Biz invaziv ve pseudohyphal farklılaşması bir önlem olarak maya yapışma ve agar işgali için kalitatif bir testtir açıklar. Bu basit testi çeşitli mutant gibi invaziv fenotip etkileri çevresel ipuçlarını değerlendirmek ve maya farklılaşma sinyalizasyon yollar kullanılabilir.
Mayalar, birçok mikroorganizma yüzeylerde kolonize doğal biyofilm, bulunur. Yapay ortamlarda, insan yapımı nesnelerin yüzeyler gibi, biyofilm, endüstriyel verimlilik azaltmak yapıları yok ve insan hayatını tehdit. Öte yandan 1-3, donanımımızı biyofilm, güç, çevreyi temiz ve sürdürülebilir enerji üretmek yardımcı olabilir. Yüzeylerde kolonize ve karmaşık biyofilm katılmak S. cerevisiae 4-8 yeteneği, çoğunlukla bu organizmada çeşitli sinyal yollar ve çevre ipuçları tarafından tetiklenen farklılaşma programları yeniden keşfedilmesini kadar göz ardı edildi. 9, 10, Ras-PKA, Kss1 MAPK ve Hog1 ozmolarite yollar gibi hızlı biyofilm birleşme S. cerevisiae yerleştirilen sinyalizasyon yolları, etkileşim ve yakınsama anlamak için bir model organizma olarak S. cerevisiae kullanarak sürekli ilgi biyoloji ve sinyal iletimi araştırma. Bu amaçla 11-20, uzun, yapıştırıcı, pseudohyphal filamentler maya hücreleri farklılaşma çeşitli çevresel değişikliklere bağlı sinyal iletim yollarının aktivasyonu için uygun bir okuma oldu. Ancak, filamentasyonu yanıltıcı basit bir fenotip sanki assaying yapar fenotipleri, karmaşık bir koleksiyon. Geçtiğimiz on yılda, birkaç testleri başarıyla, kantitatif hücre yüzey yapışmasını ölçmek için yumuşak agar ve kristal viyole boyama koloni yayılmasını ölçmek için MAT oluşumu deneyleri gibi maya araştırma, bakteriyel biyofilm çalışmaları kabul edildi. 12, 21 Ancak, agar maya yapışkan ve invaziv fenotipleri niteliksel olarak değerlendirmek için geliştirilen testlerin bazı karışıklıklar oldu. Burada, anlaşılması kolay işgali değerlendirme yapışma değerlendirmesi izole etmek için adımlar maya suşlarının yapışkan ve invaziv kalitesini değerlendirmek için basit ve güvenilir bir yöntem mevcut. Önceki çalışmalarda, 10, 16 benimsenen yöntem, sıvı ortam ve kaplama, biz o yapışma değerlendirmek için su ile yıkayın ve içine işgali değerlendirmek için agar yüzeyinden tamamen hücreleri ovmak büyük lekeler, büyüme için diferansiyel besin koşullarına büyüyen hücreler içerir. agar. Biz, agar hücre işgali etkiler agara hücreleri şeritli için ihtiyacı ortadan kaldırır. Genel olarak, agar istila haploid suşlar her zaman yapıştırıcı, henüz tüm yapışkan suşları agar işgal ettiği görülmektedir. Bizim yaklaşımımız, maya sinyal iletimi, farklılaşma, yeter algılama ve biyofilm oluşumu farklılaşma adımları ve şartları dikkatli bir şekilde incelemek için diğer testleri ile birlikte kullanılabilir.
Maya hücreleri, besin ve çevre koşullarına göre, açlık ve stres koşullarında, çeşitli besin zorlamaların filamentasyonu ve flokülasyon altında spor oluşumu da dahil olmak üzere çeşitli farklılaşma modları gösterir. S. cerevisiae ve C. albicans dahil olmak üzere çeşitli mayalar, aynı zamanda çeşitli bir dizi mikroorganizmaların oluşturduğu biyofilm içinde bulunabilir. Filamentasyonu ve invaziv davranış bazı korelasyon olmasına rağmen, bu filamentasyonu işgali ve kolonizasyonu yüzeyler ve dokular neden o…
Bu testte gelişmekte olan anlayışlar Lisa Schneper ve Katrin Duevel teşekkür etmek istiyorum.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Moticam 350 | Camera | Motic | discontinued (new model: Moticam 352) | A relatively cheap camera that attaches to eye pieces of microscopes and captures digital images for PC or Mac. |