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Biology

A genotipagem rápida de tecido Mouse Usando Extract-N-Amp Tissue Sigma PCR Kit

doi: 10.3791/636 Published: January 22, 2008

Summary

A genotipagem completa de uma amostra da cauda do rato, incluindo a digestão do tecido e leitura de PCR, é feito em uma hora e meia utilizando SYBR Sigma Green Extract-N-Amp Tissue PCR kit.

Abstract

Detecção genômica de DNA via PCR de amplificação e detecção em gel de eletroforese é uma maneira padrão que o genótipo de uma amostra de tecido é determinada. Preparação convencional de tecidos para PCR-DNA pronto muitas vezes levar várias horas ou dias, dependendo da amostra de tecido. O genótipo da amostra pode, assim, ser adiado por vários dias, o que não é uma opção para muitos tipos diferentes de experiências. Aqui demonstramos a genotipagem completa de uma amostra da cauda do rato, incluindo a digestão do tecido e leitura de PCR, em uma hora e meia utilizando SYBR Sigma Green Extract-N-Amp PCR Tissue Kit. Em primeiro lugar, demonstramos a extração de quinze minutos de DNA da amostra de tecido. Então, nós demonstramos o tempo real de leitura fora da amplificação por PCR da amostra, que permite a identificação de uma amostra positiva, uma vez que está sendo ampliado. Juntos, a leitura de extração e em tempo real permitem uma rápida identificação imediata do genótipo de uma variedade diferente de tipos de tecidos através do método confiável de PCR.

Protocol

Por favor, clique aqui para ver o protocolo.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit Reagent Kit Sigma-Aldrich XNATG Includes: Extraction Solution Neutralization Solution B Tissue Preparation Solution Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

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A genotipagem rápida de tecido Mouse Usando Extract-N-Amp Tissue Sigma PCR Kit
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Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).More

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).

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