Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Ekokardiografisk bedömning av hjärtats anatomi och funktion hos vuxna råttor

Published: December 13, 2019 doi: 10.3791/60404
* These authors contributed equally

Summary

En icke-invasiv protokoll för transtorakal ekokardiografi bedömning av hjärtats anatomi och funktion för vuxna råttor presenteras i den aktuella studien. Hjärtklaffarna, alla fyra hjärt kammare och aorta ascendens, aortabågen och fallande aorta studeras i detalj.

Abstract

Användningen av experimentella djurmodeller har blivit avgörande i kardiovaskulär vetenskap. De flesta studier som använder gnagare modeller är inriktade på tvådimensionell avbildning för att studera hjärtats anatomi av vänster kammare och M-läge ECHO att bedöma dess dimensioner. Detta kan dock begränsa en omfattande studie. Häri beskriver vi ett protokoll som möjliggör en bedömning av hjärtats kammar storlek, vänsterkammarfunktion (systoliskt och diastolisk) och valvulär funktion. En konventionell medicinsk ultraljud maskin användes i detta protokoll och olika eko åsikter erhölls genom vänster parasternal, apikala och suprasternal fönster. I vänster parasternal fönstret, den långa och korta axeln förvärvades för att analysera vänster kammare dimensioner, höger kammare och Pulmonell artär dimensioner, och mitral, pulmonell och aortaklaffen funktion. Det apikala fönstret tillåter mätning av hjärtats kammar dimensioner och utvärdering av systoliska och diastoliska parametrar. Det möjliggör också Dopplerbedömning med detektion och kvantifiering av hjärt klaffs störningar (uppstötningar eller stenos). De olika segmenten och väggarna i vänsterventrikeln visualiseras i alla vyer. Slutligen, aorta ascendens, aorta Arch, och fallande aorta kan avbildas genom suprasternal fönstret. En kombination av ultraljud avbildning, Doppler flöde och vävnads Doppler bedömning har erhållits för att studera kardiell morfologi och funktion. Detta är ett viktigt bidrag för att förbättra bedömningen av hjärtfunktionen hos vuxna råttor med effekt för forskning med hjälp av dessa djurmodeller.

Introduction

Hjärt-kärlsjukdom är den vanligaste dödsorsaken i Europa, ansvarig för över 4 000 000 årligen dödsfall, trots framsteg i terapi, diagnos och övervakning som har förbättrat patientens utfall under de senaste åren. En snabb teknisk utveckling har bidragit till framsteg inom kardiovaskulär patientvård. Inom dessa diagnostiska verktyg har särskild uppmärksamhet ägnas biomedicinsk avbildning, vilket möjliggör en anatomisk och funktionell utvärdering på ett icke-invasivt sätt1,2,3. På samma sätt gynnas medicinen av resultaten av biomedicinsk forskning. Experimentella djurmodeller är mycket användbara för att testa hypoteser som härrör från den kliniska miljön och att utveckla innovativa terapier4,5.

Det finns ett ökat intresse för användning av ekokardiografi som ett forskningsverktyg i experimentella djurmodeller, vilket gör det möjligt att förvärva flera mätningar från ett enda djur i longitudinella studier. Det är viktigt att notera att det finns vissa fördelar med att använda murina eller gnagare modeller. Den korta gestationsperioden, låga kostnader för avel och bostäder, kunskapen om deras arvsmassa och möjligheten att utveckla transgena djur är de främsta fördelarna med dessa arter, vilket gör dem attraktiva för att studera de mekanismer som är involverade i kardiovaskulär sjukdom4,5,6,7,8,9. Även råtta och musmodeller visar liknande fördelar, råttor är det klassiska valet i kardiovaskulära studier på grund av deras större fysiska dimension och lägre hjärtfrekvens som ger bättre bilder i ekokardiografi studier4,5,6,7,8,9,10.

Vi beskriver ett ekokardiografi protokoll med konventionell medicinsk ultraljudsutrustning för att utvärdera hjärt kammare och hjärtklaffar (anatomi och funktion) med hjälp av Wistar råttor. Detta är ett kortfattat och komplett protokoll för kort tid förvärv bilder och loopar som tillåter offline mätningar, som senare kan revideras för att integrera nya variabler eller mätningar över tid.

Protocol

Alla djurförsök utfördes i enlighet med direktiv 2010/63/EU. Förfarandena godkändes av det institutionella djurskyddsorganet, licensierat av DGAV, den behöriga portugisiska myndigheten för djurskydd (licensnummer 0421/000/000/2018).
Obs: kvinnliga Wistar han IGS (CRL: WI (han) från Charles River Laboratories (12-16 veckor gammal) användes. Detta protokoll är specifikt för råttor oberoende av deras stam, ålder eller kön.

1. beredning råttor för ekokardiografi: anestesi och reversion Protocol

  1. Väga råttor.
  2. Förbered en tre-komponent bedövningsmedel sammansatt av midazolam (4,76 mg/kg), Medetomidin (0,356 mg/kg) och fentanyl (0,012 mg/kg), enligt råtta vikt.
  3. Injicera anestesi intraperitonealt. Kontrollera om avsaknaden av pedal tillbakadragande reflexer för att utvärdera djupet av anestesi.
  4. Raka håret från bålen området.
  5. Applicera slitstark gel till båda ögonen för att förhindra torkning av sklera.
  6. Placera den sövda råttan i liggande ställning ovanpå en värmedyna för att bibehålla kroppstemperaturen (37,0 ° c ± 0,5 ° c).
  7. Applicera ett skikt av förvärmd (nära kroppstemperatur) ultraljud gel till bröstet, främst i området överliggande hjärtat. Undvik luftbubblor i gelen som kan störa ultraljud Imaging.
  8. Omvänd anestesi genom subkutan injektion med atipamezol (0,94 mg/kg) och Flumazenil (0,2532 mg/kg), omedelbart efter slutet av ekokardiografi.
    Anmärkning: denna anestesi kombination ger upp till 45 min för ekokardiografi Imaging. Det ekokardiografiska protokoll som beskrivs nedan är kompatibelt med alla andra anestesi protokoll.

2. ekokardiografi

Anmärkning: ekokardiogram utförs med en konventionell klinisk ekokardiografisk utrustning, med en 12 MHz hjärt sond, och inkluderar förvärvade stillbilder och loopar i parasternal (lång axel och korta axel visningar), apikala (4, 5, 2 och 3 kammare) och suprasternal åsikter. Ett elektrokardiogram registreras för att identifiera slut-systole och end-diastole, för mätmetoder och loop förvärv (EKG utlöst)11,12. En förinställd används för att hålla bild definitionen stabil mellan råttor: frekvens 5-10 MHz, djup 2,5 cm, bildhastighet 125 fps, Doppler prov 1,0 mm och färg Doppler kantutjämning Velocity 40 cm/s. loopar spelades in med minst 3 hjärtslag.

  1. Vänster parasternal lång axelvy
    Anmärkning: placera sonden på vänster sida av bröstbenet och index markeringen vriden till höger axel.
    1. Spela in M-läge bilder på aortaklaffen, mitralklaffen broschyrer och vänster kammare mitten av kaviteten (markören på mitralisklaffen ventil tips eller CORDAL nivå)1,2,3,4. M-läge markören bör vara vinkelrätt mot strukturen av intresse1,3,10.
    2. Spela in en 2D-slinga av alla vyer.
    3. Spela in en 2D-slinga med zoom vid vänsterkammarutflödes kanalen.
    4. Spela in en 2D-slinga med färgdoppleravbildning samtidigt vid aorta-och mitralklaffen.
  2. Vänster parasternal kort-axelvy
    Anmärkning: placera sonden på vänster sida av bröstbenet med index markeringen roterad till vänster axel.
    1. Få en bild på aortaklaffen nivå genom att luta sonden något kraniellt.
    2. Spela in en 2D-slinga av alla vyer.
    3. Spela in en 2D-slinga med färgdoppleravbildning samtidigt vid aorta-och lung ventilerna.
    4. Få en spektralpulsad Dopplerbild vid lungartären. Markören ska vara parallell med Flow1,3.
    5. Få en bild av den vänstra ventrikeln på papillär muskel nivå genom att luta sonden något nedåt.
    6. Spela in en 2D-slinga av alla vyer.
  3. Apikal 4-kammarvy
    Anmärkning: placera sonden i det apikala området i den främre axillärlinjen och med index markeringen vänd mot vänster axel.
    1. Spela in en 2D-slinga av alla vyer.
    2. Spela in en slinga av 2D-och vävnads Doppleravbildning inklusive alla 4 kammare.
    3. Fokus på vänster hjärt kammare.
      1. Spela in en 2D-slinga med zoom i det vänstra förmaket.
      2. Spela in en 2D-slinga med färgdoppleravbildning vid mitralklaffen och vänster förmak.
      3. Spela in samtidiga M-läge och färgdopplerbilder för föröknings flödet i vänster kammare.
      4. Få en spektralpulsad våg (PW) Doppler vid mitralklaffen för vänsterkammarinflöde. Placera provet på mitralbroschyren tips, i deras helt öppna diastoliskt läge1,2,3,11,12.
      5. Lägg till en kontinuerlig våg (CW) Doppler bild på mitralklaffen, om det finns mitralklaffen uppstötningar.
      6. Få en spektral pulsad vävnad Doppler bild på mitralisklaffen annulus (vänsterkammarlaterala och septal väggar). Justera PW Doppler markören med den långa axeln av hjärtat för att producera den maximala Doppler signalen1,2,3,13.
      7. Record M-läge mitralisklaffen annulus för mitralisklaffen ringformig plan systoliskt utflykt mätning (markören på laterala vänstra ventrikeln vägg).
    4. Fokusera på rätt hjärt kammare.
      1. Spela in en 2D-slinga med zoom i höger förmak.
      2. Spela in en 2D-slinga med färgdoppleravbildning vid trikuspiloventilen och höger förmak.
      3. Få en spektralpulsad vävnads Dopplerbild på tricuspid annulus (höger kammar vägg).
      4. Record M-läge för tricuspid ringformig plan systolisk utflykt (TAPSE) genom att placera 2D markören på tricuspid lateral annulus.
  4. Apikal 5-kammarvy
    Obs: från 4-kammarvy, luta sonden något Anterior till bröstet.
    1. Spela in en 2D-slinga av alla vyer.
    2. Spela in en 2D-slinga med färgdoppleravbildning vid aortaklaffen och vänsterkammarutflödes kanalen.
    3. Få en spektralpulsad vågdopplerbild vid vänsterkammarutflödes kanalen. Placera markören parallellt med flödet och placera provet i den vänstra ventrikulära utflödes kanalen4,14.
    4. Få en spektralpulsad vågdopplerbild i den vänstra ventrikeln i mitten av kaviteten för samtidiga inflöden av Vänsterkammar-och utflödes vågor.
    5. Få en spektral kontinuerlig våg Dopplerbild på aortaklaffen. Transvalvulärt flöde registreras under baseline och uppstötningar, om sådana finns, över baslinjen.
  5. Apikal 2-kammarvy
    Obs: återgå till en 4-kammarvy och vrid sonden 90 ° moturs.
    1. Spela in en 2D-slinga av alla vyer.
    2. Spela in en 2D-slinga med färgdoppleravbildning vid mitralklaffen.
  6. Apikal 3-kammarvy
    Anmärkning: luta sonden något kraniellt.
    1. Spela in en 2D-slinga av alla vyer.
    2. Spela in en 2D-slinga med färgdoppler samtidigt vid aorta-och mitralklaffarna.
  7. Suprasternal fönster
    Anmärkning på vänster sida av Stadium utrymme med sond riktad nedåt
    1. Spela in en 2D-slinga av aortabågen.
    2. Få spektralpulsad vågdopplerbild vid aorta ascendens.
    3. Få spektralpulsad vågdopplerbild vid fallande aorta.

3. mätningar

  1. Fortsätt till mätningar, inklusive globala longitudinella påfrestningar. Utför dessa mätningar offline för att minska anestesi tiden.

Representative Results

Figur 1 visar sonden position på bröstet för att visa den parasternal fönster lång axelvy (figur 2). Denna uppfattning möjliggör noggranna mätningar av vänster kammare hålighet och väggtjocklek, systolisk funktion (figur 3), vänstra ventrikeln utflöde diameter (att tillämpa i andra formler som i hjärt minut effekt), stigande aorta diameter och vänster Atrium diameter. Alla kammar dimensioner indexerades till kroppsvikt. Den parasternal lång axel uppfattning tillåter anatomiska (med 2D-ECHO) och funktionella (med färg Doppler Imaging) utvärdering av aorta-och mitralklaffar. Denna uppfattning gör det också möjligt att identifiera och mäta perikardiell utgjutning, om sådan finns. M-läge kan användas för vänster kammare mätningar (figur 3): septum och bakre väggar dimensioner, vänster kammare dimensioner, vänster kammare systolisk funktion och vänster kammare massa1,3,4,10,14.

Vänsterventrikeln systoliska funktion utvärderas av fraktionerad förkortning och även genom att visualisera utflykten och förtjockning av väggarna under hjärt cykeln (bedömas av EKG). Vänster ventrikelmassa erhålls genom formeln:
LV-massan = 0,8 x 1,04 x [(IVS + LVID + PWT)3 -lvid3]
(IVS: interventricular septum tjocklek; LVID: vänstra ventrikeln inre diameter; PWT: bakre väggtjocklek, med mätningar gjorda vid slutet diastole)1,3,4,10,14.

Figur 4 visar sonden position på bröstet för att visa den parasternal fönstret kort axelvy. Denna uppfattning tillåter visualisering av den högra ventrikulära utflöde, aortaklaffen, lungventilen, lungartären (figur 5), och vänster kammare mitten av hålighet storlek (figur 6) och funktion (med 2D visualisering av segmentell kontraktilitet)1,3,4,10,11.

Figur 7 visar sond positionen på bröstet för att visa de apikala vyerna. I den apikala 4-kammarvyn (figur 8) kan alla 4-kammardimensioner (områden av alla 4-kammare och volym av vänster kammare) och funktion bedömas. Den anatomiska och funktionella karakterisering av mitralisklaffen och tricuspid ventiler kan också utvärderas. Den vänstra ventrikulära utflöde, aortaklaffen flöde och stigande aorta erhölls med apikala 5-kammarvy. Den apikala 2-kammarvyn (figur 9) fokuserar på vänster förmak och ventrikulär storlek och funktion. Apikala 3-kammare och 5-kammare åsikter tillåta aortaklaffen och vänsterkammarutflödes utvärdering. Alla synpunkter kombineras för att möjliggöra bedömning av de olika vänsterkammarväggarna och segmenten och studiet av olika systoliska och diastoliska funktionsparametrar1,3,4,10,11.

Diastolisk vänsterkammarfunktion kan bedömas med pulsad doppleravbildning vid mitralklaffen (figur 10), isovolumetrisk avkopplingstid för vänster kammare och vävnads doppleravbildning vid mitralannulus1,3,12. Normalt mitralinflöde består av bifasiskt flöde från vänster förmak till vänster kammare. Under normala förhållanden, det tidiga flödet sammanfallande med E-Wave är högre än det senare flödet som sker med förmakskontraktion (A-Wave).

Diastolisk vänsterkammarfunktion kan också studeras med vävnads Doppleravbildning, som analyserar hjärtfrekvens hastigheter (figur 11). Spektralvävnad Doppler Imaging studier systoliska och diastoliska funktion över en hjärt cykel och har 3 toppar: en positiv systolisk topp (s'-Wave) representerar hjärtinfarkt sammandragning och två negativa diastoliska toppar (e '-våg av tidig diastolisk hjärtinfarkt avslappning och a '-våg av aktiva förmakskontraktion i sena diastole) bedömas på mitralisklaffen ringformig nivå, från septal eller lateral annulus1,3,4,10,14.

Karakterisering av vänster kammar diastolisk funktion genom pulsad doppleravbildning vid mitralklaffen och vävnads doppleravbildning vid mitralisklaffen annulus bör innehålla följande parametrar: e-Wave hastighet, A-våghastighet, e/A-förhållande, e-hastighet, en hastighet, e/e-förhållande och retardation tid för e-Wave1,3,4,10,14.

Vänsterkammarsystolisk funktion kan studeras av mitralisklaffen ringformig plan systoliskt utflykt mätning, fraktionerad förkortning (figur 3), ejektionsfraktion, slagvolym, hjärt minut effekt, systolisk vävnad s'-våghastighet (figur 11) och global längsgående stam av myokarddeformation med stam-och stamhastighets analys (figur 12)1,3,4,10

Ejektionsfraktion beräknas med volymer av en modifierad Simpson metod baserad på visuella tracings av blod och vävnad gränssnitt med hjälp av apikala 4 och 2-kammarvyer. Vid basal eller mitralisklaffen ventil nivå, är konturen stängd genom att ansluta två motsatta delar av mitralisklaffen ringen med en rak linje1,3,4,10. Den volym blod som bildar ejektionsfraktionen representerar slagvolymen. Om mitralklaffen är kompetent, då detta kan multipliceras med hjärtfrekvens för att beräkna hjärtminutvolym1,3,4. Slagvolym är baserad på mätningar av blodflödet genom vänster ventrikeln utlopp tarmkanalen under hjärt cykeln, med hjälp av denna formel:
SV = π x (LVOT diameter/2)2 x VTI (lvot)
(LVOT: vänstra ventrikeln utflöde tarmkanalen; LVOT-diametern mäts i den långa axelvyn. VTI(lvot): hastighet tid integral spåras från pulsad Wave Doppler vid lvot i apikala 5-kammarvy)1,3.

Den vanligaste stam-baserade måttet av LV global systolisk funktion är global longitudinell stam som erhållits genom myokarddeformation med stam och stam hastighet analys1,3,4,10. Det bedöms vanligen genom speckle-tracking ekokardiografi, där toppen av globala longitudinella stammen beskriver den relativa längden förändring av LV hjärtmuskeln mellan slutet-diastole och slutet Systole:
GLS (%) = (MLs − MLd)/MLd
(MLs: myokardlängd vid slutet Systole; MLd: myokardlängd vid änddiastole).

Mätningar bör inledas med den apikala 3-kammarvyn för att visualisera aortaklaffen stängning, med hjälp av öppning och stängning klick av aortaklaffen i spektrala Doppler Imaging eller aortaklaffen öppning och stängning på M-mode Imaging1,3,4,10. Apikala 4 och 2-kammarvyer utvärderas också, och alla tre vyer mätningar är i genomsnitt. Höger ventrikulär systolisk funktion utvärderas av tricuspid ringformig plan systolisk utflykt (TAPSE) och vävnads Doppler Imaging på tricuspid annulus. Alla ventiler studeras med färgdoppleravbildning, vilket möjliggör direkt visualisering av stenos eller uppstötningar (figur 13). Om uppstötningar av aortaklaffen förekommer kan det studeras och kvantifieras med Vena av och halv trycks tid med kontinuerlig doppleravbildning (figur 14)15. Figur 15 visar aorta ascendens, aortabågen och proximala fallande aorta visualiseras i suprasternal fönster.

Figure 1
Bild 1: sond positionering för parasternal lång axelvy. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 2
Figur 2:2D-parasternal lång-axelvy av vänster Atrium (La), vänster kammare (LV), aortaklaffen, stigande aorta (Ao) och mitralklaffen (MV). Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 3
Figur 3: vänster ventrikel M-läge med mätningar, inklusive interventrikulär septumtjocklek i diastole (IVSd), vänster kammare innerdiameter i diastole (LVIDd) och Systole (LVIDs), bakre väggtjocklek (LVIPWd), fraktionerad förkortning (% FS), ejektionsfraktion beräknad med Teichholz metod [EF (Teich)], vänster ventrikel massa (LVdMass), parietala tjocklek (EPR) och vänster ventrikel massa med beräkning anpassad till gnagare (LVM mus). Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 4
Bild 4: sond positionering för korta axelvy. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 5
Figur 5:2D-parasternal kort-axelvy vid aortaklaffen (Ao), vänster Atrium (La), höger förmak (RA), höger kammare (RV) och Pulmonell artär (PA). Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 6
Figur 6: kort-axelvy i vänster kammare papillär muskler nivå. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 7
Figur 7: sond positionering för apikal 4-kammarvy. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 8
Figur 8:2D av 4-kammarvy inklusive vänster Atrium (La), vänster kammare (LV), höger förmak (RA) och höger kammare (RV). Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 9
Figur 9:2D-eko av apikal 2-kammarvy inklusive vänster Atrium (La), ventrikel (LV) och mitralklaffen (MV). Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 10
Figur 10: pulsad Vågdoppler vid mitralklaffen, som visar E-våghastighet = 0,49 m/s, A-våghastighet = 0,33 m/s, e-Wave retardation tid = 35 MS och e/A Ratio = 1,48. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 11
Figur 11: Spektraldopplervävnad vid septal mitralisklaffen annulus, visar myokardvävnads vågor av diastole (e ' och a ') och av Systole (s). Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 12
Figur 12: hjärtinfarkt deformation analys med längsgående stammen utvärderas vid 4-kammarvy. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 13
Figur 13: visualisering av aorta uppstötningar med färgdoppler. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 14
Figur 14: kontinuerlig Doppler av aortaklaffen vid apikal 5-kammarvy, visar uppstötningar över baslinjen med halv-tryck tid mätt på 95 MS. vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 15
Figur 15: suprasternal syn på stigande aorta (ASC), aorta Arch (Arch) och fallande aorta (DESC). Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Discussion

Detta protokoll möjliggör en fullständig ekokardiografisk studie med konventionell medicinsk ultraljudsutrustning och en högfrekvent sond hos vuxna råttor. Detta är en viktig aspekt av protokollet, eftersom ultraljudsutrustning avsedd för små djur är dyr och investeringen är inte alltid försvarbar.

Eftersom longitudinell avbildning studier kräver upprepad anestesi, en kombination av Medetomidin-midazolam-fentanyl föreslogs i detta protokoll eftersom det är mer lämplig för seriell användning jämfört med isofluran eller en blandning av ketamin-xylazin, i Wistar råttor. Det föreslagna ekokardiografiska protokollet är dock kompatibelt med alla andra anestesi protokoll16. Som beskrivits omfattar vårt ekokardiografi protokoll utvärderingen av flera parametrar som möjliggör identifiering av anatomiska och funktionella hjärt förändringar.

Med fokus på den anatomiska karakteriseringen är det möjligt att utvärdera dimensionerna hos alla hjärtats kammare och deras dilatationer, vänsterventrikelhypertrofi, valvulär fibros eller förkalkningar. När det gäller hjärtfunktionen kan vänsterkammarens systoliska och diastoliska funktion och den systoliska funktionen för höger kammare analyseras1,3,4. Dessutom studeras hjärt klaffens anatomi och funktion, med hjälp av 2D-ekot för anatomisk karakterisering (identifiering av fibros, förkalkning eller onormal öppning) och användning av Doppleravbildning för funktionell karakterisering och detektion av stenos eller uppstötningar. Färgdoppleravbildning möjliggör detektering av flödesriktning och turbulenser och spektrala dopplervågor möjliggör mätningar av hastigheter och lutningar1,3.

Adekvat bildkvalitet erhölls i nästan alla råttor (minsta vikt på 200 g), men på grund av Inter-individuella skillnader i anatomi, ekokardiografiska vyer kan inte erhållas med exakt samma definition mellan råttor, som kan ha en inverkan i hålighet dimensions mätningar. Det finns 5% intra-observatör rapporterade variationer på vänster kammare M-läge mätningar17. Särskilt vid användning av M-läge för vänsterkammarmätningar kan följande begränsningar förekomma: svårigheter att få en vinkelrät vinkel; inklusive endast basal segment (resulterar i felaktiga mätningar i närvaro av asymmetrisk hypertrofi eller regional systolisk dysfunktion); och geometriska antaganden (med tanke på att den vänstra ventrikeln är en prolate ellipsoid med en 2:1 lång/kort axel förhållande och symmetrisk fördelning av hypertrofi). Också, införande av kubiska mätningar kan påverka noggrannheten, eftersom även ett litet fel i dimensioner kan leda till överskattade massan1,3,10. Även när man använder volymer och den ejektionsfraktion som beräknats med Simpsons metod, finns det nackdelar: Apex är ofta förförkortad; den endokardiella avhopp kan bias mätningen och är blind för att forma snedvridningar inte visualiseras i apikala 4 och 2-kammarvyer1,3,10.

Viktigt, detta protokoll belyser användningen av avancerade mätningar och utvärderingar, såsom vänster ventrikel stam och stam hastighet, bedömas genom speckle tracking, för att uppnå mer fullständig information om myokardfibrer beteende1,3. För en mer exakt stam och stam hastighet utvärdering, optimering av bildkvalitet, maximizations av bildhastighet, och minimering av Apex förförkortning krävs. Midwall globala längsgående stammen används som den instämmer med mer publicerade tillgängliga data och har visats i flera kliniska studier för att vara robust och reproducerbara10. Den elektrokardiografiska monitorization integreras i utrustningen är mycket benägna att artefakter, vilket är en begränsning. Det är också mycket viktigt att konstatera att den funktionella eller hemodynamiska hjärtstatus av råtta kan bero på variabler såsom temperatur, blodtryck och hjärtfrekvens4,5,6,7,8,9,13,14,17.

Eftersom resolutionen är relaterad till sond frekvensen förväntas den framtida utvecklingen utveckla högre frekvens sonder och därmed högre upplösning och bild definition vid icke-invasiv kardiovaskulär avbildning hos små djur, med denna typ av Utrustning. Standardisering av metoder och mätningar anses kritisk inom detta forskningsområde och når mer exakt ekokardiografisk diagnostik av experimentella råtta-modeller och resulterar i en bättre förståelse av molekylärbiologi av Human kardiovaskulär Sjukdomar.

Disclosures

Författarna har inget att avslöja.

Acknowledgments

Arsp och ATP stöds av stipendier sfrh/BD/121684/2016 och sfrh/BPD/123181/2016, respektive, från Fundação para a Ciência e Tecnologia.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
12S-RS Probe GE Medical Systems H44901AB
Antisedan (5 mg/mL) Esteve P01B9003
EKG monitoring unit GE Medical Systems N/A
Electrodes FIAB F9089/100
Fentanilo (0.05 mg/mL) B.Braun BB3644960
Flumazenilo (0.1 mg/mL) Generis MUEH5933080
Insuline Syringe 1 mL SOL M 1612912
Lubrithal gel (10 mg) Dechra NC519
Medetor (1 mg/mL) Vibarc P01B0308
Midazolan (5 mg/mL) Labesfal MUEH5506191
Shaver Razor AESCULAP Isis GT608 Braun 90200714
Small Animal Heated Pad 120 V K&H Manufacturing inc. 655199010608
Ultrasound Gel Parker Laboratories REF 01-08
Ultrasound machine GE Medical Systems VIVID T8
Underpads Henry Schein 900-8132

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Armstrong, W. F., Ryan, T. Feigenbaum's Echocardiography. , 7th Edition, Lippincott Williams & Wilkins. (2010).
  2. Douglas, P. S., et al. ACCF/ASE/ACEP/ASNC/SCAI/SCCT/SCMR 2007 appropriateness criteria for transthoracic and transesophageal echocardiography: a report of the American College of Cardiology Foundation Quality Strategic Directions Committee Appropriateness Criteria Working Group, American Society of Echocardiography, American College of Emergency Physicians, American Society of Nuclear Cardiology, Society for Cardiovascular Angiography and Interventions, Society of Cardiovascular Computed Tomography, and the Society for Cardiovascular Magnetic Resonance endorsed by the American College of Chest Physicians and the Society of Critical Care Medicine. Journal of the American College of Cardiology. 50 (2), 187-204 (2007).
  3. Otto, M. C. Textbook of Clinical Echocardiography. , 6th Revised Edition, Elsevier - Health Sciences Division. (2018).
  4. Liu, J., Rigel, D. F. Echocardiographic examination in rats and mice. Cardiovascular Genomics. Methods in Molecular Biology (Methods and Protocols). 573, 139-155 (2009).
  5. Ram, R., Mickelsen, D. M., Theodoropoulos, C., Blaxall, B. C. New approaches in small animal echocardiography: imaging the sounds of silence. American Jounal of Physiology- Heart and Circulatory Physiology. 301 (5), H1765-H1780 (2011).
  6. Aronsen, J. M., et al. Noninvasive stratification of postinfarction rats based on the degree of cardiac dysfunction using magnetic resonance imaging and echocardiography. American Jounal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 312 (5), H932-H942 (2017).
  7. Forman, D. E., Cittadini, A., Azhar, G., Douglas, P. S., Wei, J. Y. Cardiac morphology and function in senescent rats: gender-related differences. Journal of the American College of Cardiology. 30 (7), 1872-1877 (1997).
  8. Walker, E. M. Jr, et al. Age-associated changes in hearts of male Fischer 344/Brown Norway F1 rats. Annals Of Clinical And Laboratory Science. 36 (4), 427-438 (2006).
  9. Watson, L. E., Sheth, M., Denyer, R. F., Dostal, D. E. Baseline echocardiographic values for adult male rats. Journal of the American Society of Echocardiography. 17 (2), 161-167 (2004).
  10. Lang, R. M., et al. Recommendations for cardiac chamber quantification by echocardiography in adults: an update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging. Journal of the American Society of Echocardiography. 28 (1), 1-39 (2015).
  11. Galderisi, M., et al. Standardization of adult transthoracic echocardiography reporting in agreement with recent chamber quantification, diastolic function, and heart valve disease recommendations: an expert consensus document of the European Association of Cardiovascular Imaging. European Heart Journal - Cardiovascular Imaging. 18 (12), 1301-1310 (2017).
  12. Nagueh, S. F., et al. Recommendations for the Evaluation of Left Ventricular Diastolic Function by Echocardiography: An Update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging. European Heart Journal - Cardiovascular Imaging. 29 (4), 277-314 (2016).
  13. Weytjens, C., et al. Doppler myocardial imaging in adult male rats: reference values and reproducibility of velocity and deformation parameters. European Journal of Echocardiography. 7 (6), 411-417 (2006).
  14. Scheer, P., et al. Basic values of M-mode echocardiographic parameters of the left ventricle in outbreed Wistar rats. Veterinarni Medicina. 57 (1), 42-52 (2012).
  15. Lancellotti, P., et al. Recommendations for the echocardiographic assessment of native valvular regurgitation: an executive summary from the European Association of Cardiovascular Imaging. European Heart Journal - Cardiovascular Imaging. 14 (7), 611-644 (2013).
  16. Albrecht, M., Henke, J., Tacke, S., Markert, M., Guth, B. Influence of repeated anaesthesia on physiological parameters in male Wistar rats: a telemetric study about isoflurane, ketamine-xylazine and a combination of medetomidine, midazolam and fentanyl. BMC Veterinary Research. 10, 310 (2014).
  17. Dragoi Galrinho, R., et al. New Echocardiographic Protocol for the Assessment of Experimental Myocardial Infarction in Rats. Maedica (Bucharest). 10 (2), 85-90 (2015).

Tags

Medicin ekokardiografi Wistar råtta hjärtanatomi hjärtfunktion hjärtklaffar diastolisk funktion systolisk funktion 2D-eko Doppler
Ekokardiografisk bedömning av hjärtats anatomi och funktion hos vuxna råttor
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Ribeiro, S., Pereira, A. R. S.,More

Ribeiro, S., Pereira, A. R. S., Pinto, A. T., Rocha, F., Ministro, A., Fiuza, M., Pinto, F., Santos, S. C. R. Echocardiographic Assessment of Cardiac Anatomy and Function in Adult Rats. J. Vis. Exp. (154), e60404, doi:10.3791/60404 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter