Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Biology

Snabb Genotypning av Mouse vävnad med hjälp av Sigmas Extrahera-N-Amp Tissue PCR kit

doi: 10.3791/636 Published: January 22, 2008

Summary

Den kompletta genotypning av en mus svans prov, inklusive vävnad matsmältningen och PCR avläsning, sker i en och en halv timme med Sigmas SYBR Grön extrakt-N-Amp Tissue PCR kit.

Abstract

Genomiskt upptäckt av DNA via PCR-amplifiering och detektion på en elektrofores gel är ett standardiserat sätt att genotypen av ett vävnadsprov bestäms. Konventionell bearbetning av vävnader för PCR-ready DNA tar ofta flera timmar till dagar, beroende på vävnadsprovet. Genotypen av provet kan således bli fördröjd flera dagar, vilket inte är ett alternativ för många olika typer av experiment. Här kan vi visa hela genotypning av en mus svans prov, inklusive vävnad matsmältningen och PCR avläsning i en och en halv timme med Sigmas SYBR Grön extrakt-N-Amp Tissue PCR Kit. Först visar vi de femton minuters extraktion av DNA från vävnadsprov. Sedan visar vi i realtid avläsning av PCR-amplifiering av provet, som möjliggör identifiering av ett positivt prov som den förstärks. Tillsammans snabb extraktion och realtids-avläsning möjliggör en snabb identifiering av genotyp av en mängd olika typer av vävnader genom tillförlitlig metod för PCR.

Protocol

Vänligen klicka här för att se protokollet.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit Reagent Kit Sigma-Aldrich XNATG Includes: Extraction Solution Neutralization Solution B Tissue Preparation Solution Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

DOWNLOAD MATERIALS LIST

Snabb Genotypning av Mouse vävnad med hjälp av Sigmas Extrahera-N-Amp Tissue PCR kit
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).More

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter