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Biology

Genotipificación rápida de tejido de ratón utilizando extracto-N-Amp tejido Sigma PCR Kit

doi: 10.3791/636 Published: January 22, 2008

Summary

La determinación del genotipo completo de una muestra de cola de ratón, incluyendo la digestión del tejido y la lectura de PCR, se realiza en una hora y media utilizando SYBR Sigma verde Extract-N-Amp PCR kit de tejido.

Abstract

Detección genómica del ADN a través de la amplificación por PCR y la detección en un gel de electroforesis es una forma estándar que el genotipo de una muestra de tejido se determina. Preparación convencional de los tejidos para PCR-ADN a menudo listo tomar varias horas o días, dependiendo de la muestra de tejido. El genotipo de la muestra de lo que se puede retrasar por varios días, lo cual no es una opción para muchos tipos diferentes de experimentos. Aquí se demuestra la determinación del genotipo completo de una muestra de cola de ratón, incluyendo la digestión del tejido y la lectura de PCR, en una hora y media utilizando SYBR Sigma verde Extract-N-Amp PCR Kit de tejido. En primer lugar, demostrar la extracción de quince minutos de ADN de la muestra de tejido. Luego, se demuestra el tiempo real de lectura de la amplificación por PCR de la muestra, que permite la identificación de una muestra positiva, ya que está siendo amplificada. En conjunto, la lectura rápida de extracción y en tiempo real permiten una rápida identificación del genotipo de una variedad de diferentes tipos de tejidos a través del método confiable de PCR.

Protocol

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Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit Reagent Kit Sigma-Aldrich XNATG Includes: Extraction Solution Neutralization Solution B Tissue Preparation Solution Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

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Genotipificación rápida de tejido de ratón utilizando extracto-N-Amp tejido Sigma PCR Kit
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Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).More

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).

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