Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

والسيليكون عكسها الناجمة عن النفط العين ارتفاع ضغط الدم النموذج في الفئران

Published: November 15, 2019 doi: 10.3791/60409

Summary

هنا ، ونحن نقدم بروتوكول للحث علي ارتفاع ضغط الدم العين والضمور العصبي الزرق في عيون الفار عن طريق حقن انتراكاميرال من زيت السيليكون والاجراء لأزاله زيت السيليكون من الغرفة الاماميه للعودة ضغط العين مرتفعه العاديه.

Abstract

ارتفاع ضغط العين (IOP) هو عامل خطر موثقه جيدا لزرق. هنا نحن وصف رواية ، طريقه فعاله للحث باستمرار مستقره IOP الارتفاع في الفئران التي تحاكي مضاعفات ما بعد الجراحة من استخدام زيت السيليكون (SO) كعامل تاموناد في جراحه شبكيه الإنسان. في هذا البروتوكول ، يتم حقن SO في الغرفة الاماميه للعين الماوس لمنع التلميذ والحيلولة دون تدفق الفكاهة المائية. الغرفة الخلفية تتراكم الفكاهة المائية وهذا بدوره يزيد من IOP من الجزء الخلفي. وتنتج حقنه واحده SO الارتفاع الموثوق بها ، وكافيه ، ومستقره IOP ، والتي تؤدي إلى الضمور العصبي جلوكوكاتوس كبيره. هذا النموذج هو تكرار حقيقي من الزرق الثانوي في عيادة العين. لمزيد من تقليد الاعداد السريرية ، SO يمكن ازالتها من الغرفة الاماميه لأعاده فتح مسار الصرف الصحي والسماح تدفق الفكاهة المائية ، والتي يتم تصريفها من خلال العمل المشصي (TM) في زاوية الغرفة الاماميه. لان IOP يعود بسرعة إلى طبيعتها ، ويمكن استخدام النموذج لاختبار تاثير خفض IOP علي الخلايا العقديه الشبكية جلوكوكاتوس. هذا الأسلوب هو واضح ، لا يتطلب معدات خاصه أو تكرار الإجراءات ، يحاكي عن كثب الحالات السريرية ، ويمكن ان تكون قابله للتطبيق علي الأنواع الحيوانية المتنوعة. ومع ذلك ، قد يلزم اجراء تعديلات طفيفه.

Introduction

الفقدان التدريجي للخلايا العقدة الشبكية (RGCs) والمحاور الخاصة بهم هو السمة المميزة للجلوكوما ، وهو مرض عصبي شائع في شبكيه العين1. وسوف تؤثر علي أكثر من 100,000,000 الافراد 40 − 80 سنه من قبل 20402. ولا يزال البرنامج هو عامل الخطر الوحيد القابل للتعديل في تطور الزرق وتطوره. من أجل استكشاف المرض ، والتقدم ، والعلاجات المحتملة من الجلوكوما ، ويمكن الاعتماد عليها ، واستنساخها ، ومحفز العين التجريبية ارتفاع ضغط الدم/الزرق النموذج الذي يتطابق مع السمات الرئيسية للمرضي البشر أمر حتمي.

يعتمد IOP علي تدفق الفكاهة المائية إلى الغرفة الاماميه من الجسم الهالهاري في الغرفة الخلفية والتدفق من خلال العمل المشصي (TM) في زاوية الغرفة الاماميه. عند الوصول إلى حاله مستقره ، يتم الحفاظ علي IOP. وعندما يتجاوز التدفق الوافد أو يقل عن التدفق الوافد ، يرتفع البرنامج أو ينخفض علي التوالي. من خلال خفض تدفق مائي اما عن طريق انسداد زاوية الغرفة الاماميه أو عن طريق اتلاف TM ، وقد أنشئت عده نماذج الجلوكوما3،4،5،6،7،8،9،10. وترتبط هذه النماذج عاده مع تلف انسجه العين لا رجعه فيه ، وارتفاع IOP في الغرفة الاماميه أيضا يسبب مضاعفات غير المرغوب فيها مثل وذمه القرنية والتهاب العين ، مما يجعل التصوير الشبكية والبصريات وظيفة الاختبارات صعبه لأداء وتفسير.

