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Medicine

Avaliação ecocardiográfica da anatomia e função cardíaca em ratos adultos

Published: December 13, 2019 doi: 10.3791/60404
* These authors contributed equally

Summary

Um protocolo não invasivo para a avaliação da ecocardiografia transtorácica da anatomia cardíaca e função para ratos adultos é apresentado no presente estudo. As válvulas cardíacas, todas as quatro câmaras cardíacas e a aorta ascendente, arco da aorta e aorta descendente são estudadas em detalhes.

Abstract

O uso de modelos animais experimentais tornou-se crucial na ciência cardiovascular. A maioria dos estudos usando modelos de roedores são focados em imagens bidimensionais para estudar a anatomia cardíaca do ventrículo esquerdo e eco do modo M para avaliar suas dimensões. No entanto, isso poderia limitar um estudo abrangente. Aqui, descrevemos um protocolo que permite uma avaliação do tamanho da câmara cardíaca, função ventricular esquerda (sistólica e diastólica) e função valvular. Uma máquina médica convencional do ultra-som foi usada neste protocolo e as vistas diferentes do eco foram obtidas através das janelas parasternal, apical e suprasternal esquerdas. Na janela parasternal esquerda, o eixo longo e curto foi adquirido para analisar dimensões da câmara esquerda, ventricle direito e dimensões pulmonares da artéria, e função mitral, pulmonar e da válvula aórtica. A janela apical permite a medição de dimensões da câmara cardíaca e a avaliação de parâmetros sistólicos e diastólicos. Ele também permite a avaliação do Doppler com detecção e quantificação de distúrbios da válvula cardíaca (regurgitação ou estenose). Diferentes segmentos e paredes do ventrículo esquerdo são visualizados em todas as vistas. Finalmente, a aorta ascendente, arco da aorta e aorta descendente podem ser imagemdas através da janela suprasternal. Uma combinação de imagens de ultra-som, fluxo doppler e avaliação do tecido Doppler foram obtidos para estudar morfologia cardíaca e função. Isso representa uma contribuição importante para melhorar a avaliação da função cardíaca em ratos adultos com impacto para a pesquisa usando esses modelos animais.

Introduction

A doença cardiovascular é a principal causa de morte na Europa, responsável por mais de 4 milhões de mortes anuais, apesar dos avanços na terapia, diagnóstico e monitoramento que melhoraram os resultados dos pacientes nos últimos anos. Uma rápida evolução tecnológica tem contribuído para o progresso no atendimento ao paciente cardiovascular. Dentro dessas ferramentas de diagnóstico, atenção especial tem sido dada à imagem biomédica, que permite uma avaliação anatômica e funcional de forma não invasiva1,2,3. Da mesma forma, a medicina se beneficia dos resultados da pesquisa biomédica. Modelos animais experimentais são muito úteis para testar hipóteses derivadas do ambiente clínico e desenvolver terapias inovadoras4,5.

Há um interesse crescente no uso da ecocardiografia como ferramenta de pesquisa em modelos animais experimentais, permitindo a aquisição de múltiplas medições de um único animal em estudos longitudinais. É importante notar que existem algumas vantagens no uso de modelos de urina ou roedores. O curto período de gestação, o baixo custo de reprodução e habitação, o conhecimento do seu genoma e a possibilidade de desenvolver animais transgênicos são as principais vantagens destas espécies, tornando-as atraentes para estudar os mecanismos envolvidos na doença cardiovascular4,5,6,7,8,9. Embora os modelos de ratos e camundongos mostrem vantagens semelhantes, os ratos são a escolha clássica em estudos cardiovasculares devido à sua maior dimensão física e menor frequência cardíaca que fornece melhores imagens nos estudos de ecocardiografia4,5,6,7,8,9,10.

Descrevemos um protocolo de ecocardiografia usando equipamentos de ultrassom médico convencionais para avaliar câmaras cardíacas e válvulas cardíacas (anatomia e função) usando ratos Wistar. Este é um protocolo conciso e completo para imagens e loops de aquisição de curto período de tempo que permitem medições off-line, que podem ser revisadas posteriormente para integrar novas variáveis ou medições ao longo do tempo.

Protocol

Todos os procedimentos para animais foram realizados de acordo com a Diretiva 2010/63/UE. Os procedimentos foram aprovados pelo Organismo institucional de Bem-Estar Animal, licenciado pela DGAV, a autoridade competente portuguesa para a protecção dos animais (número da licença 0421/000/000/2018).
NOTA: Feminino Wistar Han IGS (Crl:WI (Han) de Charles River Laboratories (12-16 semanas de idade) foram utilizados. Este protocolo é específico para ratos independentemente de sua tensão, idade ou sexo.

1. Preparando ratos para ecocardiografia: Anestésia e Protocolo de Reversão

  1. Pese ratos.
  2. Prepare um anestésico de três componentes composto por midazolam (4,76 mg/kg), medemidina (0,356 mg/kg) e fentanil (0,012 mg/kg), de acordo com o peso dos ratos.
  3. Injetar anestesia intraperitoneally. Verifique se há ausência de reflexos de retirada do pedal para avaliar a profundidade da anestesia.
  4. Raspe o cabelo da área do tronco.
  5. Aplique gel durável para ambos os olhos para evitar a secagem da esclera.
  6. Coloque o rato anestesiado em uma posição supina em cima de uma almofada de aquecimento, a fim de manter a temperatura corporal (37,0 °C ± 0,5 °C).
  7. Aplique uma camada de gel de ultra-som pré-aquecido (perto da temperatura corporal) no peito, principalmente na área sobrepondo o coração. Evite bolhas de ar no gel que podem interferir com imagens ultrassônicas.
  8. Anestesia reversa por injeção subcutânea utilizando atipamezol (0,94 mg/kg) e flumazenil (0,2532 mg/kg), imediatamente após o término da ecocardiografia.
    NOTA: Esta combinação anestésica fornece até 45 min para imagens de ecocardiografia. O protocolo ecocardiográfico descrito abaixo é compatível com qualquer outro protocolo de anestesia.

2. Ecocardiografia

NOTA: Os ecocardiogramas são realizados com um equipamento ecocardiográfico clínico convencional, com uma sonda cardíaca de 12 MHz, e incluem imagens estáticas adquiridas e loops em visões parasternais (eixo longo e eixo curto), apical (4, 5, 2 e 3 câmaras) e vistas suprasternal. Um eletrocardiograma é registrado para identificar end-systole e end-diastole, para procedimentos de medição e aquisição de loop (ECG acionado)11,12. Um preconjunto é usado para manter a definição de imagem estável entre ratos: frequência 5-10 MHz, profundidade 2,5 cm, taxa de quadros 125 fps, amostra do Doppler de 1,0 mm e cor que Doppler aliasing velocity 40 cm/s. Loops foram registrados com pelo menos 3 batimentos cardíacos.

  1. Visão do eixo parasternal esquerdo
    NOTA: Posicione a sonda no lado esquerdo do esterno e a marca de índice virou-se para o ombro direito.
    1. Gravar imagens do modo M na válvula aórtica, folhetos de válvulam mitral e deixou ventricular meados da cavidade (cursor em pontas de válvula mitral ou nível cordal)1,2,3,4. O cursor M-Mode deve ser perpendicular à estrutura dejuros 1,3,10.
    2. Grave um loop 2D de todas as visualizações.
    3. Grave um loop 2D com zoom no trato de saída ventricular esquerdo.
    4. Grave um loop 2D com imagens coloridas do Doppler simultaneamente nas válvulas aórticas e mitral.
  2. Visão de eixo curto parasternal esquerda
    NOTA: Coloque a sonda no lado esquerdo do esterno com a marca de índice girada para o ombro esquerdo.
    1. Obter uma imagem no nível da válvula aórtica, inclinando a sonda ligeiramente cranially.
    2. Grave um loop 2D de todas as visualizações.
    3. Registre um laço 2D com imagens coloridas de Doppler simultaneamente nas válvulas aórticas e pulmonares.
    4. Adquirir uma imagem espectral pulsado Doppler na artéria pulmonar. O cursor deve ser paralelo ao fluxo1,3.
    5. Obter uma imagem do ventrículo esquerdo no nível do músculo papilar, inclinando a sonda ligeiramente para baixo.
    6. Grave um loop 2D de todas as visualizações.
  3. Vista apical de 4 câmaras
    NOTA: Posicione a sonda na área apical na linha axillary anterior e com a marca de índice girada para o ombro esquerdo.
    1. Grave um loop 2D de todas as visualizações.
    2. Registre um loop de imagens 2D e tecido do doppler, incluindo todas as 4 câmaras.
    3. Concentre-se nas câmaras cardíacas esquerdas.
      1. Grave um loop 2D com zoom no átrio esquerdo.
      2. Grave um loop 2D com imagens coloridas do Doppler na válvula mitral e átrio esquerdo.
      3. Registre imagens simultâneas do modo M e cor do Doppler para o fluxo de propagação ventricular esquerdo.
      4. Obter uma onda pulsada espectral (PW) Doppler na válvula mitral para entrada ventricular esquerda. Coloque a amostra nas pontas do folheto mitral, em sua posição diastólica totalmente aberta1,2,3,11,12.
      5. Adicione uma onda contínua (CW) Imagem Doppler na válvula mitral, se houver regurgitação da válvula mitral.
      6. Obter uma imagem espectral pulsado tecido Doppler no annulus mitral (esquerda ventricular lateral e paredes septais). Alinhar o cursor PW Doppler com o eixo longo do coração, a fim de produzir o sinal máximo Doppler1,2,3,13.
      7. Record M-modo de anulação mitral para mitral medida de excursão sistólica do plano anular (cursor na parede do ventrículo esquerdo lateral).
    4. Concentre-se nas câmaras cardíacas direitas.
      1. Grave um loop 2D com zoom no átrio direito.
      2. Grave um loop 2D com imagens coloridas do Doppler na válvula tricuspid e no átrio direito.
      3. Obter uma imagem espectral pulsado tecido Doppler no annulus tricuspid (parede ventricular direita).
      4. Record M-mode for tricuspid annular plane systolic excursion (TAPSE) colocando o cursor 2D no tricuspid lateral annulus.
  4. Vista apical de 5 câmaras
    NOTA: A partir da vista de 4 câmaras, incline a sonda ligeiramente anterior ao peito.
    1. Grave um loop 2D de todas as visualizações.
    2. Grave um loop 2D com imagens coloridas do Doppler na válvula aórtica e no trato de saída ventricular esquerdo.
    3. Obter uma imagem espectral pulso doppler onda no trato de saída ventricular esquerda. Coloque o cursor paralelo ao fluxo e coloque a amostra no trato de saída ventricular esquerdo4,14.
    4. Obter uma imagem espectral pulsada onda Doppler no ventrículo esquerdo meados da cavidade para a entrada ventricular esquerda simultânea e ondas de saída.
    5. Obter uma imagem espectral onda contínua Doppler na válvula aórtica. O fluxo transvalvular é registrado abaixo da linha de base e da regurgitação, se presente, acima da linha de base.
  5. Vista apical de 2 câmaras
    NOTA: Retorne a uma visão de 4 câmaras e gire a sonda 90° no sentido anti-horário.
    1. Grave um loop 2D de todas as visualizações.
    2. Grave um loop 2D com imagens coloridas do Doppler na válvula mitral.
  6. Vista apical de 3 câmaras
    NOTA: Incline a sonda ligeiramente cranially.
    1. Grave um loop 2D de todas as visualizações.
    2. Grave um loop 2D com doppler de cor simultaneamente nas válvulas aórticas e mitral.
  7. Janela suprasternal
    NOTA No lado esquerdo do espaço supraclavicular com sonda direcionada para baixo
    1. Grave um loop 2D do arco da aorta.
    2. Obter a imagem espectral onda pulsada Doppler na aorta ascendente.
    3. Obter a imagem espectral onda pulsada Doppler na aorta descendente.

3. Medidas

  1. Proceda às medidas, incluindo a tensão longitudinal global. Realize essas medições offline para reduzir o tempo de anestesia.

Representative Results

A figura 1 mostra a posição da ponta de prova na caixa para indicar a vista longa da linha central da janela parasternal(figura 2). Esta visão permite medições precisas da cavidade do ventrículo esquerdo e espessura da parede, função sistólica (Figura 3),diâmetro esquerdo de saída de ventrículo (para aplicar em outras fórmulas, como na saída cardíaca), diâmetro de aorta ascendente e diâmetro do átrio esquerdo. Todas as dimensões da câmara foram indexadas ao peso corporal. A visão do eixo parasternal longo permite a avaliação anatômica (com 2D-Echo) e funcional (com imagem dodoppler de cor) das válvulas aórticas e mitral. Essa visão também permite a identificação e medição da efusão pericádica, se estiver presente. O modo M pode ser usado para medições de ventrículos esquerdos (Figura 3):dimensões de septo e paredes posteriores, dimensões de ventrículo esquerdo, função sistólica de ventrículo esquerdo e massa de ventrículo esquerdo1,3,4,10, 14.

A função sistólica do ventrículo esquerdo é avaliada pelo encurtamento fracionário e também visualizando a excursão e o espessamento das paredes durante o ciclo cardíaco (avaliado pelo ECG). A massa de ventrículo esquerdo é obtida pela fórmula:
LV massa = 0,8 x 1,04 x [(IVS + LVID + PWT)3 - LVID3]
(IVS: espessura do septo interventricular; LVID: deixou o ventricle diâmetro interno; PWT: espessura posterior da parede, com medidas feitas no final-diastole)1,3,4,10,14.

A figura 4 mostra a posição da ponta de prova na caixa para indicar a vista curta da linha central da janela parasternal. Essa visão permite a visualização da saída ventricular direita, da válvula aórtica, da válvula pulmonar, da artéria pulmonar(Figura 5)e do tamanho ventricular esquerdo da cavidade média (Figura 6)e função (com visualização 2D da contratividade segmental)1,3,4,10,11.

A figura 7 mostra a posição da ponta de prova na caixa para indicar as vistas apical. Na vista apical de 4 câmaras (Figura 8),todas as dimensões de 4 câmaras (áreas de todas as 4 câmaras e volume de ventrículo esquerdo) e função podem ser avaliadas. A caracterização anatômica e funcional das válvulas mitral e tricuspid também pode ser avaliada. A saída ventricular esquerda, o fluxo da válvula aórtica e a aorta ascendente foram obtidos com a vista apical da 5-câmara. A visão apical de 2 câmaras (Figura 9)concentra-se no átrio esquerdo e no tamanho e função ventricular. As vistas apical de 3 câmaras e de 5 câmaras permitem a válvula aórtica e a avaliação ventricular esquerda da saída. Todas as visualizações combinadas para permitir a avaliação das diferentes paredes e segmentos ventriculares esquerdos e o estudo de diferentes parâmetros de função sistólica e diastólica1,3,4,10,11.

A função diastólica ventricular esquerda pode ser avaliada por imagens de Doppler pulsadas na válvula mitral (Figura 10),tempo de relaxamento isoplâtrico do ventrículo esquerdo e imagens de tecido Doppler no mitral annulus1,3,12. A entrada mitral normal consiste no fluxo bifásico do átrio esquerdo para o ventrículo esquerdo. Em condições normais, o coincidente de fluxo precoce com e-onda é maior do que o fluxo posterior que ocorre com contração atrial (A-wave).

A função diastólica ventricular esquerda também pode ser estudada com imagens de Tecido Doppler, que analisa as velocidades miocárdias(Figura 11). Tecido espectral Doppler estudos de imagem sistólica e diastólica sobre um ciclo cardíaco e tem 3 picos: um pico sistólico positivo (s'-wave) representando a contração do miocárdio e dois picos diastólicos negativos (e'-onda de relaxamento do miocárdio diastólico precoce e a'-onda de contração atrial ativa no final da diastole) avaliado no nível anular mitral, avaliado no nível anular mitral, avaliado no nível anular mitral, avaliado no nível anular mitral, de septal ou anular lateral1,3,4,10,14.

Caracterização da função diastólica ventricular esquerda por imagens doppler pulsadas na válvula mitral e tecido doppler imagens no mitral annulus deve incluir os seguintes parâmetros: velocidade de e-onda, velocidade de aonda, Relação E/A, e' velocidade, a' velocidade, relação E/e' e tempo de desaceleração de E-wave1,3,4,10,14.

A função sistólica ventricular esquerda pode ser estudada pela medição de excursão sistólica do plano anular mitral, encurtamento fracionário (Figura 3),fração de ejeção, volume de acidente vascular cerebral, saída cardíaca, velocidade da onda do tecido sistólico (Figura 11)e tensão longitudinal global por deformação do miocárdio com análise de tensão e tensão (Figura 12)1,3,4,10.

A fração de ejeção é calculada com volumes por um método Simpson modificado baseado em traçados visuais da interface de sangue e tecido usando as vistas apical 4 e 2 câmaras. No nível da válvula basal ou mitral, o contorno é fechado conectando as duas seções opostas do anel mitral com uma linha reta1,3,4,10. O volume de sangue que forma a fração de ejeção representa o volume de acidente vascular cerebral. Se a válvula mitral é competente, então isso pode ser multiplicado pela freqüência cardíaca para calcular a saída cardíaca1,3,4. O volume do curso é baseado nas medidas da circulação sanguínea através do intervalo esquerdo da tomada do ventrículo durante o ciclo cardíaco, usando esta fórmula:
SV = π x (LVOT diâmetro /2)2 x VTI (LVOT)
(LVOT: deixou o trato de saída do ventrículo; O diâmetro do LVOT é medido na visão parasternal do eixo longo. VTI(LVOT): tempo de velocidade integral traçado a partir de onda pulsada Doppler em LVOT em vista apical 5 câmara)1,3.

A medida mais utilizada à base de cepa da função sistólica global lv é a cepa longitudinal global obtida pela deformação do miocárdio com análise de tensão e taxa de tensão1,3,4,10. Geralmente é avaliado por ecocardiografia de rastreamento de salpicos, onde o pico da cepa longitudinal global descreve a mudança de comprimento relativo do miocário LV entre o fim-diastole e end-systole:
GLS (%) = (MLs − MLd)/MLd
(MLs: comprimento do miocárdio no end-systole; MLd: comprimento do miocárdio no final-diastole).

As medições devem começar com a vista apical de 3 câmaras para visualizar o fechamento da válvula aórtica, usando cliques de abertura e fechamento da válvula aórtica em imagens espectrais do Doppler ou abertura da válvula aórtica e fechamento de imagens do modo M1,3,4,10. As vistas apical 4 e 2 câmaras também são avaliadas, e as medições de todas as três visualizações são calculadas em média. A função sistólica ventricular direita é avaliada pela excursão sistólica de plano anular tricuspid (TAPSE) e pela imagem do tecido Doppler no tricuspid annulus. Todas as válvulas são estudadas por cor doppler imagem, permitindo a visualização direta de estenose ou regurgitação (Figura 13). Se a regurgitação da válvula aórtica estiver presente, ela pode ser estudada e quantificada por vena contracta e tempo de meia pressão com imagens contínuas de Doppler (Figura 14)15. A Figura 15 mostra a aorta ascendente, o arco da aorta e a aorta descendente proximal visualizada na janela suprasternal.

Figure 1
Figura 1: Posicionamento da sonda para uma visão parasternal de eixo longo. Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 2
Figura 2: Visão parasternal de eixo longo 2D do átrio esquerdo (LA), ventrículo esquerdo (LV), válvula aórtica, aorta ascendente (Ao) e válvula mitral (MV). Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 3
Figura 3: M-Modo de ventrículo esquerdo com medidas, incluindo espessura do septo intervenicular em diastole (IVSd), deixou o diâmetro interno do ventrículo em diastole (LVIDd) e systole (LVIDs), espessura posterior da parede (LVIPWd), encurtamento fracionário (%FS), fração de ejeção calculada com método de Teichholz [EF (Teich)], massa de ventrículo esquerdo (LVdMass), espessura parietal (EPR) e massa de ventrículo esquerdo com cálculo adaptado ao roedor (Rato LVM). Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 4
Figura 4: Posicionamento da sonda para uma visão parasternal de eixo curto. Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 5
Figura 5: Visão de eixo curto parasternal 2D na válvula aórtica (Ao), átrio esquerdo (LA), átrio direito (AR), ventrículo direito (RV) e artéria pulmonar (PA). Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 6
Figura 6: Visão parasternal de eixo curto no nível dos músculos papilares do ventrículo esquerdo. Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 7
Figura 7: Posicionamento da sonda para a visão apical de 4 câmaras. Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 8
Figura 8: 2D de vista de 4 câmaras, incluindo átrio esquerdo (LA), ventrículo esquerdo (LV), átrio direito (RA) e ventrículo direito (RV). Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 9
Figura 9: 2D Eco da vista apical de 2 câmaras, incluindo átrio esquerdo (LA), ventrículo (LV) e válvula mitral (MV). Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 10
Figura 10: Doppler de onda pulsada na válvula mitral, mostrando a velocidade da E-onda = 0,49 m/s, velocidade de ondas A = 0,33 m/s, tempo de desaceleração da onda E = 35 ms e relação E/A = 1,48. Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 11
Figura 11: Tecido Espectral doppler no annulus septal do mitral, mostrando ondas do tecido do myocardial do diastole (e' e a') e do systole (s'). Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 12
Figura 12: Análise de deformação do miocárdio com tensão longitudinal avaliada na visão de 4 câmaras. Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 13
Figura 13: Visualização da regurgitação da aorta com Color Doppler. Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Figure 14
Figura 14: Doppler contínuo da válvula aórtica na vista apical da 5-câmara, mostrando o regurgitation acima da linha de base com o tempo da metade-pressão medido de 95 ms. Clique por favor aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 15
Figura 15: Vista suprasternal da aorta ascendente (Asc), arco da aorta (Arco) e aorta descendente (Desc). Clique aqui para ver uma versão maior deste número.

Discussion

Este protocolo permite um estudo echocardiográfico completo usando equipamentos de ultrassom médico convencionais e uma sonda de alta frequência em ratos adultos. Este é um aspecto importante do protocolo, uma vez que o equipamento de ultra-som dedicado a pequenos animais é caro e o investimento nem sempre é justificável.

Como estudos de imagem longitudinal exigem anestesia repetida, uma combinação de medetomidina-midazolam-fentanil foi proposta neste protocolo, uma vez que é mais adequado para uso em série quando comparado ao isoflurano ou uma mistura de cetamina-xilázina, em ratos Wistar. No entanto, o protocolo ecocardiográfico proposto é compatível com qualquer outro protocolo de anestesia16. Conforme descrito, nosso protocolo de ecocardiografia inclui a avaliação de vários parâmetros que permitem a identificação de alterações cardíacas anatômicas e funcionais.

Concentrando-se na caracterização anatômica, é possível avaliar as dimensões de todas as câmaras cardíacas e suas dilatações, hipertrofia ventrículo esquerda, fibrose valvular ou calcificações. Em relação à função cardíaca, a função sistólica e diastólica ventricular esquerda e a função sistólica ventricular direita podem ser analisadas1,3,4. Além disso, a anatomia e a função da válvula cardíaca são estudadas, utilizando eco 2D para caracterização anatômica (identificação de fibrose, calcificação ou abertura anormal) e usando imagens do Doppler para caracterização funcional e detecção de estenose ou regurgitação. A imagem colorida do doppler permite a deteção do sentido do fluxo e as turbulências e as ondas espectral de Doppler permitem medidas das velocidades e dos gradientes1,3.

A qualidade adequada da imagem foi obtida em quase todos os ratos (menor peso de 200 g), embora devido a diferenças interindividuais na anatomia, visões ecocardiográficas podem não ser obtidas com exatamente a mesma definição entre ratos, o que pode ter impacto nas medições da dimensão da cavidade. Há 5% intra-observador relatou variabilidade nas medições esquerda do modo M ventrículo17. Particularmente, ao usar o Modo M para medições ventriculares esquerdas, as seguintes limitações podem existir: dificuldades em obter um ângulo perpendicular; incluindo apenas segmentos basais (resultando em medições imprecisas na presença de hipertrofia assimétrica ou disfunção sistólica regional); e suposições geométricas (considerando que o ventrículo esquerdo é um elipsóide prolate com uma relação de eixo 2:1 longo/curto e distribuição simétrica de hipertrofia). Além disso, a inclusão de medições em cubos pode afetar a precisão, uma vez que mesmo um pequeno erro nas dimensões pode levar a massa superestimada1,3,10. Mesmo ao usar volumes e a fração de ejeção calculada pelo método de Simpson, há desvantagens: o ápice é frequentemente encurtado; o abandono do endôrdio pode influenciar a medida e é cego para moldar distorções não visualizadas nas vistas apical 4 e 2câmaras 1,3,10.

É importante ressaltar que esse protocolo destaca o uso de medições e avaliações avançadas, como a cepa do ventrículo esquerdo e a taxa de tensão, avaliada pelo rastreamento de salpicos, para obter informações mais completas sobre o comportamento das fibras miocárdias1,3. Para uma avaliação de taxa de tensão e tensão mais precisa, a otimização da qualidade da imagem, maximizações da taxa de quadros e minimização do encurtamento de ápice são necessárias. Midwall estirpe longitudinal global é usado, pois concorda com os dados mais publicados disponíveis e tem sido mostrado em vários estudos clínicos para ser robusto e reproduzível10. A monitorização eletrocardiográfica integrada no equipamento é muito propensa a artefatos, o que é uma restrição. Além disso, é muito importante afirmar que o estado cardíaco funcional ou hemodinâmico do rato pode depender de variáveis como temperatura, pressão arterial e frequência cardíaca4,5,6,7,9,13,14,17.

Uma vez que a resolução está relacionada com a frequência da sonda, espera-se que os desenvolvimentos futuros desenvolvam sondas de maior frequência e, consequentemente, maior definição de resolução e imagem em imagens cardiovasculares não invasivas em pequenos animais, com este tipo de Equipamento. A padronização de métodos e medições é considerada crítica neste campo de pesquisa, atingindo um diagnóstico ecocardiográfico mais preciso de modelos experimentais de ratos e resultando em uma melhor compreensão da biologia molecular do cardiovascular humano Doenças.

Disclosures

Os autores não têm nada a divulgar.

Acknowledgments

A ARSP e a ATP são apoiadas pelas bolsas SFRH/BD/121684/2016 e SFRH/BPD/123181/2016, respectivamente, da Fundação para a Ciência e Tecnologia.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
12S-RS Probe GE Medical Systems H44901AB
Antisedan (5 mg/mL) Esteve P01B9003
EKG monitoring unit GE Medical Systems N/A
Electrodes FIAB F9089/100
Fentanilo (0.05 mg/mL) B.Braun BB3644960
Flumazenilo (0.1 mg/mL) Generis MUEH5933080
Insuline Syringe 1 mL SOL M 1612912
Lubrithal gel (10 mg) Dechra NC519
Medetor (1 mg/mL) Vibarc P01B0308
Midazolan (5 mg/mL) Labesfal MUEH5506191
Shaver Razor AESCULAP Isis GT608 Braun 90200714
Small Animal Heated Pad 120 V K&H Manufacturing inc. 655199010608
Ultrasound Gel Parker Laboratories REF 01-08
Ultrasound machine GE Medical Systems VIVID T8
Underpads Henry Schein 900-8132

DOWNLOAD MATERIALS LIST

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Avaliação ecocardiográfica da anatomia e função cardíaca em ratos adultos
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Ribeiro, S., Pereira, A. R. S., Pinto, A. T., Rocha, F., Ministro, A., Fiuza, M., Pinto, F., Santos, S. C. R. Echocardiographic Assessment of Cardiac Anatomy and Function in Adult Rats. J. Vis. Exp. (154), e60404, doi:10.3791/60404 (2019).

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