Summary
यह आलेख एक खुली लौ के स्थान पर एक माइक्रो-भस्मक का उपयोग करके वर्म पिक्स, स्पैटुला और स्केलपेल को स्टरलाइज़ करने के लिए एक विधि का वर्णन करता है।
Abstract
Caenorhabtidis elegans (C. elegans) मुख्य रूप से स्नातक संस्थानों में अनुसंधान और शिक्षा के लिए एक इष्टतम मॉडल जीव है। Undergraduates जल्दी से C. elegans संस्कृतियों को बनाए रखने के लिए आवश्यक बाँझ तकनीक सीख सकते हैं। प्लैटिनम पिक्स की नसबंदी एक प्लेट से दूसरी प्लेट में कीड़े को स्थानांतरित करने के लिए उपयोग की जाती है, पारंपरिक रूप से एक बुनसेन बर्नर या इथेनॉल लालटेन से लौ में पिक को पकड़कर किया जाता है। हालांकि, बुनसेन बर्नर को गैस स्रोत की आवश्यकता होती है, और उपकरणों के दोनों टुकड़े एक खुली लौ से जुड़े आकस्मिक आग का खतरा पैदा करते हैं। यहां प्रदर्शित एक अवरक्त बैक्टीरियोलॉजिकल लूप माइक्रो-इंसिनरेटर का उपयोग करके कृमि पिक्स, स्पैटुला और स्केलपेल्स को निष्फल करने के लिए एक तकनीक है। इस उपकरण को केवल एक विद्युत आउटलेट की आवश्यकता होती है और संभावित आग के खतरों को कम करता है। जोखिम और गैस आवश्यकताओं को कम करके, यह तकनीक स्नातक सेटिंग में अनुसंधान और शिक्षण के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है।
Introduction
मॉडल जीव C. elegans कम लागत, रखरखाव में आसानी, और अनुप्रयोगों की सीमा 1,2,3,4 के कारण मुख्य रूप से स्नातक संस्थानों (PUIs) में अनुसंधान और शिक्षा दोनों के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है। कीड़े को संभालने के लिए - उदाहरण के लिए, एक कृमि को एक प्लेट से दूसरे में ले जाने के लिए, प्रयोगकर्ता एक वर्म पिक का उपयोग कर सकते हैं। विभिन्न प्रकार की पिक्स को C. elegans के साथ उपयोग के लिए बनाया या खरीदा जा सकता है। पिक्स आमतौर पर प्लैटिनम या प्लैटिनम / इरिडियम टिप का उपयोग करके बनाए जाते हैं, जो ग्लास, धातु या लकड़ी के हैंडल में घुड़सवार होते हैं। कांच के हैंडल को एक प्लैटिनम तार के चारों ओर एक पाश्चर पिपेट को पिघलाकर घर में बनाया जा सकता है जब तक कि तार सुरक्षित न हो। C. elegans पशुपालन पर अतिरिक्त जानकारी, जिसमें कीड़े और उनके खाद्य स्रोतों को विकसित करने और बनाए रखने का तरीका शामिल है, वर्मबुक5 और अन्य स्रोतों 6,7,8 में पाया जा सकता है।
C. elegans के साथ काम करते समय, एसेप्टिक तकनीकों का उपयोग आमतौर पर रोगाणुओं और कवक के साथ संदूषण को रोकने के लिए किया जाता है। एसेप्टिक तकनीकों के उदाहरणों में उपकरणों की नसबंदी, अभिकर्मकों की ऑटोक्लेविंग और बाँझ क्षेत्रों में काम करना शामिल है। कृमि पिक्स को आमतौर पर एक खुली लौ 9 का उपयोग करकेनिष्फल किया जाता है। इसके अतिरिक्त, कृमि पिक की नसबंदी कीड़े को भस्म कर देती है, इस प्रकार कई कृमि उपभेदों के साथ काम करते समय उपभेदों के आकस्मिक मिश्रण-अप को रोकती है। worm picks को स्टरलाइज़ करने के लिए विशिष्ट तरीकों में या तो एक Bunsen बर्नर, इथेनॉल लालटेन, या मानक लाइटर (तालिका 1) से एक खुली लौ शामिल है। हमें प्रयोगशाला में मौजूदा तरीकों के लिए सुरक्षित विकल्पों की तलाश करने के लिए प्रेरित किया गया था जब एक स्नातक छात्र ने अनजाने में इथेनॉल लालटेन भरते समय इथेनॉल फैलाया और लालटेन को प्रज्वलित करते समय गलती से एक छोटी सी आग शुरू कर दी। दुर्भाग्य से, इथेनॉल लालटेन 10,11,12 का उपयोग करके कई दुर्घटनाओं की सूचना दी गई है। सौभाग्य से, वैकल्पिक नसबंदी विधियों को माइक्रोबायोलॉजी में उपयोग के लिए मान्य किया गया है, और इस लेख का उद्देश्य यह प्रदर्शित करना है कि सी एलिगेंस के साथ उपयोग के लिए उपकरणों को निष्फल करने के लिए इस उपकरण का उपयोग कैसे किया जाए।
माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशालाओं में, एसेप्टिक तकनीक भी महत्वपूर्ण है। प्लैटिनम से बने सीरोलॉजिकल लूप और तारों को या तो एक खुली लौ13 या एक माइक्रो-भस्मक 14,15,16 का उपयोग करके निष्फल किया जाता है। माइक्रो-भस्मक के लिए अन्य नामों में माइक्रो-स्टरलाइज़र या बैक्टो-इंसिनरेटर शामिल हैं। पारंपरिक लौ विधियों पर माइक्रो-भस्मक के फायदों में कम आग का खतरा, भस्म सामग्री के स्पैटरिंग का उन्मूलन, और एक लैमिनर फ्लो हुड / बायोसेफ्टी कैबिनेट16,17,18 में काम करने की क्षमता शामिल है। वास्तव में, अमेरिकन सोसाइटी ऑफ माइक्रोबायोलॉजी और विश्व स्वास्थ्य संगठन दोनों एक खुली लौ17,19,20 के उपयोग पर माइक्रो-भस्मक का उपयोग करने की सिफारिश करते हैं। बुनसेन बर्नर की तुलना में, माइक्रो-इंसिनरेटर्स को भी गैस लाइन की आवश्यकता नहीं होती है, जो कुछ प्रयोगशालाओं में नहीं हो सकती है, या छात्रों के उपयोग के लिए प्रत्येक बेंच पर स्थित नहीं हो सकती है। इन फायदों से प्रेरित होकर, सी एलिगन्स प्रयोगशाला में आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले उपकरणों जैसे पिक्स, स्पैटुला और स्केलपेल की नसबंदी के लिए माइक्रो-इंसिनरेटर के साथ लौ के उपयोग को बदलने के लिए एक प्रोटोकॉल विकसित किया गया था। यह विधि प्रशिक्षकों और शोधकर्ताओं के लिए उपयुक्त हो सकती है जो सी एलिगन्स के साथ काम करते समय सुरक्षा और / या लचीलेपन को बढ़ाने की मांग करते हैं।
Protocol
1. माइक्रो-भस्मक तैयार करें
- इसे बाहरी बैरल पर क्लिप करके माइक्रो-इंसिनरेटर के लिए एक लूप धारक गौण मार्गदर्शिका संलग्न करें।
- माइक्रो-भस्मक में एक मानक 120 V या 230 V विद्युत आउटलेट के रूप में उपयुक्त के रूप में प्लग इन करें।
नोट: यह एक बेंचटॉप पर या एक लैमिनर प्रवाह हुड में किया जा सकता है। - माइक्रो-भस्मक को उच्च सेटिंग में घुमाएं और इसे 800-825 डिग्रीसेल्सियस के इष्टतम तापमान तक पहुंचने के लिए निर्माता के निर्देशों के आधार पर 10-20 मिनट के लिए गर्म करने की अनुमति दें।
नोट:: यदि भस्मक को 3 घंटे से अधिक समय तक चालू रखते हुए, तो निम्न तापमान सेटिंग (500 oC) को स्टैंडबाय सेटिंग के रूप में उपयोग किया जा सकता है. निर्माताओं के उपयोगकर्ता मैनुअल के अनुसार, यह उपकरण के उपयोग करने योग्य जीवन का विस्तार करता है।
2. लेने, स्पैटुला, या scalpel स्टरलाइज़
- गाइड21 के साथ फिसलने से पक्षों को छूने के बिना बेलनाकार नसबंदी क्षेत्र में उपकरण डालें।
नोट: यदि एक स्केलपेल को स्टरलाइज़ करना, तो ब्लेड के साथ सिरेमिक दीवार को छूने से बचने के लिए यह महत्वपूर्ण है। सिरेमिक दीवार स्क्रैपिंग हीटिंग यूनिट की अखंडता से समझौता कर सकता है। - 5-7 सेकंड के लिए नसबंदी क्षेत्र में उपकरण पकड़ो।
- गाइड के साथ पीछे की ओर फिसलने से पक्षों को छूने के बिना उपकरण को निकालें।
- पिक्स के लिए, उपकरण को जलने से बचने के लिए एक कीड़े को छूने से पहले 3-5 सेकंड के लिए ठंडा करने की अनुमति दें।
नोट: Scalpels या spatulas है कि ठंडा करने की अनुमति नहीं है अगर गाना होगा. - कीड़े लेने के बाद, पिक पर किसी भी कीड़े को जलाने के लिए 5-7 s के लिए कक्ष में पिक को फिर से डालें।
3. तुलनात्मक विधि - एक Bunsen बर्नर का उपयोग कर उपकरणों की नसबंदी
- रबर टयूबिंग का उपयोग कर गैस लाइन के लिए Bunsen बर्नर कनेक्ट करें। टयूबिंग को कसकर सुरक्षित करना सुनिश्चित करें और बर्नर को ओवरहेड ऑब्जेक्ट्स से दूर रखें।
- गैस लाइन पर घुंडी मोड़कर गैस चालू करें।
- स्ट्राइकर या लाइटर का उपयोग करके बर्नर को प्रज्वलित करें।
- गैस घुंडी और हवा के सेवन का उपयोग करके लौ को समायोजित करें जब तक कि एक नीला शंकु दिखाई न दे।
- पिक, स्पैटुला, या स्केलपेल को लौ में तब तक रखें जब तक कि यह लाल न हो जाए।
- पिक्स के लिए, उपकरण को जलने से बचने के लिए कीड़े को छूने से पहले 3-5 सेकंड के लिए ठंडा करने की अनुमति दें।
नोट: Scalpels या spatulas है कि ठंडा करने की अनुमति नहीं है अगर गाना होगा. - कीड़े लेने के बाद, पिक पर किसी भी कीड़े को जलाने के लिए लौ में पिक को फिर से डालें।
4. प्रयोग
- संस्कृति OP50 Escherichia कोलाई (ई कोलाई) एक 37 ओसी शेकर पर22 रात भर लुरिया शोरबा में बैक्टीरिया.
- रात भर की संस्कृति के बाद, 1: 100 के अनुपात में बाँझ पानी में संस्कृति को पतला करें।
नोट: इस कमजोर पड़ने कारक चढ़ाना के बाद उपनिवेशों के अलगाव को सुनिश्चित करने के लिए चुना गया था। - बैक्टीरियल समाधान में एक Bunsen बर्नर का उपयोग कर एक कृमि लेने निष्फल डुबकी, Bunsen बर्नर के साथ फिर से sterilize, और बाँझ पानी के 100 मिलीलीटर में यह घुमावदार.
- एक 10 सेमी एलबी आगर22,23 पेट्री डिश पर पानी के 100 μL प्लेट, एक बाँझ सेल स्प्रेडर का उपयोग कर पानी फैल, और ढक्कन पर के साथ 24 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर incubate.
- एक माइक्रो-भस्मक का उपयोग करके स्टरलाइज़ किए गए वर्म पिक का उपयोग करके चरण 4.3-4.4 निष्पादित करें।
- एक सकारात्मक नियंत्रण के रूप में, पुन: नसबंदी के बिना चरण 4.3-4.4 निष्पादित करें।
- एक नकारात्मक नियंत्रण के रूप में, बैक्टीरिया के समाधान के स्थान पर बाँझ पानी का उपयोग करके चरण 4.3-4.4 निष्पादित करें।
- इनक्यूबेशन अवधि के बाद मैन्युअल रूप से उपनिवेशों की गणना करें।
Representative Results
एक साधारण प्रयोग (अनुभाग 4) एक सूक्ष्म-भस्मक बनाम एक लौ का उपयोग करके सापेक्ष संदूषण दरों को प्रदर्शित करने के लिए तैयार किया गया था (चित्रा 1, तालिका 2)। जबकि ये परिणाम विधियों में संदूषण दरों का प्रतिनिधित्व करते हैं, माइक्रो-इंसिनरेटर तकनीक का उपयोग करने के लिए इस विधि को दोहराना आवश्यक नहीं होगा। प्रयोग तीन प्रतियों में चलाया गया था। नकारात्मक नियंत्रण बिना किसी बैक्टीरिया के बाँझ पानी था। सकारात्मक नियंत्रण ने न तो नसबंदी तकनीक का उपयोग किया: पिक को पतला OP50 संस्कृति में डुबोया गया था, फिर सीधे बाँझ पानी में स्थानांतरित कर दिया गया था। सभी प्रतिकृतियों और शर्तों को एक ही दिन समानांतर में चलाया गया था। सभी तीन नकारात्मक नियंत्रण प्लेटों में, शून्य कॉलोनियों की गिनती की गई थी। 4.7 (± 0.3 SEM) उपनिवेशों की एक औसत गिनती प्राप्त की गई थी जब Bunsen बर्नर का उपयोग पिक्स को निष्फल करने के लिए किया गया था। माइक्रो-भस्मक स्थिति में 3.3 (±1.2 SEM) कालोनियों की औसत गणना देखी गई थी। हालांकि, सकारात्मक नियंत्रण स्थिति में 298.3 (±17.9 SEM) उपनिवेशों की एक औसत गिनती प्राप्त की गई थी। एक 2-पूंछ वाले टी-परीक्षण ने बुनसेन बर्नर की तुलना माइक्रो-इंसिनरेटर से करते हुए समान विचरण मानते हुए कोई सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण अंतर नहीं दिया, पी = 0.35। इस प्रकार, माइक्रो-भस्मक ने बाँझपन परिणाम प्राप्त किए जो बुनसेन बर्नर के लिए समान रूप से प्रभावी हैं।
चित्रा 1: नसबंदी विधियों में बैक्टीरियल की गिनती होती है। पिक्स को बाँझ पानी में 1: 100 OP50 संस्कृति में डुबोया गया था और फिर एक बुनसेन बर्नर या माइक्रो-इंसिनरेटर का उपयोग करके निष्फल किया गया था। पिक्स को तब बाँझ पानी में डुबोया गया था, एलबी आगर22,23 पर मढ़वाया गया था, और कमरे के तापमान पर 24 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया गया था, और कॉलोनियों को मैन्युअल रूप से गिना गया था। सकारात्मक नियंत्रण में कोई नसबंदी नहीं थी, और नकारात्मक नियंत्रण ने बिना किसी बैक्टीरिया के बाँझ पानी का उपयोग किया। n = 3 प्रति शर्त दोहराता है। नोट: ग्राफ़ के प्रासंगिक भागों में डेटा बिंदुओं को अलग करने की अनुमति देने के लिए y-अक्ष टूट गया है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
| नसबंदी विधि | क़ीमत | लैब आवश्यकताएँ | लाभ | नुकसान | |||
| माइक्रो-भस्मक | $365-530 | 120 वोल्ट या 230 वोल्ट आउटलेट | • पोर्टेबल • कोई खुली लौ या उजागर हीटिंग तत्व • लैमिनर प्रवाह हुड और जैविक सुरक्षा अलमारियाँ में उपयोग करने योग्य |
• गर्म समय • उच्च लागत |
|||
| Bunsen बर्नर | $24-169 | गैस लाइन | • फास्ट सेट अप • कम लागत |
• ओपन ज्वाला • लैमिनर प्रवाह हुड या जैविक सुरक्षा कैबिनेट में उपयोग के लिए अनुशंसित नहीं |
|||
| इथेनॉल लैंप | $11 | कोई नहीं | • फास्ट सेट अप • कम लागत • फिर से भरने योग्य |
• ओपन ज्वाला • सुरक्षा खतरा जब फिर से भरना • लैमिनर प्रवाह हुड या जैविक सुरक्षा कैबिनेट में उपयोग के लिए अनुशंसित नहीं • कुछ संस्थानों में अनुमति नहीं है |
|||
| लाइटर | $5-8 | कोई नहीं | • कम लागत • सुलभ • डिस्पोजेबल • फिर से भरने योग्य |
• ओपन ज्वाला • हाथ संचालित • लैमिनर प्रवाह हुड या जैविक सुरक्षा कैबिनेट में उपयोग के लिए अनुशंसित नहीं |
|||
तालिका 1: स्टरलाइज़िंग उपकरणों के लिए विधियों की तुलना। स्टरलाइज़िंग उपकरणों के लिए चार तरीकों की तुलना फायदे, नुकसान, लागत और प्रयोगशाला आवश्यकताओं के आधार पर की गई थी।
| प्रतिकृति | दशा | |||
| माइक्रो-भस्मक | Bunsen बर्नर | नकारात्मक नियंत्रण | Positve नियंत्रण | |
| 1 | 1 | 5 | 0 | 278 |
| 2 | 4 | 4 | 0 | 334 |
| 3 | 5 | 5 | 0 | 283 |
| औसत | 3.3 | 4.7 | 0.0 | 298.3 |
| SEM | 1.2 | 0.3 | 0.0 | 17.9 |
तालिका 2: नसबंदी विधियों में बैक्टीरिया की गिनती का कच्चा डेटा। पिक्स को बाँझ पानी में 1: 100 OP50 संस्कृति में डुबोया गया था और फिर एक बुनसेन बर्नर या माइक्रो-इंसिनरेटर का उपयोग करके निष्फल किया गया था। पिक्स को तब बाँझ पानी में डुबोया गया था, एलबी आगर22,23 पर मढ़वाया गया था, और कमरे के तापमान पर 24 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया गया था, और कॉलोनियों को मैन्युअल रूप से गिना गया था। सकारात्मक नियंत्रण में कोई नसबंदी नहीं थी, और नकारात्मक नियंत्रण ने बिना किसी बैक्टीरिया के बाँझ पानी का उपयोग किया। n = 3 प्रति शर्त दोहराता है। माध्य और SEM व्यक्तिगत गिनती के नीचे रिपोर्ट की गई.
Discussion
C. elegans एक मॉडल जीव है जो स्नातक शिक्षण प्रयोगशालाओं में अभ्यास के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है। खुली लपटों के स्थान पर माइक्रो-भस्मक का उपयोग अनुसंधान प्रयोगशालाओं और कक्षा प्रयोगशालाओं दोनों में लाभ प्रदान करता है। वास्तव में, स्नातक प्रयोगशाला पाठ्यक्रम कमरे में नए प्रशिक्षित वैज्ञानिकों की संख्या को देखते हुए आकस्मिक आग का एक उच्च जोखिम पैदा कर सकते हैं। इसके अलावा, आग का खतरा तब बढ़ जाता है जब इथेनॉल का उपयोग लौ के स्रोत के पास उपकरणों को निष्फल करने के लिए किया जाता है क्योंकि इथेनॉल वाष्प प्रज्वलित होते हैं। पोर्टेबिलिटी उन कक्षाओं के लिए भी एक लाभ प्रदान करती है जहां प्रत्येक बेंच पर गैस लाइनें स्थापित नहीं की जाती हैं। इस विधि को हमारे संस्थान में शिक्षण और अनुसंधान प्रयोगशालाओं में नियोजित किया गया है, जिसके परिणामस्वरूप 2016 में इसके निगमन के बाद से संदूषण और शून्य प्रयोगशाला सुरक्षा दुर्घटनाओं में कोई वृद्धि नहीं हुई है।
माइक्रो-भस्मक के साथ संगतता सुनिश्चित करने के लिए, विभिन्न बढ़ते, तार रचनाओं और तार गेज के साथ पिक्स की एक श्रृंखला का परीक्षण किया गया था। वायर संरचना में 100% प्लैटिनम के साथ-साथ 30-32 जी की तार मोटाई के साथ 90% प्लैटिनम / 10% इरिडियम शामिल था, और मोटाई और संरचना की परवाह किए बिना, हीटिंग विधि ने तार अखंडता से समझौता नहीं किया। माउंटिंग में दो अलग-अलग प्रकार के व्यावसायिक रूप से उपलब्ध पिक हैंडल और पाश्चर पिपेट्स से इन-हाउस-मेड ग्लास माउंटिंग शामिल थे। ध्यान दें कि पिक्स लाल-गर्म चमकते नहीं हैं क्योंकि वे लौ में करते हैं। हालांकि, पर्याप्त नसबंदी अभी भी तब तक हासिल की जाती है जब तक कि नसबंदी करने वाला उचित तापमान तक पहुंच गया है। इस प्रकार, माइक्रो-भस्मक को 10 या 20 मिनट के लिए गर्म करने की अनुमति देना महत्वपूर्ण है, जैसा कि निर्माता के निर्देशों में इंगित किया गया है। नसबंदी प्राप्त करने के लिए कम से कम 5 s के लिए कक्ष में उपकरण रखना भी महत्वपूर्ण है। 7 s से अधिक समय तक कक्ष में उपकरण छोड़ने से उपकरण को नुकसान नहीं होगा, लेकिन अनावश्यक है। हालांकि यह न्यूनतम चरणों के साथ एक अपेक्षाकृत सीधी प्रक्रिया है और समस्या निवारण की आवश्यकता की संभावना नहीं है, पक्षों को छूने के बिना बैरल में उपकरण को स्थिर करने के लिए सीखने के लिए कुछ अभ्यास हो सकता है।
एक खुली लौ को बदलने के लिए, एक नसबंदी विधि को एक प्रयोगशाला में उपयोग किए जाने वाले सभी अनुप्रयोगों को कवर करना चाहिए। स्टरलाइज़िंग उपकरणों के अलावा, सी एलिगन्स प्रयोगशालाएं अन्य कार्यों को करने के लिए एक बाँझ क्षेत्र बनाने के लिए बुनसेन बर्नर का भी उपयोग कर सकती हैं जैसे कि प्लेटों को डालना या संस्कृतियों को टीका लगाना13। हालांकि, क्या यह एक बाँझ क्षेत्र बनाता है या अभी भी व्यवहार्य संदूषकों में खींचता है विवादास्पद14 बना हुआ है। हालांकि सभी संस्थानों में एक विकल्प नहीं है, इन उद्देश्यों के लिए एक जैव सुरक्षा कैबिनेट या लैमिनर फ्लो हुड का उपयोग किया जा सकता है, जिससे एक प्रयोगशाला को खुली लपटों के उपयोग के बिना कार्य करने की अनुमति मिलती है। अधिकांश माइक्रो-भस्मक के लिए अनुदेश मैनुअल स्केलपेल ब्लेड की नसबंदी के लिए उपयोग के खिलाफ सलाह देते हैं क्योंकि आंतरिक दीवारों के स्क्रैपिंग से स्टरलाइज़र को नुकसान होता है। हालांकि, यदि सावधानीपूर्वक एक गाइड का उपयोग किया जाता है, तो कोई भी आंतरिक दीवारों को छूने के बिना एक स्केलपेल ब्लेड या स्पैटुला को निष्फल कर सकता है। यह एक लौ का उपयोग किए बिना चंकिंग के लिए अनुमति देने के लिए तकनीक के उपयोग का विस्तार करता है और एक सी एलिगेंस प्रयोगशाला को विभिन्न वस्तुओं को स्टरलाइज़ करने के बीच तकनीकों को स्विच किए बिना कार्य करने की अनुमति देता है।
जैसा कि तालिका 1 में उल्लिखित है, माइक्रो-भस्मक बढ़ी हुई सुरक्षा, लैमिनर प्रवाह हुड के साथ बढ़ी हुई संगतता, और लौ-आधारित तरीकों पर पोर्टेबिलिटी में वृद्धि की पेशकश करते हैं, लेकिन सीमाएं हैं। वे अन्य तरीकों की तुलना में अधिक महंगे हैं और नसबंदी तापमान प्राप्त करने से पहले वार्म-अप समय की आवश्यकता होती है। अंत में, यह विधि जो नियमित रूप से कई माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशालाओं में उपयोग की जाती है, कुछ सी एलिगन्स अनुसंधान और शिक्षण प्रयोगशालाओं में लागू हो सकती है जो बाँझपन से समझौता किए बिना प्रयोगशाला सुरक्षा में सुधार करने की मांग कर रही है।
Disclosures
हितों के किसी टकराव का खुलासा नहीं किया गया था।
Acknowledgments
लेखक सुज़ैन हावर्ड और जस्टिन फिन को स्वीकार करना चाहते हैं। इस काम को वेलेस्ली कॉलेज न्यूरोसाइंस विभाग द्वारा वित्त पोषित किया गया था। एन 2 कीड़े सीजीसी द्वारा प्रदान किए गए थे जो अनुसंधान बुनियादी ढांचे के कार्यक्रमों के एनआईएच कार्यालय (P40 OD010440) द्वारा वित्त पोषित है। इस लेख के लिए प्रकाशन शुल्क Wellesley College Library and Technology Services Open Access Fund द्वारा समर्थित थे।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 90% platinum 10% iridium wire | Tritech | PT-9010 | Other sources and wire compositions may be used. |
| Agarose | Sigma Aldrich | A6013 | LB agar ingredient |
| Bunsen burner | Fisher Scientific | 50-110-1225 | Other Bunsen burners may be used |
| Ethanol Lamp | Carolina | 706604 | Included here as a reference to Table 1 |
| Lighter | Carolina | 706636 | Included here as a reference to Table 1 |
| Loop holder accessory | Fisher | 22-630-002 | Referred to in the manuscript as "guide" |
| Micro-incinerator | Thomas Scientific | 1154J15 | There are many companies that sell similar equipment. Similar models also sold by Benchmark Scientific (B1001), Fisher Scientific (22-630-001), Carolina (703400), and BT Lab Systems (BT1702). |
| N2 worms | CGC | N2 | |
| NaCl | Sigma Aldrich | S5886 | LB ingredient |
| OP50 E. coli | CGC | OP50 | |
| Petri dish | Fisher | 08-772B | |
| Pick handle | Tritech | TWPH1 | |
| Scalpel blade | Fisher | 12-000-161 | |
| Scalpel handle | Fisher | 12-000-164 | |
| Spatula | Fisher | 14-374 | Other spatulas will work |
| Sterile cell spreaders | VWR | 76206-438 | Other cell spreaders may be used as long as they are sterile |
| Tryptone | Sigma Aldrich | T7293 | LB ingredient |
| Yeast Extract | Sigma Aldrich | Y1625 | LB ingredient |
References
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