لتطوير نموذج يتغلب علي أوجه القصور هذه ، ركزنا علي الزرق الثانوي الجيد الموثق الناجم عن زيت السيليكون (لذلك) الذي يحدث كمضاعفات ما بعد العملية الجراحية لجراحه الشبكية البشرية11،12. لذلك يتم استخدامها كدك في العمليات الجراحية في الشبكية بسبب التوتر سطحه عاليه. ومع ذلك ، يمكن لذلك جسديا اوككلودي التلميذ لأنه أخف من السوائل المائية والزجاجية ، مما يمنع التدفق المائي إلى الغرفة الاماميه. تسبب العرقلة ارتفاع IOP في الغرفة الخلفية بسبب تراكم الفكاهة المائية. هذا دافع لنا لتطوير وتوصيف نموذج الماوس ارتفاع ضغط الدم العين الجديدة علي أساس الحقن انتراكاميرال SO وكتله حدقة13, مع السمات الرئيسية للجلوكوما الثانوية: كتله العفن فعاله, ارتفاع iop الكبيرة التي يمكن ان تعود إلى وضعها الطبيعي بعد أزاله SO, والضمور العصبي جلوكوكاتوس.

هنا نقدم بروتوكولا مفصلا لارتفاع ضغط الدم العين المستحثة في عينه الماوس ، بما في ذلك حقن وأزاله وقياس IOP.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

وقد تمت الموافقة علي جميع الإجراءات من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانية (IACUC) من جامعه ستانفورد.

1. العين ارتفاع ضغط الدم التعريفي عن طريق حقن انتراكاميرال من SO

  1. جهزي الماصة الزجاجية لانتراكاميرال بالحقن بواسطة سحب الشعرية الزجاجية مع ساحبه ماصه لتوليد الماصات المجهرية. اقطع فتحه عند طرف الماصة الصغيرة وقم بزيادة شحذ الطرف باستخدام اله المطحنة الصغيرة لجعل مجسم مشطوف الحواف 35 ° − 40 °.
  2. صقل حواف المجسم وأزاله جميع الأنقاض عن طريق الغسل بالماء. الاوتوكلاف ميكروماص قبل الاستخدام.
  3. اعداد ابره البزل لدخول القرنية. للقيام بذلك ، نعلق ابره 32 G إلى حقنه 5 مل علي قفل Luer ، وكذلك تامينه مع الشريط. ثني الابره طرف شطبه الوجه حتى في 30 درجه.
  4. اعداد حاقن SO عن طريق ربط وتامين نهاية حاده 18 ز ابره علي حقنه 10 مل أولا. ثم نعلق أنبوب من البلاستيك مع ابره 18 ز علي نهاية واحده وتملا مع ذلك حسب الحاجة من خلال الطرف الآخر.
  5. قم بتوصيل الماصة المجهرية المعقمة بالأنبوب البلاستيكي وادفع المكبس المحقنة لملء الماصة المجهرية بالبالكامل مع SO.

2. حقن انتراكاميرال SO للعين واحده

  1. وضع الماوس C57B6/J الذكور 9 − 10 أسبوعا في غرفه الحث مع 3 ٪ ايزوفلواني مختلطة مع الأكسجين في 2 لتر/دقيقه لمده 3 دقائق.
  2. حقن داخل الجسم 2, 2, 2-تريبروموثانول في 0.3 mg/g الوزن.
    ملاحظه: علي عكس الكيتامين/اكسيليازين ، 2 ، 2 ، 2-تريبروموثانول لا يسبب تمدد التلميذ واضحة.
  3. التحقق من عدم وجود استجابه لقرصه اصبع القدم وعدم وجود حركه من شعيرات أو الذيل لتحديد قوه التخدير.
  4. ضع الماوس في وضع أفقي علي منصة الجراحة. للحد من حساسيتها اثناء العملية ، تطبيق قطره واحده من 0.5 ٪ هيدروكلوريد بروباراغين إلى القرنية قبل الحقن.
  5. اجراء شق إدخال مع 32 G بارابزل الابره في الربع superotemporal ، حوالي 0.5 ملم من limbus.
  6. نفق من خلال طبقات من القرنية لحوالي 0.3 مم قبل ثقب في الغرفة الاماميه. يجب الحرص علي عدم لمس العدسة أو القزحية.
  7. سحب الابره ببطء للإفراج عن بعض الفكاهة المائية (حوالي 1 − 2 μL) من الغرفة الاماميه من خلال النفق (البزل).
  8. انتظر ~ 8 دقيقه لمزيد من خفض IOP. ويمكن تحديد هذا عن طريق قياس المعاكس ، ومراقبه العين.
  9. قم بإدخال الماصة الزجاجية المحملة مسبقا مع SO من خلال نفق القرنية إلى الغرفة الاماميه ، مع الشطب الذي يواجه سطح القزحية.
  10. دفع المكبس حقنه ببطء لحقن ذلك في الغرفة الاماميه حتى القطرات حتى يغطي معظم سطح القزحية ، ~ 2.3 − 2.4 ملم في القطر.
  11. اترك الماص المجهري في الغرفة الاماميه لمده 10 ليالي أكثر قبل سحبه ببطء.
  12. دفع بلطف الجفن العلوي لإغلاق شق القرنية للحد من تسرب ذلك.
  13. تطبيق مرهم المضادات الحيوية (باكيتراسين-نيوميسين-بوليميكسين) إلى سطح العين.
  14. في جميع انحاء الاجراء ، وكثيرا ما ترطيب القرنية مع الدموع الاصطناعية.
  15. الحفاظ علي الماوس علي وساده التدفئة حتى تعافي تماما من التخدير.

3. أزاله SO

  1. اعداد نظام الري.
    1. اعداد محلول الري وفقا لتعليمات الشركة المصنعة ووضعه في زجاجه الري. رفع زجاجه محلول الري إلى 110 − 120 سم (81 − 88 مم زئبق) فوق منصة الجراحة.
    2. قم بإرفاق الاداره الرابعة بزجاجه محلول الري. أزاله فقاعات الهواء من الأنابيب IV. ربط ابره 33 G عازمه علي الوجه 20 ° تصل إلى أنابيب IV.
  2. لاعداد نظام الصرف الصحي ، وأزاله المكبس من حقنه 1 مل. نعلق ابره 33 G إلى حقنه وثني الابره إلى 20 درجه.
  3. أزاله SO من الغرفة الاماميه.
    1. حقن داخل الصفاق 2, 2, 2-تريبروموثانول (0.3 mg/g وزن الجسم). التحقق من عدم وجود استجابه لقرصه اصبع القدم لتحديد قوه التخدير وعدم وجود حركه من شعيرات أو الذيل.
    2. ضع الماوس علي منصة الجراحة وأمنها في الوضع الجانبي مع الشريط. تطبيق قطره واحده من 0.5 ٪ هيدروكلوريد بروباراغين إلى القرنية للحد من حساسيتها.
    3. جعل اثنين من الشقوق في الربع الزمني من القرنية بين ~ 2 و 5 الساعة علي حافه قطره SO باستخدام الابره 32 G بارابزل المسبقة الصنع.
    4. ادخل ابره الري 33 G المتصلة بمحلول الري من خلال شق القرنية واحد ، السرعة القصوى.
    5. ادراج آخر 33 G الصرف ابره تعلق علي حقنه دون الغطاس من خلال شق القرنية الأخرى للسماح قطره SO للخروج من الغرفة الاماميه في حين ري مع محلول الري.
    6. سحب ابره الصرف ، ثم ابره الري.
    7. حقن فقاعه الهواء في الغرفة الاماميه للحفاظ علي عمقها الطبيعي والصحافة لإغلاق شق القرنية.
    8. تطبيق مرهم المضادات الحيوية علي كلا العينين.
    9. الحفاظ علي الماوس علي لوحه الانتعاش التدفئة حتى تعافي تماما من التخدير.

4. قياس IOP مره واحده في الأسبوع

  1. وضع الماوس في غرفه التعريفي perfused مع 3 ٪ ايزوفلواني مختلطة مع الأكسجين في 2L/min لمده 3 دقائق.
  2. حقن اكسيليازين والكيتامين داخل الصفاق (0.01 ملغ اكسيليازين/ز ، 0.08 ملغ كيتامين/غرام).
  3. الحفاظ علي القرنية رطبه عن طريق تطبيق الدموع الاصطناعية طوال العملية.
  4. انتظر حوالي 15 دقيقه للسماح للتلاميذ لتمدد تماما.
  5. قياس iop من كلا العينين باستخدام مقياس توتر وفقا لتعليمات المنتج. احضر المقياس بالقرب من عين الفار الحفاظ علي المسافة من غيض من المسبار إلى القرنية الماوس في حوالي 3 − 4 ملم. اضغط علي زر القياس 6x لتوليد قراءه واحده. يتم الحصول علي ثلاث قراءات تم إنشاؤها من كل عين للحصول علي متوسط IOP.
  6. التضحية الحيوانية في 8 أسابيع بعد ذلك حقن وأداء مناعي من كامل جبل الشبكية ، RGC العد ، العصب البصري (ON) أقسام شبه رقيقه ، والتقدير الكمي من axons الباقيين علي قيد التشغيل ، والتي تم وصفها قبل13.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

بعد فتره وجيزة من الحقن يمكننا بسهوله تحديد الفئران التي لا تنتج ارتفاع ضغط الدم العين مستقره بسبب قطرات SO كونها صغيره جدا (≤ 1.5 mm)13. وتستبعد هذه الكائنات من التجارب اللاحقة. بعد إجراءات الحقن ، أكثر من 80 ٪ من الفئران حقن حتى في نهاية المطاف مع قطرات أكبر من 1.6 مم. قمنا بقياس IOP من هذه العيون الماوس مره واحده في الأسبوع لمده 8 أسابيع بعد حقنه واحده حتى. و IOP من العين تلقي SO ظلت عاليه ، وعموما ضعف IOP من العين السيطرة المعاكس ، مشيرا إلى منع التلميذ فعاله (الشكل 1). وذمه في القرنية الماوس يمكن التحقق تحت المجهر تشريح الضوء بعد حقنه انتراكاميرال التي تستغرق عاده 2 − 3 أيام للتعافي. تمدد التلميذ يستغرق وقتا ، ويجب علي المرء الانتظار لتوسيع التلميذ قبل اتخاذ قياس IOP. التالي ، فاننا نحاول عدم قياس IOP قريبا جدا بعد الحقن. للسبب نفسه ، ونحن لا ننصح قياس IOP في كثير من الأحيان. مع مجموعه أخرى من الفئران ، ونحن مسح خارج SO من الغرفة الاماميه 2 أسابيع بعد ذلك حقن ، وانتظرنا لمده أسبوع آخر للسماح القرنية للتعافي قبل قياس IOP ، الذي عاد بثبات IOP إلى العادي (الشكل 1).

لتحديد اثار ارتفاع ضغط الدم العين التي يسببها حقن so علي rgcs ، ونحن كميا علي قيد التشغيل rgc somata في المناطق الطرفية من الشبكية الكمال بواسطة rbpms تلطيخ14،15 و محاور علي قيد التشغيل في المقاطع المتقاطعة علي سيميثين بواسطة PPD تلطيخ16 في 8 أسابيع بعد ذلك الحقن. وكانت الوفاة الزرق RGC والضمور العصبي دراماتيكية في ارتفاع ضغط الدم العين تحت الكشف عن العينين (SOHU) (الشكل 2). ويرد مزيد من التفاصيل عن ذلك في قسم المناقشة.

Figure 1
الشكل 1: قياسات IOP في عيون والتحكم المعاكس العينين ، مع أو بدون أزاله ذلك. SO = بذلك حقن العينين; CL = التحكم المعاكس العينين. يتم عرض البيانات كوسيلة ± s. E. M ، n = 12. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 2
الشكل 2: جلوكوكاتيوس rgc سوما وانحطاط اكسون في sohu. (ا) اللوحة العليا تصور المنطقة الطرفية التي تظهر rgcs (rbpms + ، الأحمر) في 8 أسابيع بعد ذلك حقن الشبكية المثبتة بالبالكامل. شريط مقياس = 20 μm. يصور اللوح السفلي صورا شبه رقيقه من الأجزاء المتقاطعة لل ON ملطخه ب PPD في 8 أسابيع بعد حقن SO. شريط مقياس = 10 μm. (ب) بيانات القياس الكمي لل rgcs الباقية علي قيد التشغيل في الشبكية المحيطيه (ن = 12) والمحاور في ON (n = 10) في 8 أسابيع بعد حقن SO مقارنه بالسيطرة المقابل (CL) العينين. وتقدم البيانات كوسيلة ± S.E.M. * * * *: P < 0.0001 ؛ اختبار الطالب المزدوج RGC = خليه العقدة الشبكية; ON = العصب البصري. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

هنا نظهر اجراء بسيطه ولكنها فعاله للحث علي ارتفاع IOP المستدامة في العين الماوس عن طريق حقن انتراكاميرال من SO. ويمكن تعلم هذا الاجراء بسرعة من قبل اي شخص لديه خبره في التشريح المجهري تحت المجهر. الخطر المحتمل الرئيسي للفشل هو تسرب SO من شق القرنية. ومع ذلك ، واحده من مزايا استخدام SO هو ان لان قطره النفط مرئية وقابله للقياس ، يمكننا بسهوله تحديد الفئران التي تلقت قطرات صغيره جدا للحث علي ارتفاع ضغط الدم العين مستقره قريبا بعد الحقن واستبعادها من التجارب اللاحقة. لقد حققنا بشكل روتيني معدل النجاح 80 ٪ واستبعد حوالي 20 ٪ من الفئران بسبب قطره صغيره SO (≤ 1.5 mm)13. ومع ذلك ، يمكن للجراح من ذوي الخبرة الذين يمكن ان تجعل نفق طويل نسبيا (0.3 مم) داخل طبقات من القرنية قبل اختراق القرنية في الغرفة الاماميه مع غيض مشطوف تقريبا منع اي تسرب SO عن طريق جعل الفتحة الداخلية للنفق القرنية أصغر بكثير من الفتحة الخارجية. ولذلك ، تم حقن جميع الفئران تقريبا مع قطره SO أكبر من 1.8 ملم. الاضافه إلى طول النفق ، يجدر التاكيد علي بعض النقاط الحرجة الأخرى. أولا ، من المهم للحفاظ علي منخفضه IOP في العين حقن لتجنب دفع SO للخروج من الغرفة الاماميه. خطا واحد شائع هو حقن الكثير جدا ، مما يجعل التسرب أسهل. نحن الحد من حجم SO في الغرفة الاماميه بحيث تقريبا ، ولكن ليس تماما ، ويغطي سطح القزحية. قطر هذا قطره SO ~ 2.3-2.4 مم. ثانيا ، يتم اجراء شق نفق القرنية أقرب ما يمكن إلى الممرات للسماح لشق للحصول علي مقربه من القزحية ولكن لا يضر به ، بحيث يمكن لقزحية بسهوله اتخاذ الشق. ثالثا ، يجب ان تكون سرعه الحقن بطيئه قدر الإمكان لتجنب تجاوز مفرط لذلك في الغرفة الاماميه. رابعا ، يساعد تدليك الجفن العلوي بعد الحقن في شق القرنية علي الإغلاق ، ويساعد أحيانا الغشاء الامامي لقزحية المحيط لإغلاق شق القرنية ، التالي تجنب تسرب الزيت.

هناك زيادة في IOP فقط في الجزء الخلفي من العين ، ولكن ليس في الغرفة الاماميه ، مما يجعلها سمه فريدة من نوعها لهذا النموذج. يمنع التلميذ منع تدفق الفكاهة المائية إلى الغرفة الاماميه التالي يزيد IOP فقط في الجزء الخلفي. الحاجز المادي الذي شكلته SO مع القزحية وعدسه العين الكبيرة قد قطع الغرفة الاماميه من الجزء الخلفي ، والتي قد تحد من ارتفاع IOP فقط في الجزء الخلفي ، حيث تتراكم المواد المائية. عندما يكون التلميذ الفار أكبر من قطره SO بعد التمدد ، يتم أعاده توصيل الغرف الاماميه والخلفية ، مما يسمح بزيادة سريعة من IOP في الغرفة الاماميه عن طريق الفيضانات المائية في ذلك. ولذلك ، يمكن لل مقياس توتر فقط الكشف عن زيادة iop بعد أزاله كتله العفن ، التالي فان iop الحقيقي في الجزء الخلفي هو دون شك الاستهانة. ولذلك ، سمينا هذا النموذج الذي يسببه ارتفاع ضغط الدم العين تحت الكشف عن نموذج (SOHU) ، والتي تعكس بشكل أكثر دقه ومفيده هذه الميزة الرئيسية للنموذج. سيكون من الأفضل ان تكون قادره علي قياس IOP في الجزء الخلفي مباشره ، ولكن حتى الآن ليس من الممكن. هذا المرض فريدة من نوعها SOHU نموذج له اثنين من الخصائص المفيدة: أولا ، العيون التجريبية لديها عناصر العين واضحة التي تسمح في تقييم المجرية من وظيفة البصرية والصرف والثانية ، والضمور العصبي الشديد جلوكوكاتوس يسمح اي فائده من اختبار نيوروبروتيكتانتس ان يكون كشفت.

حتى حقن يمكن ان يسبب وذمه القرنية مؤقتا ، ونحن نوصي بعدم اجراء قياسات IOP في وقت مبكر جدا أو في كثير من الأحيان. لم نكتشف اي التهاب في الغرفة الاماميه أو القرنية في عيون sohu ، علي الرغم من اننا واجهت حالتين من القرنية اتساع في أكثر من 100 الفئران تلقي حقن SO.

لان ذلك يسبب ارتفاع ضغط الدم في العين في كل من المرضي البشريين والفئران ، فمن المعقول ان الفرضية التي يمكن تكييفها هذه الرواية المفاهيمية ونموذج كبير عمليا الزرق للحيوانات الأكبر التي هي أكثر ملاءمة للتطبيقات قبل السريرية. توصيف العجز في الوظيفة العصبية والمورفولوجية من هذا النموذج سوف تشجع بالتاكيد المحققين الآخرين للاستفادة منه لمتابعه الاسئله الهامه المتعلقة بالزرق ، وحتى علي نطاق أوسع ، والامراض التي تحفز RGC وعلي انحطاط.

وباختصار ، هذا هو نموذج الزرق الحيوانية مباشره التي لا تتطلب معدات خاصه أو تكرار الإصابات وقد تكون قابله للتطبيق علي الأنواع الحيوانية الأخرى. ومن المكائد ، يمكن عكس ارتفاع IOP من نموذج SOHU عن طريق أزاله النفط من الغرفة الاماميه ، التالي فانه من المفيد للكشف عن العلاج نيوروبروتكتيف مع العلاجات خفض IOP.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

وليس لدي المؤلفين ما يفصحون عنه.

Acknowledgments

ويدعم هذا العمل من قبل المعاهد القومية للصحة منح EY024932, EY023295, و EY028106 إلى YH.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
0.5% proparacaine hydrochloride Akorn, Somerset
10mL syinge BD Luer-Lok Tip
18G needle BD with Regular Bevel, Needle Length:25.4 mm
2,2,2-Tribromoethanol (Avertin) Fisher Scientific CAS# 75-80-9 50g
32G nano BD 320122 BD Nano Ultra Fine Pen Needle-32G 4mm
33G ophalmology needle TSK/ VWR TSK3313/ 10147-200
5mL syinge BD Luer-Lok Tip
AnaSed Injection (xylazine) Butler Schein 100 mg/ml, 50 ml
artificial tears Alcon Laboratories 300651431414 Systane Ultra Lubricant Eye Drops
BSS PLUS Irrigating solution Alcon Laboratories 65080050
Dual-Stage Glass Micropipette Puller NARISHIGE PC-10
EZ-7000 Classic System EZ system
Isoflurane VetOne 502017 isoflurane, USP, 250ml/bottle
IV Administration sets EXELint/ Fisher 29081
KETAMINE HYDROCHLORIDE INJECTION VEDCO 50989-996-06 KETAVED 100mg/ml * 10ml
microgrind bevelling machine NARISHIGE EG-401
Miniature EVA Tubing McMaster-Carr 1883T4 0.05" ID, 0.09" OD, 10 ft. Length
silicon oil (SILIKON) Alcon Laboratories 8065601185 1,000 mPa.s
Standard Glass Capillaries WPI/ Fisher 1B150-4 4 in. (100mm) OD 1.5mm ID 0.84mm
TonoLab tonometer Colonial Medical Supply, Finland
veterinary antibiotic ointment Dechra Veterinary 1223RX BNP ophthalmic ointment, Vetropolycin

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Chang, E. E., Goldberg, J. L. Glaucoma 2.0: neuroprotection, neuroregeneration, neuroenhancement. Ophthalmology. 119 (5), 979-986 (2012).
  2. Tham, Y. C., et al. Global prevalence of glaucoma and projections of glaucoma burden through 2040: a systematic review and meta-analysis. Ophthalmology. 121 (11), 2081-2090 (2014).
  3. Pang, I. H., Clark, A. F. Rodent models for glaucoma retinopathy and optic neuropathy. Journal of Glaucoma. 16 (5), 483-505 (2007).
  4. Morrison, J. C., Johnson, E., Cepurna, W. O. Rat models for glaucoma research. Progress in Brain Research. 173, 285-301 (2008).
  5. McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W. Mouse models of retinal ganglion cell death and glaucoma. Experimental Eye Research. 88 (4), 816-824 (2009).
  6. Chen, S., Zhang, X. The Rodent Model of Glaucoma and Its Implications. Asia Pacific Journal of Ophthalmology (Philadelphia). 4 (4), 236-241 (2015).
  7. Sappington, R. M., Carlson, B. J., Crish, S. D., Calkins, D. J. The microbead occlusion model: a paradigm for induced ocular hypertension in rats and mice. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 51 (1), 207-216 (2010).
  8. Chen, H., et al. Optic neuropathy due to microbead-induced elevated intraocular pressure in the mouse. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (1), 36-44 (2011).
  9. Cone, F. E., Gelman, S. E., Son, J. L., Pease, M. E., Quigley, H. A. Differential susceptibility to experimental glaucoma among 3 mouse strains using bead and viscoelastic injection. Experimental Eye Research. 91 (3), 415-424 (2010).
  10. Samsel, P. A., Kisiswa, L., Erichsen, J. T., Cross, S. D., Morgan, J. E. A novel method for the induction of experimental glaucoma using magnetic microspheres. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (3), 1671-1675 (2011).
  11. Ichhpujani, P., Jindal, A., Jay Katz, L. Silicone oil induced glaucoma: a review. Graefes Archieves for Clinical and Experimental Ophthalmology. 247 (12), 1585-1593 (2009).
  12. Kornmann, H. L., Gedde, S. J. Glaucoma management after vitreoretinal surgeries. Current Opinion in Ophthalmology. 27 (2), 125-131 (2016).
  13. Zhang, J., et al. Silicone oil-induced ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse. Elife. 8, (2019).
  14. Kwong, J. M., Caprioli, J., Piri, N. RNA binding protein with multiple splicing: a new marker for retinal ganglion cells. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 51 (2), 1052-1058 (2010).
  15. Rodriguez, A. R., de Sevilla Muller, L. P., Brecha, N. C. The RNA binding protein RBPMS is a selective marker of ganglion cells in the mammalian retina. Journal of Comparative Neurology. 522 (6), 1411-1443 (2014).
  16. Smith, R. S. Systematic evaluation of the mouse eye : anatomy, pathology, and biomethods. , CRC Press. (2002).

Tags

الطب ، العدد 153 ، العين ، الزرق ، زيت السيليكون ، الغرفة الاماميه ، ارتفاع ضغط الدم العين ، نموذج الماوس ، ضغط العين ، الضمور العصبي
والسيليكون عكسها الناجمة عن النفط العين ارتفاع ضغط الدم النموذج في الفئران
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Zhang, J., Fang, F., Li, L., Huang,More

Zhang, J., Fang, F., Li, L., Huang, H., Webber, H. C., Sun, Y., Mahajan, V. B., Hu, Y. A Reversible Silicon Oil-Induced Ocular Hypertension Model in Mice. J. Vis. Exp. (153), e60409, doi:10.3791/60409 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter