التي يتمتقييمها عن طريق تتبع البقع ، لتحقيق المزيد من المعلومات الكاملة حول سلوك ألياف عضلهالقلب 1 ،3. للحصول علي تقييم أكثر دقه لسلاله وسلاله ، والاستفادة المثلي من جوده الصورة ، والتعظيم من معدل الإطار ، والتقليل من تقصير ابيكس مطلوبه. يتم استخدام السلالة الطولية العالمية midwall لأنها توافق مع المزيد من البيانات المتاحة المنشورة وقد أظهرت في العديد من الدراسات السريرية لتكون قويه وقابله للتكرار10. اليكتروكارديوجرافيك الرصد المتكاملة في المعدات عرضه جدا للتحف ، وهو قيد. أيضا ، من المهم جدا القول بان حاله القلب الوظيفي أو الدموي للفئران يمكن ان تعتمد علي متغيرات مثل درجه الحرارة وضغط الدم ومعدل ضربات القلب4،5،6،7،8،9،13،14،17.

وبما ان القرار مرتبط بتردد المسبار ، فمن المتوقع ان تتطور التطورات المستقبلية لتحقيق ترددات اعلي التالي دقه اعلي وتعريف صوره في التصوير غير الغازي للقلب والاوعيه الدموية في الكائنات الصغيرة ، مع هذا النوع من المعدات. ويعتبر توحيد الأساليب والقياسات أمرا حاسما في هذا المجال من البحوث ، والتوصل إلى تشخيص تخطيط صدي أكثر دقه من نماذج الفئران التجريبية والتي تؤدي إلى فهم أفضل للاحياء الجزيئية للقلب والاوعيه الدموية البشرية الامراض.

Disclosures

وليس لدي المؤلفين ما يفصحون عنه.

Acknowledgments

ويدعم المعهد الوطني للمنح الدراسية و ATP الزمالات SFRH/BD/121684/2016 و SFRH/برميل/123181/2016 ، علي التوالي ، من Fundação para a Ciência e Tecnologia.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
12S-RS Probe GE Medical Systems H44901AB
Antisedan (5 mg/mL) Esteve P01B9003
EKG monitoring unit GE Medical Systems N/A
Electrodes FIAB F9089/100
Fentanilo (0.05 mg/mL) B.Braun BB3644960
Flumazenilo (0.1 mg/mL) Generis MUEH5933080
Insuline Syringe 1 mL SOL M 1612912
Lubrithal gel (10 mg) Dechra NC519
Medetor (1 mg/mL) Vibarc P01B0308
Midazolan (5 mg/mL) Labesfal MUEH5506191
Shaver Razor AESCULAP Isis GT608 Braun 90200714
Small Animal Heated Pad 120 V K&H Manufacturing inc. 655199010608
Ultrasound Gel Parker Laboratories REF 01-08
Ultrasound machine GE Medical Systems VIVID T8
Underpads Henry Schein 900-8132

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Armstrong, W. F., Ryan, T. Feigenbaum's Echocardiography. , 7th Edition, Lippincott Williams & Wilkins. (2010).
  2. Douglas, P. S., et al. ACCF/ASE/ACEP/ASNC/SCAI/SCCT/SCMR 2007 appropriateness criteria for transthoracic and transesophageal echocardiography: a report of the American College of Cardiology Foundation Quality Strategic Directions Committee Appropriateness Criteria Working Group, American Society of Echocardiography, American College of Emergency Physicians, American Society of Nuclear Cardiology, Society for Cardiovascular Angiography and Interventions, Society of Cardiovascular Computed Tomography, and the Society for Cardiovascular Magnetic Resonance endorsed by the American College of Chest Physicians and the Society of Critical Care Medicine. Journal of the American College of Cardiology. 50 (2), 187-204 (2007).
  3. Otto, M. C. Textbook of Clinical Echocardiography. , 6th Revised Edition, Elsevier - Health Sciences Division. (2018).
  4. Liu, J., Rigel, D. F. Echocardiographic examination in rats and mice. Cardiovascular Genomics. Methods in Molecular Biology (Methods and Protocols). 573, 139-155 (2009).
  5. Ram, R., Mickelsen, D. M., Theodoropoulos, C., Blaxall, B. C. New approaches in small animal echocardiography: imaging the sounds of silence. American Jounal of Physiology- Heart and Circulatory Physiology. 301 (5), H1765-H1780 (2011).
  6. Aronsen, J. M., et al. Noninvasive stratification of postinfarction rats based on the degree of cardiac dysfunction using magnetic resonance imaging and echocardiography. American Jounal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 312 (5), H932-H942 (2017).
  7. Forman, D. E., Cittadini, A., Azhar, G., Douglas, P. S., Wei, J. Y. Cardiac morphology and function in senescent rats: gender-related differences. Journal of the American College of Cardiology. 30 (7), 1872-1877 (1997).
  8. Walker, E. M. Jr, et al. Age-associated changes in hearts of male Fischer 344/Brown Norway F1 rats. Annals Of Clinical And Laboratory Science. 36 (4), 427-438 (2006).
  9. Watson, L. E., Sheth, M., Denyer, R. F., Dostal, D. E. Baseline echocardiographic values for adult male rats. Journal of the American Society of Echocardiography. 17 (2), 161-167 (2004).
  10. Lang, R. M., et al. Recommendations for cardiac chamber quantification by echocardiography in adults: an update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging. Journal of the American Society of Echocardiography. 28 (1), 1-39 (2015).
  11. Galderisi, M., et al. Standardization of adult transthoracic echocardiography reporting in agreement with recent chamber quantification, diastolic function, and heart valve disease recommendations: an expert consensus document of the European Association of Cardiovascular Imaging. European Heart Journal - Cardiovascular Imaging. 18 (12), 1301-1310 (2017).
  12. Nagueh, S. F., et al. Recommendations for the Evaluation of Left Ventricular Diastolic Function by Echocardiography: An Update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging. European Heart Journal - Cardiovascular Imaging. 29 (4), 277-314 (2016).
  13. Weytjens, C., et al. Doppler myocardial imaging in adult male rats: reference values and reproducibility of velocity and deformation parameters. European Journal of Echocardiography. 7 (6), 411-417 (2006).
  14. Scheer, P., et al. Basic values of M-mode echocardiographic parameters of the left ventricle in outbreed Wistar rats. Veterinarni Medicina. 57 (1), 42-52 (2012).
  15. Lancellotti, P., et al. Recommendations for the echocardiographic assessment of native valvular regurgitation: an executive summary from the European Association of Cardiovascular Imaging. European Heart Journal - Cardiovascular Imaging. 14 (7), 611-644 (2013).
  16. Albrecht, M., Henke, J., Tacke, S., Markert, M., Guth, B. Influence of repeated anaesthesia on physiological parameters in male Wistar rats: a telemetric study about isoflurane, ketamine-xylazine and a combination of medetomidine, midazolam and fentanyl. BMC Veterinary Research. 10, 310 (2014).
  17. Dragoi Galrinho, R., et al. New Echocardiographic Protocol for the Assessment of Experimental Myocardial Infarction in Rats. Maedica (Bucharest). 10 (2), 85-90 (2015).

Tags

الطب العدد 154 تخطيط صدي الفئران Wistar تشريح القلب وظيفة القلب صمامات قلبيه وظيفة الانبساطي وظيفة الانقباضي 2D-صدي دوبلر
تقييم تخطيط صدي لتشريح القلب ووظيفته في الفئران البالغة
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Ribeiro, S., Pereira, A. R. S.,More

Ribeiro, S., Pereira, A. R. S., Pinto, A. T., Rocha, F., Ministro, A., Fiuza, M., Pinto, F., Santos, S. C. R. Echocardiographic Assessment of Cardiac Anatomy and Function in Adult Rats. J. Vis. Exp. (154), e60404, doi:10.3791/60404 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter