Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

Gedragsbeoordeling van visuele functie via optomotorische respons en cognitieve functie via Y-maze bij diabetische ratten

Published: October 23, 2020 doi: 10.3791/61806
Automatic Translation
*1,2, *1,3, 1,4, 1, 1, 1,2, 1,2
1Center for Visual and Neurocognitive Rehabilitation, Atlanta VA Medical Center, 2Department of Biomedical Engineering, Georgia Institute of Technology, 3Department of Neuroscience, Emory University, 4Gangarosa Department of Environmental Health, Emory University
* These authors contributed equally

ERRATUM NOTICE

Summary

Neurale degeneratie in zowel ogen als hersenen als gevolg van diabetes kan worden waargenomen door gedragstests die worden uitgevoerd op knaagdieren. Het Y-doolhof, een maat voor ruimtelijke cognitie, en de optomotorische respons, een maat voor visuele functie, geven beide inzicht in mogelijke diagnoses en behandelingen.

Abstract

De optomotorische respons en het Y-doolhof zijn gedragstests die nuttig zijn voor het beoordelen van respectievelijk de visuele en cognitieve functie. De optomotorische respons is een waardevol hulpmiddel om veranderingen in ruimtelijke frequentie (SF) en contrastgevoeligheid (CS) drempels in de loop van de tijd te volgen in een aantal modellen voor retinale aandoeningen, waaronder diabetische retinopathie. Evenzo kan het Y-doolhof worden gebruikt om ruimtelijke cognitie (zoals gemeten door spontane afwisseling) en verkennend gedrag (zoals gemeten door een aantal ingangen) te volgen in een aantal ziektemodellen die het centrale zenuwstelsel beïnvloeden. Voordelen van de optomotorische respons en het Y-doolhof zijn gevoeligheid, snelheid van testen, het gebruik van aangeboren reacties (training is niet nodig) en het vermogen om te worden uitgevoerd op wakkere (niet-verdoofde) dieren. Hier worden protocollen beschreven voor zowel de optomotorische respons als het Y-doolhof en voorbeelden van hun gebruik getoond in modellen van type I en type II diabetes. Methoden omvatten de voorbereiding van knaagdieren en apparatuur, de prestaties van de optomotorische respons en het Y-doolhof en analyse van gegevens na de test.

Introduction

Meer dan 463 miljoen mensen leven met diabetes, waardoor het een van de grootste wereldwijde ziekte-epidemieën is1. Een van de ernstige complicaties die voortvloeien uit diabetes is diabetische retinopathie (DR), een belangrijke oorzaak van blindheid voor Amerikaanse volwassenen in de werkende leeftijd2. In de komende 30 jaar zal het percentage van de populatie met een risico op DR naar verwachting verdubbelen, dus het is cruciaal om nieuwe manieren te vinden om DR in de eerdere stadia te diagnosticeren om dr-ontwikkeling te voorkomen en te beperken3. Van DR wordt conventioneel gedacht dat het een vaatziekte is4,5,6. Nu echter, met bewijs van neuronale disfunctie en apoptose in het netvlies die voorafgaat aan vasculaire pathologie, wordt DR gedefinieerd als neuronale en vasculaire componenten4,5,6,7,8,9. Een manier om DR te diagnosticeren zou zijn om neurale afwijkingen in het netvlies te onderzoeken, een weefsel dat mogelijk kwetsbaarder is voor oxidatieve stress en metabole spanning van diabetes dan ander neuraal weefsel10.

Achteruitgang van de cognitieve en motorische functie komt ook voor bij diabetes en is vaak gecorreleerd met retinale veranderingen. Oudere personen met type II diabetes vertonen slechtere cognitieve prestaties bij aanvang en vertonen meer verergerde cognitieve achteruitgang dan controledeelnemers11. Bovendien is het netvlies vastgesteld als een uitbreiding van het centrale zenuwstelsel en kunnen pathologieën zich manifesteren in het netvlies12. Klinisch is de relatie tussen netvlies en hersenen bestudeerd in de context van alzheimer en andere ziekten, maar wordt niet vaak onderzocht met diabetes12,13,14,15,16. Veranderingen in de hersenen en het netvlies tijdens de progressie van diabetes kunnen worden onderzocht met behulp van diermodellen, waaronder de STZ-rat (een model van type I diabetes waarbij het toxine, streptozotocine of STZ, wordt gebruikt om bètacellen van de pancreas te beschadigen) en de Goto-Kakizaki-rat (een polygeen model van type II diabetes waarbij dieren spontaan hyperglycemie ontwikkelen op de leeftijd van ongeveer 3 weken). In dit protocol wordt een beschrijving gegeven voor het Y-doolhof en de optomotorische respons om cognitieve en visuele veranderingen bij diabetische knaagdieren te beoordelen. De optomotorische respons (OMR) beoordeelt de ruimtelijke frequentie (vergelijkbaar met gezichtsscherpte) en contrastgevoeligheid door karakteristieke reflexieve hoofdvolgbewegingen te monitoren om visuele drempels voor elk oog te meten17. Ruimtelijke frequentie verwijst naar de dikte of fijnheid van de staven en contrastgevoeligheid verwijst naar hoeveel contrast er is tussen de staven en de achtergrond (figuur 1E). Ondertussen test het Y-doolhof het ruimtelijk geheugen en de verkennende functie op korte termijn, waargenomen door spontane afwisselingen en binnenkomsten door de armen van het doolhof.

Beide tests kunnen worden uitgevoerd bij wakkere, niet-verdoofde dieren en hebben het voordeel dat ze profiteren van aangeboren reacties van de dieren, wat betekent dat ze geen training vereisen. Beide zijn relatief gevoelig, in die zin dat ze kunnen worden gebruikt om tekorten vroeg in de progressie van diabetes bij knaagdieren te detecteren, en betrouwbaar, omdat ze resultaten produceren die correleren met andere visuele, retinale of gedragstests. Bovendien kan het gebruik van de OMR en het Y-doolhof in combinatie met tests zoals elektroretinogram en optische coherentietomografiescans informatie geven over wanneer retinale, structurele en cognitieve veranderingen zich ten opzichte van elkaar ontwikkelen in ziektemodellen. Deze onderzoeken kunnen nuttig zijn bij het identificeren van neurale degeneraties die optreden als gevolg van diabetes. Uiteindelijk kan dit leiden tot nieuwe diagnostische methoden die DR effectief identificeren in vroege stadia van progressie.

De OMR en de Y-doolhofsystemen die zijn gebruikt om dit protocol te ontwikkelen, zijn beschreven in de Materialentabel. Eerder onderzoek naar de OMR, door Prusky et al.18, en het Y-doolhof, door Maurice et al.19, werd gebruikt als uitgangspunt om dit protocol te ontwikkelen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle procedures werden goedgekeurd door de Atlanta Veterans Affairs Institutional Animal Care and Use Committee en voldeden aan de National Institutes of Health-gids voor de verzorging en het gebruik van proefdieren (NIH Publications, 8e editie, bijgewerkt 2011).

1. De optomotorische respons (OMR)

  1. Het OMR-apparaat instellen (details over apparatuur en software in tabel met materialen)
    1. Kies het geschikte formaat platform voor het knaagdier: muis, rat of grote/aangetaste rat (figuur 1A).
    2. Open de OMR-software, die zou moeten openen naar een venster met verschillende tabbladen met opties en een live videofeed van de binnenkant van de OMR / virtuele drum (Figuur 1B). Zoom indien nodig in of uit met de videocamera, zodat het platform en zijn omgeving zichtbaar zijn.
    3. Let op de pictogrammen aan de linkerkant van de live-afbeelding (afbeelding 1C). Klik op het sterretje en het roterende strepenpictogram zodat zowel het groene sterretje als de groene roterende strepen uit de live feed verdwijnen.
    4. Klik op het kompaspictogram zodat er een groene cirkel en twee loodrechte lijnen verschijnen. Rek de groene cirkel uit zodat deze perfect uitlijnt met de zwarte cirkel op het platform, wat ervoor zorgt dat de OMR perfect is uitgelijnd.
    5. Klik op het kompaspictogram omdat het niet nodig is om de cirkel te zien tijdens het testen. Klik op het groene sterretje en het groene roterende strepenpictogram om deze opnieuw te laten verschijnen. Merk op dat de groene strepen in dezelfde richting draaien als de strepen in de trommel, waardoor de onderzoeker de richting van de strepen kan kennen.
    6. Klik op het tabblad Testen . Klik onder Testen op het tabblad Psychofysica . Selecteer onder Drempel de optie Frequentie om de ruimtelijke frequentie te meten.
      OPMERKING: De OMR-software maakt gebruik van een trapparadigma om automatisch de ruimtelijke frequentie (SF) te berekenen. Het contrast wordt op 100% gehouden.
    7. Klik onder Testen op het tabblad Voorinstellingen . Selecteer de standaardinstellingen voor Mouse18 of Rat20.
    8. Klik onder Testen op het tabblad Blanking . Vink het vakje Leeg bij volgen aan, dat de strepen pauzeert / de computerschermen in de drum leegmaakt wanneer de muis met de rechtermuisknop wordt geklikt.
    9. Klik op het tabblad Resultaten , waar de resultaten van de test worden weergegeven.
  2. Evalueer ruimtelijke frequentie
    1. Plaats het knaagdier op het cirkelvormige platform in het midden van de virtual reality-kamer bestaande uit vier computermonitoren met verticale sinusroosters die met een snelheid van 12 °/s rond de kamer cirkelen (figuur 1D).
    2. Merk op dat de videocamera bovenaan de kamer het gedrag van het knaagdier live op de computermonitor projecteert.
    3. Zoek naar de aan- of afwezigheid van reflexieve acties door het hoofd van het knaagdier terwijl de roosters met de klok mee of tegen de klok in bewegen. Zorg ervoor dat geïllustreerde balken zichtbaar zijn in het programma - deze geven de richting van de roosterbeweging weer.
      1. Let erop dat het hoofd van het knaagdier in dezelfde richting beweegt als de roosters. Wacht tot er een soepele achtervolging is, geen grillige uitbarstingen van hoofdbeweging, om het als tracking te tellen.
      2. Klik op Ja of Nee , indien van toepassing. Merk op dat SF begint met 0,042 cyc /deg en zich aanpast met elk ja en nee om gemakkelijker of moeilijker te worden (figuur 1E). Klik op Reset als de test moet worden gereset vanwege het per ongeluk of onjuist klikken op ja en nee.
    4. Als het knaagdier wordt getest, moet u ervoor zorgen dat het sterretje boven het hoofd van het knaagdier blijft staan.
      OPMERKING: Dit heeft twee effecten: 1) Het handhaaft de juiste ruimtelijke frequentie. Als het sterretje bijvoorbeeld tussen de schouders wordt geplaatst, zal de ruimtelijke frequentie lager zijn en zullen de balken gemakkelijker te zien zijn, wat resulteert in een vals hoge score. 2) Voor knaagdieren met lichte hoofdbewegingen maakt het sterretje het gemakkelijker om te meten of het hoofd daadwerkelijk beweegt.
    5. Let erop dat het systeem "Gereed" zegt wanneer de ruimtelijke frequentie van het knaagdier is bereikt. Houd er rekening mee dat de knoppen Ja en Nee niet langer kunnen worden aangeklikt.
    6. Klik op het tabblad Resultaten , dat de ruimtelijke frequentie voor het linkeroog, het rechteroog en de gecombineerde ogen weergeeft.
      OPMERKING: Soms is de software zo ingesteld dat de resultaten worden omgedraaid, d.w.z. het rechteroog wordt gerapporteerd als het linkeroog en het linkeroog wordt gerapporteerd als het rechteroog. Dit werd ontdekt bij het beoordelen van knaagdieren die slechts één ooglaesie hadden in een glaucoommodel.
  3. Contrastgevoeligheid evalueren
    OPMERKING: Contrastgevoeligheidstests kunnen onmiddellijk na de stap voor ruimtelijke frequentiemeting worden uitgevoerd of alleen op dezelfde dag of een andere dag als het knaagdier vermoeid lijkt na ruimtelijke frequentietests (volg stap 1-2.2 als alleen de contrastgevoeligheid wordt getest).
    1. Klik op het tabblad Testen en vervolgens op het tabblad Psychofysica . Selecteer onder Drempel de optie Contrast (enkelvoudig) om de contrastgevoeligheid te meten.
    2. Gebruik ook een trapparadigma en start roosters met SF-constante op het hoogtepunt van de contrastgevoeligheidscurve (CS). Om dit te doen, klikt u op het tabblad Stimulus en vervolgens op het tabblad Roosters . Typ in het vak Ruimtelijke frequentie 0,064 voor ratten en 0,103 voor muizen.
    3. Begin het contrast op 100% en zoek naar dezelfde reflexieve hoofdbewegingen als tijdens ruimtelijke frequentietests. Merk op dat het contrast zal afnemen naarmate het testen vordert totdat het knaagdier geen reflexieve hoofdbewegingen meer heeft als reactie op de stimulus (figuur 1E).
    4. Let erop dat het systeem "Gereed" zegt en dat de knoppen Ja en Nee niet langer aanklikbaar zijn zodra het knaagdier niet langer reageert op de visuele stimulus en de contrastgevoeligheidsdrempel is bereikt. Klik op het tabblad Resultaten , waar de contrastgevoeligheid voor het linkeroog, rechteroog en gecombineerde ogen wordt weergegeven.
  4. Analyse na het testen uitvoeren
    1. Voor diabetische retinopathiestudies, waarbij beide ogen naar verwachting vergelijkbare tekorten hebben, gebruikt u de gecombineerde score (gemiddelde van rechter- en linkerogen) voor analyse. Voor modellen die differentiële schade aan de ogen veroorzaken (d.w.z. blast injury of glaucoom), houdt u de gegevens van het linker- en rechteroog gescheiden.
    2. Gebruik voor ruimtelijke frequentie ruwe scores (de gegevens van het tabblad Resultaten ) voor analyse en gemiddelde deze scores samen per groep (d.w.z. diabetisch, controle, enz.).
    3. Gebruik voor contrastgevoeligheid de onbewerkte waarde om de gerapporteerde contrastgevoeligheid te berekenen aan de hand van het Michelson-contrast van een eerdere meting van de luminantie van het scherm.

2. Het Y-doolhof

  1. Knaagdieren voorbereiden op testen
    1. Pas knaagdieren aan de kamer aan gedurende 30 minuten voorafgaand aan het testen.
      OPMERKING: De onderzoeker kan in de kamer blijven met de lichten aan, maar moet gedurende deze tijd zwijgen.
    2. Reinig het Y-doolhof met een ontsmettingsoplossing die veilig is voor dieren en veeg alle ontsmettingsoplossing weg met papieren handdoeken. Zorg ervoor dat het doolhof droog is.
  2. Leid het Y-doolhof
    1. Label de beginarm van het Y-doolhof als B en de andere 2 armen als A en C (figuur 2A). Plaats één knaagdier in de arm die het dichtst bij de onderzoeker ligt (arm B) in de buurt van het midden van het Y-doolhof. Zodra het knaagdier is geplaatst, start u de timer (details over doolhof en timer in Tabel met materialen).
      1. Laat elk knaagdier het Y-doolhof gedurende 8 minuten verkennen. Maak opnames gedurende deze tijd en noteer eventuele waarnemingen. Ga op enkele meters afstand van het doolhof zitten terwijl je het in het zicht houdt en vermijd het maken van lawaai.
      2. Noteer de startlocatie als A en registreer elke keer dat het knaagdier een nieuwe arm binnengaat, de nieuwe locatie van het knaagdier (figuur 2B). Definieer een ingang als alle vier de ledematen van het knaagdier in een van de armen.
      3. Kijk uit voor knaagdieren om zich te verstoppen en stationair te blijven in een arm van het doolhof. Als het knaagdier langer dan 60 s op dezelfde plek blijft en geen verkennend gedrag lijkt te vertonen, verplaats het knaagdier dan naar het midden van het Y-doolhof en zet de proef voort.
    2. Verwijder na elk knaagdier alle uitwerpselen en maak het doolhof schoon met een ontsmettende oplossing.
      1. Zorg ervoor dat alle ontsmettingsmiddelen worden weggeveegd met papieren handdoeken en dat het doolhof volledig droog is voordat u het volgende knaagdier in het doolhof plaatst.
  3. Bereken spontane afwisseling en verkennend gedrag
    1. Bereken verkennend gedrag als het totale aantal boekingen dat gedurende 8 minuten is gemaakt.
    2. Bereken ruimtelijke cognitie zoals gemeten door spontane afwisseling:
      het aantal geslaagde afwisselingen/(het totale aantal vermeldingen - 2)
      1. Definieer een succesvolle afwisseling als het knaagdier achtereenvolgens naar drie verschillende locaties gaat (voorbeeld: ABC, CAB, BCA, enz.). Let op elke geslaagde afwisseling (figuur 2B).
      2. Als de bewegingen werden geregistreerd als ACABCABABCABC, negeer dan de twee initiële startlocaties bij het berekenen van spontane afwisseling (zodanig dat er 11 bewegingen in de noemer zijn). Tel het aantal nauwkeurige bewegingen (nauwkeurige bewegingen = 8). Bereken de procentuele nauwkeurigheid als: 8/(13 - 2) = 72,7%.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

De OMR wordt als succesvol beschouwd als ruimtelijke frequentie- en contrastgevoeligheidsdrempels kunnen worden verkregen van een knaagdier. Hier wordt het gebruik van de OMR om de ruimtelijke frequentie te beoordelen geïllustreerd in naïeve controle Brown-Norway en Long-Evans ratten, zowel jong (3-6 maanden) als oud (9-12 maanden). Bruin-Noorse ratten vertonen meestal een hogere ruimtelijke basisfrequentie dan Long-Evans-ratten. Bovendien werd een verouderingseffect op de ruimtelijke frequentie waargenomen bij de Long-Evans-ratten (figuur 3A). Gegevens werden geanalyseerd met behulp van een eenrichtings-ANOVA gevolgd door Holms-Sidak post-hoc vergelijkingen omdat de resultaten van jonge en oudere uit verschillende cohorten kwamen.

Het gebruik van de OMR om de contrastgevoeligheid te beoordelen wordt geïllustreerd in het STZ-model van type I diabetes dat oefeninterventiebehandeling kreeg. Long-Evans ratten werden toegewezen aan een van de vier groepen: controle, controle + actief, diabetisch en diabetisch + actief. Diabetische ratten kregen intraveneuze injecties van het toxine STZ om de bètacellen van de pancreas te beschadigen en hyperglycemie te induceren. Actieve ratten kregen 30 minuten loopbandoefening, 5 dagen per week. Inactieve ratten hadden een afgesloten loopband. Significante tekorten in contrastgevoeligheid (figuur 3B) werden waargenomen bij diabetische ratten. Inspanningsbehandeling verminderde deze tekorten (figuur 3B). Deze resultaten tonen aan dat de OMR nuttig is voor zowel het detecteren en volgen van retinale tekorten in de loop van de tijd als voor het beoordelen van de effecten van behandelingen en interventies op retinale ziekte22. Gegevens werden geanalyseerd met behulp van een tweerichtings herhaalde metingen ANOVA gevolgd door Holms-Sidak post-hoc vergelijkingen. Merk op dat de resultaten kunnen worden gepresenteerd als gegevens die zijn genormaliseerd voor controle (figuur 3B) of als ruwe waarden (figuur 3A; voor ruimtelijke frequentie: in cycli/graad of c/d; voor contrastgevoeligheid: willekeurige eenheden of a.u.). Meestal zijn 6-10 dieren, afhankelijk van de ernst van het letsel, nodig om een significant verschil met de OMR te vinden.

Het Y-doolhof wordt als succesvol beschouwd als het knaagdier binnen 8 minuten ten minste 5 armen van het doolhof binnengaat. Hier wordt het vermogen van het Y-doolhof om de cognitieve functie en het verkennende gedrag te beoordelen geïllustreerd in de Goto-Kakizaki-rat, een polygeen, niet-obees model van type II diabetes dat matige hyperglycemie ontwikkelt vanaf de leeftijd van 2-3 weken en geen insulinesuppletie vereist. Significante tekorten in ruimtelijke cognitie, zoals gemeten door spontane afwisseling (figuur 4A) en verkennend gedrag, zoals gemeten aan de hand van het aantal vermeldingen (figuur 4B), werden waargenomen bij Goto-Kakizaki-ratten in vergelijking met Wistar-controles vanaf de leeftijd van 7 weken. Controleratten lijken een afname van verkennend gedrag te vertonen van 4 tot 8 weken. Deze trend wordt ook waargenomen in langetermijnstudies (8+ maanden oud). De afname van beweging kan te wijten zijn aan een gebrek aan nieuwigheid bij herhaalde blootstelling aan doolhoven of een algemene verminderde beweging met de leeftijd. Controleratten lijken een toename van de ruimtelijke cognitie te vertonen van 4 tot 8 weken. Deze trend wordt niet waargenomen in langetermijnstudies waarin de dieren maandelijks worden uitgevoerd in plaats van wekelijks (in feite wordt vaak een afname met veroudering waargenomen), en dus kan deze toename in ruimtelijke cognitie te wijten zijn aan een leereffect van het eenmaal per week rennen van het doolhof. Gegevens werden geanalyseerd met behulp van een tweerichtings herhaalde metingen ANOVA gevolgd door Holms-Sidak post-hoc vergelijkingen. Een minimum van 10 dieren, afhankelijk van de ernst van het letsel, zijn meestal nodig om een significant verschil met het Y-doolhof te vinden.

Dit protocol genereerde visuele functie- en cognitieve functiegegevens in modellen van type I en type II diabetes. Scores voor individuele dieren werden samen gemiddeld en gebruikt om significante verschillen tussen behandelingsgroepen vroeg in de progressie van diabetes te detecteren. Het uitvoeren van zowel retinale als cognitieve beoordelingen in de loop van de tijd in modellen van systemische ziekten zoals diabetes maakt het mogelijk om het temporele uiterlijk van tekorten in de loop van de tijd te volgen. In het Goto-Kakizaki-model bleken retinale functietekorten bijvoorbeeld vooraf te gaan aan cognitieve en verkennende gedragstekorten23 (figuur 5).

Figure 1
Figuur 1: Opstelling van de OMR-apparatuur. (A) Afbeelding van muis, rat en grote of aangetaste rattenplatforms. (B) Afbeelding van het computerscherm tijdens het testen. (C) Paneel met knoppen tijdens het testen. (D) Schema van rat op platform in kamer. (E) Voorbeeldgradiënten met toenemende ruimtelijke frequentie en contrastgevoeligheid. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figure 2
Figuur 2: Opstelling van de Y-doolhof apparatuur. (A) Afbeelding van het Y-doolhof met armen gelabeld. (B) Afbeelding van een laboratoriumnotitieblok met voorbeeld van de Y-doolhofopname. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figure 3
Figuur 3: De OMR gebruiken om de visuele functie te volgen. (A) Ruimtelijke frequentiedrempels voor jonge (n = 11) en oude (n = 15) Bruin-Noorse (BN) en jonge (n = 20) en oude (n = 13) Long-Evans (LE) ratten. Deze figuur toont Brown-Norway-gegevens van Feola et al., 201921. (B) Het gebruik van de OMR om de verminderde retinale functie in de loop van de tijd en beschermende effecten van lichaamsbeweging te volgen in een STZ-ratmodel van type I diabetes. Contrastgevoeligheidsdrempels voor inactieve diabetische ratten versus actieve diabetische ratten en controleratten. Donkergrijze sterretjes vertegenwoordigen verschillen tussen beide controlegroepen en beide diabetische groepen. Oranje sterretjes vertegenwoordigen verschillen tussen inactieve diabetische ratten en actieve diabetische ratten. Dit cijfer toont gegevens van een subset van ratten uit Allen et al., 201822. Gemiddelde ± SEM. ** p < 0,01, *** p < 0,001. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figure 4
Figuur 4: Het Y-doolhof gebruiken om de cognitieve functie en het verkennende gedrag in de loop van de tijd te volgen in het Goto-Kakizaki-model van type II diabetes in vergelijking met Wistar-controles. (A) Cognitieve functie (spontane afwisseling) voor Goto-Kakizaki (diabetische) en Wistar (controle) ratten van 4 tot 8 weken oud. (B) Verkennend gedrag (aantal inzendingen) van 4 tot 8 weken oud. Gemiddelde ± SEM. ** p < 0,01, *** p < 0,001. Sterretjes vertegenwoordigen verschillen tussen Goto-Kakizaki en Wistar-ratten op elk tijdstip. Slechts één cohort ratten werd uitgevoerd van 4 weken tot 8 weken (GK: n = 7; Wistar: n = 10). Alle andere cohorten werden uitgevoerd van 5 weken tot 8 weken (GK: n = 22; Wistar: n = 23) voor een totaal n van 29 (GK) en 33 (Wistar) in week 5 tot en met 8. Dit cijfer is aangepast van Allen et al., 201923. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figure 5
Figuur 5: Tijdlijn van functionele veranderingen in het Goto-Kakizaki-model van type II diabetes. Na het optreden van hyperglycemie waren de eerste veranderingen die werden waargenomen bij de Goto-Kakizaki-rat in retinale functie, zoals gemeten door elektroretinogram (ERG), verschijnend op de leeftijd van 4 weken. Cognitieve en verkennende gedragsveranderingen verschenen na de leeftijd van 6 weken. Dit cijfer is aangepast van Allen et al., 201923. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

De OMR en het Y-doolhof maken de niet-invasieve beoordeling van visuele functie- en cognitieve functiestoornissen bij knaagdieren in de loop van de tijd mogelijk. In dit protocol werd aangetoond dat de OMR en het Y-doolhof visuele en cognitieve tekorten volgen in knaagdiermodellen van diabetes.

Kritieke stappen in het protocol

De OMR

Enkele belangrijke punten om te overwegen bij het uitvoeren van de OMR om de visuele functie te beoordelen, zijn de gebruikte testparameters, het experimentele ontwerp en de timing van het testen en de ervaring van de onderzoeker die de metingen uitvoert. Een van de meer kritische stappen in het protocol is om ervoor te zorgen dat de parameters correct zijn ingesteld. Bovendien moet de OMR-kamer als onderdeel van de installatie vóór en na elk knaagdier worden gereinigd met een ontsmettingsoplossing of een ander goedgekeurd desinfectiemiddel. Ook is het belangrijk dat de onderzoeker die de maatregelen uitvoert, getraind is en ervaring heeft met het uitvoeren van de maatregelen. De beste resultaten worden gezien wanneer de knaagdieren kalm zijn en gewend zijn aan de kamer door ze 30 minuten in hun kooien te laten voordat ze aan het experiment beginnen. Het is ook belangrijk om de ruimtelijke frequentie en contrastgevoeligheid van de basislijn te bepalen wanneer u met een nieuwe stam begint te werken en om op te merken dat niet alle stammen dezelfde basislijnniveaus zullen vertonen. Bruin-Noorse ratten hebben een grotere ruimtelijke basisfrequentie dan Long-Evans ratten. Ondertussen lijken sommige stammen van albinoratten de ruimtelijke frequentie24 te hebben aangetast, terwijl andere stammen van albinoratten helemaal geen volggedrag vertonen. Veel factoren kunnen bijdragen aan de beperkte respons van albinodieren op de OMR: verstoorde binoculariteit als gevolg van differentiële decussatie van oogzenuwvezels, gebrek aan melanine in de achterkant van het oog en een groot deel van de dubbele opsinekegels. Hoe dan ook, albinoratten zijn mogelijk geen geschikte proefpersonen voor de OMR-tests, omdat hun prestaties te dicht bij de detectiegrens kunnen liggen.

Het Y-doolhof

Een cruciaal onderdeel van het uitvoeren van het Y-doolhof is het minimaliseren van verstoringen tijdens de opnameperiode. De eerste plaatsing van het knaagdier in het doolhof mag alleen worden gedaan nadat het knaagdier gedurende 30 minuten aan de kamer kan wennen. Hierdoor kan het knaagdier zich aanpassen aan de nieuwe omgeving en voorkomt dit dat verstorende factoren het normale gedrag van het knaagdier beïnvloeden. Het minimaliseren van verstoringen tijdens elke proef is erg belangrijk. Dit omvat het vermijden van harde geluiden en ervoor zorgen dat de onderzoeker uit het zicht van het knaagdier is. Deze afleidingen kunnen stress veroorzaken voor het knaagdier. Het is ook belangrijk op te merken dat de muren van de kamer zo kaal mogelijk moeten blijven met een neutrale kleur. Felle kleuren op de muren of posters kunnen het knaagdier afleiden en hun verkennende gedragspatroon beïnvloeden.

Beperkingen van de methode en wijzigingen en probleemoplossing van de methode

De OMR

Een mogelijke beperking van de OMR is dat deze kan worden beïnvloed door experimenter bias, en verschillende experimentatoren kunnen enigszins verschillende resultaten hebben omdat de OMR-score subjectief is. Het kan gemakkelijk zijn om een te subtiele hoofdbeweging te missen of verkennend gedrag te classificeren als een hoofdbeweging. Omdat bias de OMR-uitkomsten kan beïnvloeden, is het het beste als de experimentator waar mogelijk wordt gemaskeerd voor de behandelingsgroep en het onderzoeksontwerp. De ontwikkeling van een automatische OMR of het vergelijken van de resultaten van twee testers kan ook helpen om de bias van de experimentator te verminderen.

Een veel voorkomend probleem dat kan optreden tijdens de OMR-tests is wanneer het knaagdier herhaaldelijk van het platform springt, waardoor het moeilijk wordt om een visuele drempel te verkrijgen. Als dit gebeurt, neem er dan nota van en plaats de rat voorzichtig terug op het platform; het kan ook nodig zijn om de rat de volgende dag opnieuw te meten. Bovendien kunnen ratten die nog nooit eerder zijn gemeten, verkennend gedrag vertonen wanneer ze in de OMR worden geplaatst. Als dit een probleem is, kan het hebben van een extra basislijnmeting een week of zo na de eerste meting helpen de nauwkeurigheid te verbeteren. Tests met overmatige hoeveelheden van dit gedrag moeten worden weggegooid.

Andere factoren zoals leeftijd of olfactorische signalen kunnen ook bijdragen aan ongewenste activiteit. Daarom is het belangrijk om experimenten te ontwerpen in overeenstemming met de tijdlijn van visuele systeemontwikkeling bij ratten en om het platform en de kamer grondig te reinigen voor en na het testen van elk knaagdier. Het tijdstip waarop de OMR-metingen worden uitgevoerd, moet ook worden overwogen, omdat eerdere studies hebben aangetoond dat er circadiane ritmes zijn in ruimtelijke frequentie25. Het rennen van de ratten voor de middag lijkt het beste voor hun focus (het laboratorium van Rachael Allen - persoonlijke observaties). Als ratten te afgeleid raken, kan het helpen om zachtjes op de buitenkant van de OMR te tikken.

De snelheid waarmee het testen wordt uitgevoerd, kan ook van invloed zijn op de resultaten. Maatregelen kunnen na ongeveer 30 minuten minder nauwkeurig worden als de knaagdieren hun interesse in de stimulus verliezen. Daarom kunnen nauwkeurigere resultaten worden verkregen wanneer metingen worden uitgevoerd in ongeveer ≤20 minuten. Duur van een enkele studie (voor SF of CS) is 5-10 minuten voor een expert en 30 minuten voor een beginner. Als een knaagdier weinig beweging vertoont, het grootste deel van zijn tijd doorbrengt met verzorgen of anderszins niet in de richting van de tralies kijkt, kan het vermoeid zijn. Het knaagdier kan op een andere dag opnieuw worden uitgevoerd. Bovendien kunnen SF- en CS-tests op verschillende dagen worden uitgevoerd, met name voor nieuwere testers die mogelijk langzamer zijn. De frequentie waarmee de test wordt uitgevoerd, kan ook van invloed zijn op de resultaten - door deze wekelijks of om de week uit te voeren, blijven de dieren gewend aan de test, maar het elke dag of om de andere dag uitvoeren kan hyperscherpte veroorzaken26. We voeren niet meer dan één proef per dag uit, hoewel we vaak zowel SF als CS op dezelfde dag of zelfs in dezelfde vergadering uitvoeren. Cumulatieve dagelijkse tijd voor het uitvoeren van een cohort ratten (n = 10) is 2 uur voor een expert.

