Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Biology

Snelle genotypering van Mouse weefsel met behulp van Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit

doi: 10.3791/636 Published: January 22, 2008

Summary

De volledige genotypering van een muis staart monster, met inbegrip weefsel spijsvertering en PCR uitlezing, wordt gedaan in een en een half uur met behulp van Sigma's SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR kit.

Abstract

Genomische detectie van DNA via PCR amplificatie en detectie van een elektroforetisch gel is een standaard manier dat het genotype van een weefselmonster wordt bepaald. Conventionele preparatie van de weefsels voor PCR-ready DNA vaak enkele uren tot dagen, afhankelijk van het weefselmonster. Het genotype van de steekproef kan dus vertraagd worden voor meerdere dagen, die niet is een optie voor veel verschillende soorten experimenten. Hier laten we zien de volledige genotypering van een muis staart monster, met inbegrip weefsel spijsvertering en PCR uitlezing, in een en een half uur met behulp van Sigma's SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. Eerst tonen we de vijftien minuten durende extractie van DNA uit het weefselmonster. Dan tonen we de real-time uitlezen van de PCR-amplificatie van het monster, die het mogelijk maakt voor de identificatie van een positief monster, zoals dit wordt versterkt. Samen met de snelle extractie en real-time uitlezing zorgen voor een snelle identificatie van genotype van een aantal verschillende types van weefsels door middel van de betrouwbare methode van PCR.

Protocol

Gelieve Klik hier om het protocol te bekijken.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit Reagent Kit Sigma-Aldrich XNATG Includes: Extraction Solution Neutralization Solution B Tissue Preparation Solution Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

DOWNLOAD MATERIALS LIST

Snelle genotypering van Mouse weefsel met behulp van Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).More

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter