Summary
Un protocole pour mesurer les leucocytes du sang périphérique à l’aide d’un analyseur de leucocytes basé sur une carte POCT est présenté ici. Les mêmes échantillons de sang ont été analysés par deux analyseurs d’hématologie automatisés pour évaluer la cohérence et l’exactitude des résultats. Les résultats ont montré que l’analyseur évalué avait une bonne corrélation avec le système de référence.
Abstract
Les globules blancs (WBC) sont un indicateur important de l’inflammation dans le corps, et ils peuvent aider à distinguer les infections bactériennes et virales. À l’heure actuelle, la plupart des établissements médicaux primaires en Chine ont un faible pourcentage d’adoption de la technologie de test sanguin, et un système de détection hématologique avec un rapport prix/performance élevé et une utilisation facile est nécessaire de toute urgence dans les centres de soins de santé primaires. Cet article présente le principe et les procédures de fonctionnement d’un analyseur de leucocytes basé sur une carte POCT (système évalué), qui a été utilisé pour détecter les indices WBC tels que les neutrophiles, les lymphocytes et les cellules du groupe intermédiaire (y compris les éosinophiles, les basophiles et les monocytes) dans le sang total. Les résultats du système évalué ont été comparés à ceux de deux analyseurs d’hématologie automatiques commerciaux (système de référence). La corrélation et la cohérence entre le système évalué et les systèmes de référence commerciaux ont été analysées. Les résultats ont montré que le nombre de globules blancs et le nombre de granulocytes détectés par les systèmes évalués et de référence présentaient une forte corrélation positive (rs = 0,972 et 0,973, respectivement), tandis que le nombre de lymphocytes présentait une corrélation relativement faible (rs = 0,851). Un diagramme de Bland-Altman a montré que la différence majeure entre les valeurs détectées par le système évalué et les systèmes de référence se situe dans les limites d’accord (LoA) à 95%, ce qui indique que les deux systèmes sont en bon accord. En conclusion, le système évalué a une excellente corrélation, une cohérence robuste et une comparaison fiable avec les résultats des analyseurs automatiques d’hématologie largement utilisés. Il est idéal pour la détection WBC dans les établissements médicaux primaires où un analyseur d’hématologie à cinq catégories entièrement automatique n’est pas disponible, en particulier pendant la période de prévention et de contrôle normalisée de la COVID-19.
Introduction
Le nombre de globules blancs (WBC) ou différentiel est un indicateur important pour refléter l’inflammation du corps, qui peut distinguer l’infection bactérienne de l’infection virale. L’analyse WBC est également utile pour guider le diagnostic de suivi et le traitement1. À l’heure actuelle, l’analyseur d’hématologie entièrement automatique à cinq classifications a été largement utilisé dans les grandes et moyennes unités médicales, car il est automatique, a une efficacité élevée, donne des résultats précis et fiables et réduit efficacement l’intensité de travail des techniciens de laboratoire. Il joue un rôle important dans l’examen clinique 2,3. Cependant, la plupart des établissements médicaux primaires, tels que les centres de soins de santé communautaires et les cliniques privées, ont un faible taux d’adoption d’un analyseur d’hématologie. Selon une étude multicentrique nationale sur la construction de laboratoires cliniques en Chine, la construction de laboratoires d’institutions médicales primaires est insuffisante, comme en témoignent la petite taille des laboratoires, la transmission insuffisante des talents et la propagation de la science et de la technologie à la campagne, entre autres facteurs4.
Depuis décembre 2019, la COVID-19 a commencé à se propager dans le monde entier et s’est transformée en pandémie mondiale. Dans « l’ère post-épidémique », une série de politiques nationales ont été proposées pour mettre en œuvre les mesures normalisées de prévention et de contrôle des situations épidémiques. Le laboratoire des établissements médicaux primaires joue un rôle important dans le diagnostic et le traitement de base ainsi que dans la prévention et le contrôle des maladies. C’est la première ligne de défense et de contrôle dans les situations épidémiques, et elle est essentielle à la prévention et au contrôle de la COVID-195. Certaines études ont montré que la détection des lymphocytes et des neutrophiles du sang périphérique contribuera au dépistage, au diagnostic et au traitement des patients atteints de COVID-19, et que le rapport neutrophiles/lymphocytes peut également être utilisé comme indicateur d’alerte précoce clinique de la COVID-19 grave et critique 6,7. De plus, la détection des leucocytes a l’avantage de fournir un rapport rapide. Les établissements médicaux primaires et de santé peuvent effectuer une détection approfondie des leucocytes pour aider à détecter et à dépister les infections suspectées à temps.
L’analyseur de leucocytes basé sur une carte POCT (système évalué; voir Table des matériaux) est un analyseur de cellules sanguines à trois classifications basé sur le « principe de Coulter » de référence. Le système évalué fournit des résultats d’analyse quantitative d’un histogramme WBC et de sept paramètres sanguins, y compris le nombre de WBC, le nombre de granulocytes (Gran#), le pourcentage de granulocytes (Gran%), le nombre de lymphocytes (Lym#), le pourcentage de lymphocytes (Lym%), le nombre de cellules intermédiaires (Mid#) et le pourcentage de cellules intermédiaires (Mid%). Il adopte la technologie innovante basée sur la carte et présente des avantages tels que la disponibilité d’un kit de détection d’une seule personne, l’absence de déchets liquides, une détection rapide en 30 s, l’absence de maintenance de routine et un fonctionnement convivial. Par conséquent, il est particulièrement bien adapté aux établissements médicaux primaires. Cette étude vise à évaluer les performances de détection clinique de l’analyseur de leucocytes à carte POCT en le comparant à deux analyseurs d’hématologie commerciaux entièrement automatiques (système de référence 1 et système de référence 2; voir Table des matériaux) provenant de laboratoires de deux grands hôpitaux publics.
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Protocol
Cette étude et l’utilisation d’échantillons de sang humain ont été approuvées par le comité d’éthique du premier hôpital affilié de l’Université de médecine de Guangzhou (GYYY-2016-73). Tous les participants ont donné leur consentement écrit de manière indépendante ou par l’intermédiaire de leurs parents (dans le cas des enfants).
1. Informations de base du groupe d’étude
NOTE: Du sang veineux a été prélevé sur des patients qui ont visité le premier hôpital affilié de l’Université médicale de Guangzhou (hôpital 1) et le cinquième hôpital affilié (Zhuhai) de l’Université médicale de Zunyi (hôpital 2). L’instrument utilisé pour l’examen de routine du sang à l’hôpital 1 est le système de référence 1, tandis que l’hôpital 2 utilise le système de référence 2.
- Au total, 1066 échantillons de sang ont été prélevés sur des patients qui ont visité l’hôpital 1 (532) et l’hôpital 2 (534) et qui ont subi des examens sanguins de routine en janvier 2021.
NOTE: Les patients ont été sélectionnés au hasard, provenaient de plusieurs départements et souffraient de diverses maladies. - Exclure les patients dont le dossier médical est incomplet et ceux qui n’ont pas coopéré ou qui ont refusé de donner leur consentement éclairé. Exclure les patients dont les échantillons de sang présentaient une hémolyse, du sang de chyle ou une nébulosité, ou si le sang était insuffisant en volume ou stocké pendant plus de 24 heures.
2. Flux d’étude et mesures d’intérêt
REMARQUE: Le système évalué a besoin de 5 μL de l’échantillon de sang pour déterminer le WBC et les trois paramètres de classification. Après avoir recueilli du sang, le système évalué et le système de référence ont été utilisés pour l’examen de routine du sang.
- Détectez le WBC et les trois paramètres de classification de 532 et 534 échantillons de sang à l’aide du système de référence et du système évalué, respectivement.
- Laissez un technicien hautement qualifié renuméroter au hasard les échantillons de sang sélectionnés après avoir terminé le test clinique avec le système de référence. Ensuite, remettez les échantillons à un autre technicien hautement qualifié pour la détection du WBC et des paramètres de classification à l’aide du système évalué.
- Révélez les résultats des deux systèmes.
- Demandez à un troisième technicien d’analyser les cinq indicateurs (à savoir le nombre WBC, Gran#, Gran%, Lym#, Lym%) partagés par les systèmes évalués et de référence uniquement.
3. Procédure d’utilisation du système évalué
REMARQUE: Le système évalué utilise le principe d’impédance électrique (principe de Coulter) pour compter WBC dans l’élément de détection. Le protocole de test est divisé en six parties: démarrer l’analyseur, la préparation du test, la collecte de sang, le mélange de réactifs, l’analyse d’échantillons et éteindre l’analyseur.
- Démarrer l’analyseur
- Tournez l’interrupteur d’alimentation [O/I] à l’arrière de l’analyseur sur [I]. Vérifiez que le voyant lumineux de l’analyseur est allumé.
- Entrez le nom d’utilisateur et le mot de passe corrects dans la boîte de dialogue de connexion et cliquez sur Connexion. Assurez-vous que le système effectue automatiquement l’auto-vérification et l’initialisation du démarrage, puis affiche la page d’accueil Analyse de l’échantillon .
- Préparation du test
REMARQUE: Un test d’échantillon de sang complet nécessite quatre consommables: lancette de sang, réactif hémolytique, pipette quantitative avec un tube capillaire à l’intérieur et module de détection de cellules sanguines (Figure 1).- Cliquez sur Échantillon suivant, entrez correctement le sexe, le nom et d’autres informations cliniques (au besoin), puis sélectionnez un groupe de référence approprié. Cliquez sur OK pour enregistrer les informations.
REMARQUE: Différents groupes d’âge ont leur propre intervalle de référence, de sorte que le choix du bon groupe de référence peut obtenir une invite d’alarme plus appropriée. Nouveau-né: 1-28 jours; Enfants: 29 jours à 14 ans; Homme adulte/Femme/Général : plus ou égal à 15 ans. - Déchirez le film mince du module de détection de cellules sanguines, appuyez sur le bouton Entrée/Sortie de l’entrepôt et placez correctement le module de détection des cellules sanguines dans l’entrepôt de la machine, son orifice étant tourné vers l’extérieur.
- Perforez le film d’étanchéité du réactif hémolytique avec l’extrémité d’une pipette quantitative.
- Cliquez sur Échantillon suivant, entrez correctement le sexe, le nom et d’autres informations cliniques (au besoin), puis sélectionnez un groupe de référence approprié. Cliquez sur OK pour enregistrer les informations.
- Prélèvement sanguin
- Collecte de sang capillaire: Désinfectez l’annulaire gauche avec un coton-tige trempé dans de l’alcool une fois et une fois. Une fois que l’alcool s’est naturellement desséché, utilisez une lancette de sang pour percer la peau de l’annulaire gauche.
- Pressez doucement la première goutte de sang et essuyez-la avec un coton-tige. Pressez suffisamment de sang pour former une « goutte d’eau » complète et prélevez 5 μL de l’échantillon de sang à l’aide du tube capillaire à l’intérieur de la pipette quantitative.
- Prélèvement sanguin veineux : Prélever 5 μL de l’échantillon de sang veineux pré-obtenu à l’aide du tube capillaire à l’intérieur de la pipette quantitative. Tous les tests de cette étude ont utilisé du sang veineux prélevé sur chaque patient (5 mL) à l’aide d’un récipient à vide contenant un anticoagulant EDTA-K2 . Terminez tous les tests dans un délai de 30 min à 24 h.
- Collecte de sang capillaire: Désinfectez l’annulaire gauche avec un coton-tige trempé dans de l’alcool une fois et une fois. Une fois que l’alcool s’est naturellement desséché, utilisez une lancette de sang pour percer la peau de l’annulaire gauche.
- Mélange de réactifs
- Insérez la pipette quantitative dans le réactif hémolytique (2,5 mL) et appuyez fermement dessus pour libérer l’échantillon de sang du tube capillaire.
- Mélangez le sang dans le tube capillaire et le réactif hémolytique en le retournant 15 à 20 fois à une vitesse constante, jusqu’à ce qu’il ne reste plus de sang rouge évident dans le tube capillaire. Dans cette étude, l’échantillon de sang est mélangé avec un réactif hémolytique dans un rapport de 1:500.
- Analyse d’échantillons
- Ouvrez le couvercle et pressez la solution dans le module de détection des cellules sanguines.
- Appuyez sur le bouton Entrée/Sortie de l’entrepôt . Une fois que le module de détection des cellules sanguines est entré dans l’entrepôt, appuyez sur le bouton Compter.
REMARQUE: Un voyant vert clignotant indique que l’analyseur compte. Le module de détection des cellules sanguines quittera automatiquement l’entrepôt après le comptage, et il doit être retiré et éliminé correctement. Chaque test ne prend que 30 s. - Sur l’interface de l’analyseur, cliquez deux fois sur le bouton OK pour confirmer que le module de détection des cellules sanguines a été retiré.
- Sur l’interface de l’analyseur, cliquez sur le bouton Imprimer pour imprimer les résultats du test.
- Éteignez l’analyseur
- Sur l’interface de l’analyseur, cliquez sur le bouton d’arrêt et sélectionnez Oui dans la boîte de dialogue qui apparaît sur l’interface. Vérifiez que le système commence à exécuter la séquence d’arrêt.
- Réglez le commutateur [O/I] à l’arrière du mainframe sur [O] une fois la séquence d’arrêt terminée.
4. Analyse statistique
- Détectez les valeurs aberrantes à l’aide de la méthode ESD (Extreme Studentized Deviate) généralisée et éliminez ces valeurs aberrantes pour une analyse statistique de suivi conformément aux exigencesdu document EP9-A3 EP9-A3 de l’American Association for Clinical Laboratory Standardization (CLSI).
- Calculer les paramètres descriptifs tels que les moyennes et les écarts-types (ODD) pour les données continues normalement distribuées; les médianes et les intervalles interquartiles de 25 % à 75 % pour les données non distribuées normalement; et les fréquences et les pourcentages pour les données catégorielles.
- Utilisez le test de Pearson χ2 ou le test exact de Fisher pour déterminer le degré de relation entre les variables catégorielles. Utilisez le test T à échantillon apparié ou le test U de Mann-Whitney pour comparer les données numériques entre les groupes.
- Montrer la distribution et l’association linéaire des résultats détectés des deux systèmes par nuages de points. Appliquez le test de corrélation non paramétrique de Spearman pour accéder au degré de relation entre les variables quantitatives. Utilisez les diagrammes de Bland-Altman et le coefficient de corrélation intraclasse (ICC) pour vérifier l’accord entre les valeurs quantitatives détectées par les deux systèmes.
- Analysez les données par un logiciel statistique de votre choix. La valeur de P < 0,05 est considérée comme statistiquement significative.
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Representative Results
Exemples de données
Au total, 1066 patients ont été recrutés dans deux centres de recherche, dont l’hôpital 1 (n = 532) et l’hôpital 2 (n = 534). Les caractéristiques des patients sont présentées dans le tableau 1. Le pourcentage d’hommes est de 49,9 % et l’âge médian est de 52 (32, 66) ans. Les patients inclus dans l’étude étaient composés de patients hospitalisés (51,1%), de patients externes (39,0%) et de patients soumis à un examen physique (8,4%). Les échantillons testés provenaient de patients qui ont visité les services de médecine interne (30,6%), les services de chirurgie (19,1%), les services d’obstétrique et de gynécologie (9,0%), les services de pédiatrie (3,9%), etc.
Détection des résultats aberrants (valeurs aberrantes)
En prenant les résultats du système de référence comme l’axe horizontal et les résultats du système évalué comme l’axe vertical, un nuage de points de cinq indices de leucocytes de 1066 échantillons a été obtenu (les résultats ne sont pas montrés). Les points anormaux suspects sont évidents dans le nuage de points de cinq indices de leucocytes. Selon les résultats de la méthode ESD, parmi les 1066 échantillons, il y avait 16 valeurs aberrantes dans le nombre WBC, 27 valeurs aberrantes dans Gran#, 8 valeurs aberrantes dans Gran%, 15 valeurs aberrantes dans Lym# et 9 valeurs aberrantes dans Lym%. Les données ont été analysées après avoir éliminé les valeurs aberrantes, qui représentent moins de 5 % au total.
Analyse de corrélation dans le système évalué et les systèmes de référence
La figure 2 montre le nuage de points et l’analyse de corrélation de Spearman des résultats du test. Les résultats montrent que WBC count, Gran#, Gran%, Lym# et Lym% ont une bonne linéarité et corrélation entre les deux systèmes; le coefficient linéaire R2 est compris entre 0,7759 et 0,9676, et le coefficient de corrélation rspearman est compris entre 0,851 et 0,973 (toutes les valeurs P < 0,001). WBC et Gran# présentent la corrélation la plus forte entre les deux systèmes (R2 = 0,9608 et 0,9676, respectivement; rspearman = 0,972 et 0,973, respectivement), tandis que Lym# présente la corrélation la plus faible entre les systèmes (R2 = 0,7759; rspearman = 0,851). Cependant, nous n’avons pas pu évaluer la corrélation et la cohérence des cellules intermédiaires (Mid#/%), car elles sont séparées en divisions plus petites (c.-à-d. éosinophiles, basophiles et monocytes) dans le système de référence.
Analyse de cohérence
Un diagramme de Bland-Altman a été obtenu pour visualiser l’analyse de cohérence et le ±2 SD a été marqué comme limites d’accord (LoA). Les résultats sont présentés à la figure 3. Pour le WBC, la valeur moyenne de la différence est de 0,9 x 109/L entre les systèmes évalués et de référence, et l’intervalle de confiance (IC) à 95 % de la différence est de -0,7 x 109 ~ 2,5 × 109/L.Il y a 94,48 % (992/1050) échantillons dans l’IC à 95 %, ce qui signifie que les résultats WBC détectés par le système évalué sont en bon accord avec le système de référence. Pour Gran# et Gran%, la valeur moyenne de la différence entre les systèmes évalués et de référence est de 0,8 x 109/L et 2,0 %, respectivement, tandis que l’IC de 95 % de la différence est de 0,7 x 109 ~ 2,2 x 109/L et -7,7 % ~ 11,7 %, respectivement. Il y a 94,23 % (979/1039) et 94,99 % (1005/1058) échantillons dans l’IC à 95 %, respectivement. Pour Lym# et Lym%, il y a 93,82% (986/1051) et 93,76% (991/1057) échantillons dans l’IC à 95%, et la valeur de différence moyenne est de 0,33 x 109/L et 1,8%, respectivement. Les valeurs moyennes des différences dans les indices leucocytaires sont toutes supérieures à 0, ce qui indique que les résultats des tests du système évalué sont légèrement supérieurs à ceux du système de référence.
Analyse de corrélation dans différents groupes de patients
Les résultats du comptage WBC pour les échantillons de patients d’âges et de sexes différents et ceux de différents départements ont été comparés et analysés pour les corrélations. Les résultats ont montré que le niveau WBC du système évalué est supérieur à celui du système de référence. Il n’y a pas de différence significative dans la cohérence et la corrélation entre les patients masculins et féminins (ICC: 0,97 contre 0,98; rspearman: 0,98 contre 0,97). La cohérence et la corrélation sont meilleures pour les patients hospitalisés que pour les patients ambulatoires (ICC: 0,98 contre 0,96; rspearman: 0,98 contre 0,96), comme le montre le tableau 2.
Figure 1 : Photographies représentatives du système évalué et de ses réactifs et consommables de support. (A) L’analyseur utilise le principe de Coulter pour détecter les leucocytes dans le sang par trois classifications. Sa petite taille (242 mm x 397 mm x 321 mm) le rend facile à transporter. (B) Les réactifs et consommables de support limités sont combinés dans une combinaison sous la forme d’un kit de détection pour une seule personne, qui peut être stocké et utilisé à température ambiante. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 2 : Nuages de points de cinq indices de leucocytes détectés par le système évalué et le système de référence. R2 = coefficient de linéarité, rs = coefficient de corrélation de Spearman (IC à 95 %) et n = taille de l’échantillon. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 3 : Diagramme de Bland-Altman des cinq indices de leucocytes détectés par le système évalué et le système de référence. L’axe Y représente la différence des valeurs mesurées entre les systèmes évalués et de référence, tandis que l’axe X représente la valeur moyenne des indices leucocytaires mesurés par les systèmes évalués et de référence. La ligne noire continue représente la valeur moyenne de la différence pour l’ensemble du groupe d’échantillons et les lignes noires pointillées représentent 95 % des limites supérieures et inférieures de l’accord (limites moyennes d’accord ± 1,96 ET). ESi désigne les valeurs mesurées par le système évalué et RSi désigne les valeurs mesurées par le système de référence. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Tableau 1 : Données générales de la population étudiée. n = taille de l’échantillon, IQR = plage interquartile. La valeur de P correspond à la comparaison des données de l’échantillon de l’hôpital 1 et de l’hôpital 2. Le test du chi carré (χ2) a été utilisé pour comparer les différences entre les variables catégorielles dans les groupes (lorsque la fréquence théorique était inférieure à 5, la méthode de probabilité exacte de Fisher a été utilisée pour calibrer), et le test t ou le test U de Mann-Whitney a été utilisé pour comparer les données numériques entre les groupes. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce tableau.
Tableau 2 : Analyse de corrélation des résultats WBC détectés par le système évalué et le système de référence dans différents groupes de patients. n = taille de l’échantillon; IQR = intervalle interquartile; et ICC = coefficient de corrélation intraclasse (une valeur > 0,75 indique une bonne fiabilité). rs = coefficient de corrélation de Spearman; rs de 0,90-1,00, 0,70-0,90, 0,50-0,70, 0,30-0,50 et 0-0,30 indiquent, respectivement, une corrélation positive très élevée, élevée, modérée, faible et négligeable. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce tableau.
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Discussion
Avec les progrès de la médecine de laboratoire moderne, il est maintenant typique de voir plusieurs technologies de détection utilisées dans le même laboratoire ou dans des laboratoires différents pour identifier le même marqueur clinique. Par conséquent, il faudrait mettre davantage l’accent sur la cohérence des résultats des tests afin d’aider les cliniques à interpréter et à juger avec précision les résultats des tests. Selon l’enquête, la valeur totale des équipements de laboratoire dans les hôpitaux tertiaires et les laboratoires indépendants est nettement supérieure à celle des hôpitaux primaires et autres établissements médicaux4. Bien que ce type d’équipement présente les avantages de la détection de plusieurs articles, d’une grande précision, d’une stabilité et d’un flux de détection important, il présente des inconvénients tels qu’un fonctionnement coûteux, grand et lourd, complexe, une exigence pour de nombreux réactifs et une forte demande d’opérateurs de qualité professionnels, entre autres, ce qui le rend impropre à l’utilisation par les établissements médicaux primaires. Le développement d’instruments et d’équipements de détection se développe constamment dans le sens de l’automatisation, de l’intelligence, de la normalisation, de la personnalisation et de la petite portabilité9. Les avantages de l’équipement de test POCT, tels que la rapidité d’exécution, la légèreté et la facilité de transport, ainsi que l’absence d’entretien, compensent les lacunes des grands analyseurs de sang et sont plus facilement acceptés par les établissements médicaux primaires10. Réaliser la comparabilité des résultats d’essai du même spécimen et des mêmes articles par différents instruments d’essai est le contenu de base de la gestion de la qualité en laboratoire11. Cependant, peu d’études évaluent la corrélation et la cohérence entre l’analyseur d’hématologie POCT et des produits cliniques similaires.
Les patients de cette étude ont été recrutés au hasard dans deux centres de Guangzhou (hôpital 1) et de Zhuhai (hôpital 2), en Chine. Il n’y avait pas de différence significative dans les ratios hommes-femmes entre les deux centres. Les patients inscrits comprenaient ceux qui se sont rendus dans des hôpitaux pour un examen physique, ainsi que des patients externes et hospitalisés de médecine interne, de chirurgie, d’obstétrique et de gynécologie, de pédiatrie, de soins intensifs, etc. L’âge médian des patients de l’hôpital 1 est significativement plus élevé que celui de l’hôpital 2 (58 (37, 68) contre 46 (31, 63); P < 0,001). L’hôpital 1 est un hôpital spécialisé clé national pour les maladies respiratoires, la plupart des patients souffrant de maladies respiratoires qui sont plus susceptibles d’affecter les personnes âgées12. L’étude scientifique sur le vieillissement a révélé que la proportion de personnes de plus de 65 ans à l’hôpital 1 est plus élevée que celle de l’hôpital 2 (6,67 % contre 5,01 %)13.
Il y a quelques valeurs aberrantes dans le nombre de granulocytes, représentant 2,5%, mais les valeurs aberrantes de tous les éléments sont inférieures à 5%, ce qui est dans la fourchette acceptable. Le coefficient linéaire R2 des résultats des tests du système évalué et du système de référence est tous supérieur à 0,75, ce qui indique que les lignes de régression linéaire des deux systèmes ont une bonne qualité linéaire d’ajustement, le nombre de globules blancs et le nombre de neutrophiles ayant une meilleure qualité linéaire d’ajustement. La corrélation la plus forte a été trouvée entre le nombre de leucocytes et de granulocytes (rs = 0,972 et 0,973, respectivement) détectés par les deux systèmes, suivi du pourcentage de granulocytes et du pourcentage de lymphocytes (rs = 0,939 et 0,932, respectivement) et du nombrede lymphocytes (r s = 0,851). Semblable à une étude rapportée, l’effet de l’équipement de la série POCT sur le comptage des globules blancs est meilleur que les résultats des indices classifiés14. En outre, le diagramme de Bland-Altman de la différence entre les données d’essai des deux systèmes montre que la plupart des points d’essai se situent dans la limite de cohérence de 95 %, ce qui indique que les résultats des essais du système d’évaluation et du système de référence sont en bon accord. Bien que les résultats montrent que l’analyse de cohérence des lymphocytes est légèrement inférieure à celle du WBC et des granulocytes, le coefficient de corrélation des lymphocytes est toujours supérieur à 0,85, ce qui signifie que les deux systèmes ont également une bonne cohérence lors de la détection des lymphocytes. D’autre part, le diagramme de Bland-Altman montre que les résultats des tests du système évalué sont légèrement supérieurs aux valeurs d’essai du système de référence. On suppose que cela peut être dû à des erreurs systématiques dans le système évalué, ce qui rend le résultat global élevé. Tout d’abord, il faut vérifier soigneusement si l’analyseur est placé correctement avant le début du test; par exemple, la zone environnante de l’instrument doit être maintenue à une certaine distance (≥ 20 cm) du mur ou des obstacles, et l’espace où l’instrument est placé doit être bien ventilé. Deuxièmement, l’équipe R et D peut également ajuster les paramètres internes du système pour corriger l’erreur systématique.
Le nouveau système de détection de leucocytes POCT à base de cartes utilise le principe d’impédance électrique pour détecter les leucocytes et leur distribution volumique 15,16. Profitant de la différence de conductivité électrique entre les cellules sanguines et les solutions électrolytiques, lorsque des cellules sanguines de différentes tailles de volume traversent le trou de comptage, cela peut provoquer des changements de courant ou de tension à l’intérieur et à l’extérieur du trou, formant une tension d’impulsion. Cette tension d’impulsion est comparable au nombre de cellules sanguines et correspond à la taille du volume, distinguant ainsi indirectement les groupes de cellules sanguines et les comptant séparément. Plusieurs étapes critiques de la détection des leucocytes à l’aide de l’analyseur évalué doivent être prises en compte, ce qui est étroitement lié à la précision des résultats des tests. Tout d’abord, lors de la collecte de sang, la première goutte de sang doit être essuyée avec un écouvillon sec stérile, car elle peut contenir un excès de liquide tissulaire qui peut affecter les résultats du test. Deuxièmement, après avoir prélevé la deuxième goutte de sang avec un tube capillaire, le sang attaché à l’extérieur du tube doit être essuyé pour s’assurer que le volume d’échantillon de sang collecté est exactement de 5 μ L.In outre, les échantillons de sang et les réactifs hémolytiques doivent être complètement mélangés. Dans le même temps, assurez-vous que toutes les solutions sont complètement insérées dans le module de détection des cellules sanguines.
En raison de ses avantages exceptionnels, notamment son faible coût, son fonctionnement simple, sa rapidité et son absence d’entretien quotidien, ce système POCT est très approprié pour une utilisation dans les centres ambulatoires ou les unités médicales primaires, ce qui constitue un complément important à l’application clinique actuelle4. L’application de ce système peut couvrir l’examen de routine du sang dans toutes les institutions médicales primaires dans toutes les régions en développement de la Chine et a une importance clinique importante pour le dépistage précoce des maladies, en particulier les maladies infectieuses et les maladies du sang17,18. Cependant, une limitation importante est que les leucocytes ne peuvent être divisés qu’en trois catégories (neutrophiles, lymphocytes, cellules intermédiaires). À l’avenir, la capacité de classification du système devrait être encore améliorée afin d’atteindre l’objectif d’un diagnostic précis.
En conclusion, en tant que nouvel équipement d’analyse des leucocytes, l’analyseur de leucocytes POCT présente l’avantage d’être portable, peu coûteux, facile à utiliser, à détection rapide et précise; il présente une bonne corrélation, une forte cohérence et une comparaison fiable avec l’analyseur d’hématologie automatique largement utilisé dans les cliniques et convient donc à une utilisation dans les unités médicales primaires.
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Disclosures
Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Acknowledgments
Cette étude a été soutenue par la Fondation pour la recherche scientifique médicale de la province du Guangdong, en Chine (A2019224). Les groupes de financement étaient d’accord avec la conception de l’étude, l’analyse des données, la préparation du manuscrit et la décision de publier. Aucun autre financement n’a été reçu pour cette étude.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Blood cell detection module | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Blood lancet | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Hemolytic reagent | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| IBM SPSS Statistics 25 | International Business Machines Corp., Armonk, NY | Software for data analysis | |
| MedCalc 11.4.2.0 | 2021 MedCalc Software Ltd | Software for data analysis | |
| Microsoft Excel 2019 | Microsoft | Software for data analysis | |
| Point-of-care testing (POCT) card-based leukocyte analyzer | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | CX-2000 | Evaluated system |
| Quantitative pipette with capillary tube inside | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Siemens fully automatic hematology analyzer and its related reagents and consumables | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | ADVIA 2120i | Reference system 2 |
| UniCel DxH 800 Coulter Cellular Analysis System and its related reagents and consumables | Beckman Coulter, Inc. | DxH 800 | Reference system 1 |
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