De OMR meet elk oog onafhankelijk, wat resulteert in afzonderlijke visuele scores voor elk oog. In de Morrison- en microbead-modellen van glaucoom en in een oogzenuw crush-model heeft ons laboratorium geen impact van het beschadigde oog op het onbeschadigde oog waargenomen27. In een ontploffingsmodel, waarbij de ontploffing op één oog was gericht, vertoonde het contralaterale oog wel schade, maar dit kan ook te wijten zijn aan een gedeeltelijk ontploffingseffect28. Bij controleratten zou er geen verschil in resultaten moeten zijn tussen de richting van de klok mee of tegen de klok in, maar sommige knaagdieren kunnen een vooroordeel hebben; het zou dus het beste zijn om de richtingen29 af te wisselen, als het OMR-systeem niet automatisch afwisselt.

Afhankelijk van het ziektemodel kunnen verschillen in visuele functie in behandelingsgroepen variëren op basis van de gebruikte parameters. Bijvoorbeeld, bij het testen van contrastgevoeligheid, als de ruimtelijke frequentie is ingesteld op een niveau dat boven de normale ruimtelijke frequentiedrempel ligt en moeilijk op te lossen is, zullen de verschillen in contrastgevoeligheid tussen groepen klein zijn. Als de ruimtelijke frequentie echter is ingesteld op een niveau dat normaal gesproken gemakkelijk te zien is voor ratten, zullen de verschillen in contrastgevoeligheid tussen groepen groter zijn30. Daarom is het belangrijk om rekening te houden met het onderzoeksontwerp en de normale ruimtelijke frequentiedrempels van knaagdieren bij het instellen van parameters voor het uitvoeren van de OMR.

Het Y-doolhof

Als een dier bang is, kan het in een hoek van het doolhof bevriezen. Bovendien, als er een hard geluid buiten de kamer gebeurt, kan een dier bang worden en niet in het doolhof bewegen. Om deze problemen te verklaren, kunnen onderzoekers ratten eerst aan de kamer laten wennen, een bevroren dier naar een keuzepunt verplaatsen, een dier op een andere dag opnieuw laten lopen of de dieren in rood licht laten lopen, waarvan wordt gedacht dat ze minder nerveus worden omdat ze normaal gesproken actief zijn in duisternis (Rachael Allen's Lab - persoonlijke communicatie). Het wordt ook aanbevolen om het Y-doolhof elke dag op hetzelfde tijdstip uit te voeren om rekening te houden met veranderingen in activiteitsniveaus gedurende de dag als gevolg van circadiane ritmes. We laten de ratten meestal voor de middag lopen (Rachael Allen's Lab - persoonlijke observaties). Duur van een enkele proef is 8 min (10 min, met opruiming). We voeren nooit meer dan één proef per dag uit. Als een extra studie nodig is, wordt de proef op een andere dag uitgevoerd. Cumulatieve dagelijkse tijd voor het uitvoeren van een cohort ratten (n = 10) is 2-3 uur. Leeftijdsgebonden afnames in ruimtelijke afwisseling werden waargenomen bij ratten op de leeftijd van 9-12 maanden en bij verkennend gedrag op de leeftijd van 12 maanden28.

Hoewel zowel verkennend gedrag als ruimtelijke cognitie afnemen bij diabetische knaagdieren, lijken de twee niet nauw gecorreleerd te zijn, en dus evalueren we niet onafhankelijk locomotorische activiteit voorafgaand aan de Y-doolhoftest.

De betekenis van de methode ten opzichte van bestaande/alternatieve methoden

De OMR

Andere methoden voor het testen van visuele functies, zoals optokinetische tracking, vertrouwen op het bevestigen van het hoofd van het dier op zijn plaats en het volgen van oogbewegingen. Ongebreidelde optomotorische respons (OMR) testen maakt longitudinale, niet-invasieve en betrouwbare meting van de visuele functie bij knaagdieren mogelijk. In dit protocol werd beschreven hoe de OMR kan worden gebruikt om zowel ruimtelijke frequentie- als contrastgevoeligheidsdrempels voor elk oog te kwantificeren. Deze methode kan zeer nuttig zijn voor het detecteren van neuronale disfunctie in een vroeg stadium bij ziekten zoals diabetes. Andere tests zoals de visuele watertaak kunnen ook worden gebruikt om de ruimtelijke frequentie te meten31, maar omdat dit inhoudt dat knaagdieren worden getraind om naar een helling in een gemodificeerd Y-doolhof te zwemmen, is de taak tijdrovend en vereist veel training. Verder meet de OMR waarden voor elk oog afzonderlijk, wat nuttig is in modellen waarbij letsel op het ene oog is gericht en het andere oog dient als een contralaterale controle (bijvoorbeeld veel glaucoommodellen). Bovendien is OMR een gevoelige beoordeling, in staat om veranderingen al 3-4 weken na diabetes te detecteren, wat eerder is dan andere visuele beoordelingen. Elektrofysiologische assays zijn een alternatief voor gedragsmatige visuele tests. Elektroretinografie (ERG) is meer beschikbaar dan de OMR en kan tekorten in precieze celtypen bepalen met behulp van verschillende componenten van de ERG-golf32 (a- golven vertegenwoordigen fotoreceptorcelfunctie, b- golven vertegenwoordigen bipolaire celfunctie). Ondertussen kan de OMR worden gebruikt om een tekort aan visuele functie te bepalen, zonder het precieze punt van afbraak langs het pad te onthullen. De OMR is echter een gevoeligere maat voor DR dan ERG, met de OMR-tekorten die meestal worden waargenomen tussen 2-4 weken na hyperglycemie en ERG-tekorten die meestal 4-8 weken na hyperglycemie bij knaagdieren worden waargenomen. Ernstige diabetische cataract kan de OMR beïnvloeden. Diabetische cataract bij knaagdieren verschijnt en / of verergert echter onder anesthesie, en dus worden tests zoals ERG en optische coherentietomografie die anesthesie vereisen veel vaker beïnvloed dan de OMR, die wordt uitgevoerd bij wakkere dieren.

Het Y-doolhof

Het Y-doolhof vertrouwt op ruimtelijke cognitie zoals het Morris-waterdoolhof, maar gebruikt geen sterke negatieve stimulus (d.w.z. water) om het dier te motiveren om de taak uit te voeren. Zo is het Y-doolhof minder belastend voor de dieren en is het ook gemakkelijker uit te voeren. Het is echter mogelijk dat het Y-doolhof niet zo gevoelig is als het Morris-waterdoolhof of het Barnes-doolhof. In tegenstelling tot het Morris waterdoolhof is het Y-doolhof een automatisch gedrag en vereist het geen training. De tijdsdruk die gemoeid is met het uitvoeren van het Y-doolhof is dus veel lager.

Conclusies en toekomstige toepassingen of aanwijzingen van de methode

De OMR

De OMR is nuttig voor het meten van de visuele functie bij knaagdieren door hoofdbewegingen te volgen. Het is een effectieve methode, maar er zijn updates en toevoegingen die continu worden gedaan om het protocol te verbeteren. Sommige nieuwe methoden gebruiken het knaagdier dat zijn hoofd pauzeert als een negatieve OMR-indicator in combinatie met head tracking als een positieve indicator33. Dit maakt snellere en nauwkeurigere metingen van de visuele functie mogelijk34. Een andere manier waarop dit proces is aangepast, is door een systeem te ontwikkelen dat automatisch het hoofd volgt zonder kunstmatige markers om inconsistenties te verminderen die het gevolg kunnen zijn van menselijke testers35. Vanaf 2016 is een geautomatiseerd of kwantitatief OMR-systeem genaamd qOMR goed ontwikkeld en commercieel beschikbaar. In het bovenstaande protocol was de OMR in staat om tekorten in ruimtelijke frequentie en contrastgevoeligheid bij diabetische ratten te detecteren, evenals bescherming tegen tekorten met een behandeling (oefening).

Het Y-doolhof

Het Y-doolhof onthult informatie over verkennend gedrag en ruimtelijke cognitie en werd hier gebruikt om gedragsstoornissen bij diabetische knaagdieren na 7 weken te detecteren. Andere tests om de cognitieve functie te observeren bestaan (dwz Morris waterdoolhof, Barnes doolhof, nieuwe objectherkenning), en het is mogelijk dat deze tests cognitieve achteruitgang eerder kunnen onthullen of informatie kunnen geven over verschillende aspecten van cognitie. Toekomstige aanwijzingen voor het Y-doolhof omvatten het plaatsen van een nieuw object of voedselprikkel in een van de armen en het observeren van het verkennende patroon van het knaagdier36. Een variant hierop is het blokkeren van een van de armen van het Y-doolhof, waardoor het knaagdier de twee resterende armen kan verkennen, en vervolgens de toegang tot de derde arm heropent en evalueert hoe lang het knaagdier in de derde nieuwe arm doorbrengt. Een andere waardevolle verbetering die kan worden aangebracht met betrekking tot het Y-doolhof is het ontwikkelen van automatische tracking van de knaagdieren om hun bewegingen te registreren. Dit zou de noodzaak voor handmatige registratie van de bewegingen van de knaagdieren elimineren en zou de berekeningen van de spontane afwisselingen nauwkeuriger en efficiënter maken.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

De auteurs hebben niets te onthullen.

Acknowledgments

Dit werk werd ondersteund door de Department of Veterans Affairs Rehab R&D Service Career Development Awards (CDA-1, RX002111; CDA-2; RX002928) naar RSA en (CDA-2, RX002342) naar AJF en de National Institutes of Health (NIH-NICHD F31 HD097918 naar DACT en NIH-NIEHS T32 ES012870 naar DACT) en NEI Core Grant P30EY006360.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
OptoMotry HD CerebralMechanics Inc. OMR apparatus & software
Timer Thomas Scientific 810029AR
Y-Maze apparatus San Diego Instruments 7001-043 Available specifically for rats

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. IDF. International Diabetes Federation Diabetes Atlas, 9th edn. , Available from: https://diabetesatlas.org/upload/resources/material/20200302_133351_IDFATLAfinal-web.pdf (2019).
  2. Wang, W., Lo, A. C. Y. Diabetic retinopathy: pathophysiology and treatments. International Journal of Molecular Sciences. 19 (6), (2018).
  3. Akpek, E. K., Smith, R. A. Overview of age-related ocular conditions. The American Journal of Managed Care. 19 (5), Suppl 67-75 (2013).
  4. Urano, F. Wolfram syndrome: diagnosis, management, and treatment. Current Diabetes Reports. 16 (1), 6 (2016).
  5. Adeva-Andany, M. M., Funcasta-Calderón, R., Fernández-Fernández, C., Ameneiros-Rodríguez, E., Domínguez-Montero, A. Subclinical vascular disease in patients with diabetes is associated with insulin resistance. Diabetes & Metabolic Syndrome: Clinical Research & Reviews. 13 (3), 2198-2206 (2019).
  6. Chin, J. A., Sumpio, B. E. Diabetes mellitus and peripheral vascular disease: diagnosis and management. Clinics in Podiatric Medicine and Surgery. 31 (1), 11-26 (2014).
  7. Barber, A. J., Gardner, T. W., Abcouwer, S. F. The significance of vascular and neural apoptosis to the pathology of diabetic retinopathy. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 52 (2), 1156-1163 (2011).
  8. Pardue, M. T., Allen, R. S. Neuroprotective strategies for retinal disease. Progress in Retinal and Eye Research. 65, 50-76 (2018).
  9. Aung, M. H., Kim, M. K., Olson, D. E., Thule, P. M., Pardue, M. T. Early visual deficits in streptozotocin-induced diabetic long evans rats. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 54 (2), 1370-1377 (2013).
  10. Antonetti, D. A., et al. Diabetic retinopathy: seeing beyond glucose-induced microvascular disease. Diabetes. 55 (9), 2401-2411 (2006).
  11. Logroscino, G., Kang, J. H., Grodstein, F. Prospective study of type 2 diabetes and cognitive decline in women aged 70-81 years. BMJ. 328 (7439), 548 (2004).
  12. London, A., Benhar, I., Schwartz, M. The retina as a window to the brain-from eye research to CNS disorders. Nature Reviews Neurology. 9 (1), 44-53 (2013).
  13. Archibald, N. K., Clarke, M. P., Mosimann, U. P., Burn, D. J. The retina in Parkinson's disease. Brain. 132 (5), 1128-1145 (2009).
  14. Sakai, R. E., Feller, D. J., Galetta, K. M., Galetta, S. L., Balcer, L. J. Vision in multiple sclerosis: the story, structure-function correlations, and models for neuroprotection. Journal of Neuroophthalmology. 31 (4), 362-373 (2011).
  15. Wong, T. Y., et al. Retinal microvascular abnormalities and incident stroke: the Atherosclerosis Risk in Communities Study. The Lancet. 358 (9288), 1134-1140 (2001).
  16. Marquié, M., et al. Association between retinal thickness and β-amyloid brain accumulation in individuals with subjective cognitive decline: Fundació ACE Healthy Brain Initiative. Alzheimer's Research & Therapy. 12 (1), 37 (2020).
  17. Thomas, B. B., Seiler, M. J., Sadda, S. R., Coffey, P. J., Aramant, R. B. Optokinetic test to evaluate visual acuity of each eye independently. Journal of Neuroscience Methods. 138 (1-2), 7-13 (2004).
  18. Prusky, G. T., Alam, N. M., Beekman, S., Douglas, R. M. Rapid quantification of adult and developing mouse spatial vision using a virtual optomotor system. Investigative Ophthalmology & Vision Science. 45 (12), 4611-4616 (2004).
  19. Maurice, T., et al. Behavioral evidence for a modulating role of σ ligands in memory processes. I. Attenuation of dizocilpine (MK-801)-induced amnesia. Brain Research. 647 (1), 44-56 (1994).
  20. Douglas, R. M., et al. Independent visual threshold measurements in the two eyes of freely moving rats and mice using a virtual-reality optokinetic system. Visual Neuroscience. 22 (5), 677-684 (2005).
  21. Feola, A. J., et al. Menopause exacerbates visual dysfunction in experimental glaucoma. Experimental Eye Research. 186, 107706 (2019).
  22. Allen, R. S., et al. TrkB signalling pathway mediates the protective effects of exercise in the diabetic rat retina. European Journal of Neuroscience. 47 (10), 1254-1265 (2018).
  23. Allen, R. S., et al. Retinal deficits precede cognitive and motor deficits in a rat model of type II diabetes. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 60 (1), 123-133 (2019).
  24. Prusky, G. T., Harker, K. T., Douglas, R. M., Whishaw, I. Q. Variation in visual acuity within pigmented, and between pigmented and albino rat strains. Behavioural Brain Research. 136 (2), 339-348 (2002).
  25. Hwang, C. K., et al. Circadian rhythm of contrast sensitivity is regulated by a dopamine-neuronal PAS-domain protein 2-adenylyl cyclase 1 signaling pathway in retinal ganglion cells. Journal of Neuroscience. 33 (38), 14989-14997 (2013).
  26. Mui, A. M., et al. Daily visual stimulation in the critical period enhances multiple aspects of vision through BDNF-mediated pathways in the mouse retina. PLoS One. 13 (2), 0192435 (2018).
  27. Feola, A. J., et al. Menopause exacerbates visual dysfunction in experimental glaucoma. Experimental Eye Research. 186, 107706 (2019).
  28. Allen, R. S., et al. Long-term functional and structural consequences of primary blast overpressure to the eye. Journal of Neurotrauma. 35 (17), 2104-2116 (2018).
  29. Maaswinkel, H., Li, L. Spatio-temporal frequency characteristics of the optomotor response in zebrafish. Vision Research. 43 (1), 21-30 (2003).
  30. Benkner, B., Mutter, M., Ecke, G., Münch, T. A. Characterizing visual performance in mice: an objective and automated system based on the optokinetic reflex. Behavioral Neuroscience. 127 (5), 788-796 (2013).
  31. Lehmann, K., Schmidt, K. F., Löwel, S. Vision and visual plasticity in ageing mice. Restorative Neurology and Neuroscience. 30, 161-178 (2012).
  32. Leinonen, H., Tanila, H. Vision in laboratory rodents-tools to measure it and implications for behavioral research. Behavioral Brain Research. 352, 172-182 (2018).
  33. Spielmann, M., Schröger, E., Kotz, S. A., Pechmann, T., Bendixen, A. Using a staircase procedure for the objective measurement of auditory stream integration and segregation thresholds. Frontiers in Psychology. 4, 534 (2013).
  34. Shi, C., et al. Optimization of optomotor response-based visual function assessment in mice. Scientific Reports. 8 (1), 9708 (2018).
  35. You, M., Yamane, T., Tomita, H., Sugano, E., Akashi, T. A novel rat head gaze determination system based on optomotor responses. PLoS One. 12 (4), 0176633 (2017).
  36. Whyte, A. J., et al. Reward-related expectations trigger dendritic spine plasticity in the mouse ventrolateral orbitofrontal cortex. The Journal of Neuroscience. 39 (23), 4595-4605 (2019).

Tags

Gedrag diabetische retinopathie retina Y-doolhof optomotorische respons verkennend gedrag ruimtelijke frequentie contrastgevoeligheid ruimtelijk geheugen spontane afwisseling

Erratum

Formal Correction: Erratum: Behavioral Assessment of Visual Function via Optomotor Response and Cognitive Function via Y-Maze in Diabetic Rats
Posted by JoVE Editors on 01/05/2022. Citeable Link.

An erratum was issued for: Behavioral Assessment of Visual Function via Optomotor Response and Cognitive Function via Y-Maze in Diabetic Rats. The author list was updated.

The author list was updated from:

Kaavya Gudapati*1,2, Anayesha Singh*1,3, Danielle Clarkson-Townsend1,4, Andrew J. Feola1,2, Rachael S. Allen1,2
1Center for Visual and Neurocognitive Rehabilitation, Atlanta VA Medical Center,
2Department of Biomedical Engineering, Georgia Institute of Technology,
3Department of Neuroscience, Emory University,
4Gangarosa Department of Environmental Health, Emory University
* These authors contributed equally

to:

Kaavya Gudapati*1,2, Anayesha Singh*1,3, Danielle Clarkson-Townsend1,4, Stephen Q. Phillips1, Amber Douglass1, Andrew J. Feola1,2, Rachael S. Allen1,2
1Center for Visual and Neurocognitive Rehabilitation, Atlanta VA Medical Center,
2Department of Biomedical Engineering, Georgia Institute of Technology,
3Department of Neuroscience, Emory University,
4Gangarosa Department of Environmental Health, Emory University
* These authors contributed equally

Gedragsbeoordeling van visuele functie via optomotorische respons en cognitieve functie via Y-maze bij diabetische ratten
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Gudapati, K., Singh, A.,… More

Gudapati, K., Singh, A., Clarkson-Townsend, D., Phillips, S. Q., Douglass, A., Feola, A. J., Allen, R. S. Behavioral Assessment of Visual Function via Optomotor Response and Cognitive Function via Y-Maze in Diabetic Rats. J. Vis. Exp. (164), e61806, doi:10.3791/61806 (2020).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter