מניפולציה Tuina כדי להפחית דלקת ואובדן סחוס בחולדות osteoarthritis הברך

Summary

אנו מציגים פרוטוקול למניפולציה של Tuina המבוצעת על חולדות אוסטיאוארתריטיס ברך המושרה על ידי גבס. בהתבסס על התוצאות הראשוניות, הוא הציע כי יעילות השיטה מסתמכת על הפחתת דלקת ואובדן סחוס.

Abstract

ניסויים קליניים מצביעים על כך שמניפולציה של Tuina יעילה בטיפול בדלקת מפרקים ניוונית של הברך (KOA), בעוד שנדרשים מחקרים נוספים כדי לגלות את המנגנון שלה. לכן, מניפולציה של מודלים בעלי חיים של osteoarthritis הברך הוא קריטי. פרוטוקול זה מספק תהליך סטנדרטי למניפולציה של Tuina על חולדות KOA וחקירה ראשונית של המנגנון של Tuina עבור KOA. שיטת מניפולציית הלחיצה והלישה (סוג של מניפולציה של טווינה המתייחסת ללחיצה ולישה של האזור הספציפי של משטח הגוף) מיושמת על 5 נקודות דיקור סביב מפרק הברך של חולדות. הכוח והתדירות של המניפולציה תוקנו על ידי רישומי לחץ אצבע, ומיקום החולדה במהלך המניפולציה מתואר בפירוט בפרוטוקול. השפעת המניפולציה ניתנת למדידה על ידי בדיקות התנהגות כאב וממצאים מיקרוסקופיים בסינוביאל ובסחוס. חולדות KOA הראו שיפור משמעותי בהתנהגות הכאב. ההסננה הדלקתית של הרקמה הסינוביאלית הופחתה בקבוצת טווינה, והביטוי של גורם נמק גידולי (TNF)-α היה נמוך משמעותית. בהשוואה לקבוצת הביקורת, אפופטוזיס כונדרוציטים היה פחות בקבוצת טווינה. מחקר זה מספק פרוטוקול סטנדרטי למניפולציה של Tuina על חולדות KOA והוכחה ראשונית לכך שההשפעות הטיפוליות של Tuina עשויות להיות קשורות להפחתת דלקת סינוביאלית ואפופטוזיס כונדרוציטים מאוחר.

Introduction

דלקת מפרקים ניוונית בברך (KOA) היא מחלה ניוונית המתבטאת בעיקר בכאבי מפרקים. פיברוזיס, סדקים, כיבים ואובדן סחוס מפרקי הם הגורמים העיקריים למחלה זו¹. KOA יש שכיחות גבוהה עלולה לגרום השפעה עמוקה על חיי היומיום של החולים, גרימת נכות במקרים חמורים. בקרב אנשים בגילאי 45-84 שנים, שכיחות KOA עולה עם הגיל, והשכיחות בקרב אנשים בני 85 ומעלה היא 15%, עם דומיננטיות בקרב נשים ^2,3. בנוסף, KOA עלול להביא נטל כלכלי רציני הן על הפרט והן על החברה. סקר הראה כי עלויות הבריאות הישירות על KOA לנפש הגיעו עד 8,858 $ ± 5,120 $ בשנה⁴. עם הזדקנות החברה, KOA הפך לבעיית בריאות עולמית ולנושא חברתי מרכזי, כמו גם נושא אקטואלי למחקר מדעי.

מחקרים מבוססי ראיות הראו את היעילות של מניפולציה Tuina בטיפול KOA⁵. מניפולציה Tuina יכול להקל על הכאב ולשפר תפקוד לקוי בחולי KOA, המנגנון של אשר קשור השפעות אנטי דלקתיות ^6,7. חוקרים מצאו כי מניפולציה של Tuina עיכבה ביעילות את הביטוי של גורמים דלקתיים אינטרלוקין (IL)-β ו-5-hydroxytryptamine והאטה את התנוונות הסחוס המפרקי בארנב KOA מודל⁸. הוא הציע כי Tuina יכול לקדם את זרימת הדם ואת חילוף החומרים באתר הנגע, אשר עזר לנקות גורמים דלקתיים כגון IL-1, IL-6 וגורם נמק הגידול (TNF)-α, ובכך להקל על הסימפטומים הקליניים של KOA⁹. בנוסף, התנועה הפסיבית של המפרק באמצעות מניפולציה Tuina יכול לקדם את החדירה ואת הדיפוזיה של נוזל סינוביאלי לתוך הסחוס המפרקי ומשפר את חילוף החומרים המזינים רקמות¹⁰. מחקרים אחרים הצביעו על כך שמניפולציה של טווינה יכולה לשפר ביעילות את המדדים הביומכניים בחולי KOA¹¹. מניפולציות המופעלות על רקמות רכות יכולות לשפר את פיזור הלחץ על הגפיים ולשפר את תפקוד שיווי המשקל^12,13. יחד עם זאת, עם כמה מניפולציות התאמה משותפת, יישור הגפיים התחתונות יכול גם להיות מותאם לתקן הליכה חריגה^14,15.

מנגנון הפעולה של מניפולציה Tuina בטיפול KOA עדיין צריך להיחקר, ולכן, מחקר ניסיוני הוא הכרחי. המפתח ליישום של טווינה בחיות ניסוי הוא סטנדרטיזציה של דוגמנות, קיבוע בעלי חיים ושיטות התערבות¹⁶. שיטת המידול קובעת אם חיית הניסוי יכולה להציג את מאפייני המחלה. בינתיים, שיטות קיבוע מתאימות יכול להקל על התערבות של מניפולציה Tuina לשקף טוב יותר את ההשפעה של Tuina. הסטנדרטיזציה של שיטות התערבות היא החלק הקשה ביותר של מניפולציה Tuina. בשנת 2010, המערכת הבסיסית של תקני הדיקור הסיני הזכירה את תקני נקודת הדיקור לבעלי חיים ניסיוניים, המספקים אפשרות לדיקור סיני וניתוחי טווינה בניסויים בבעלי חיים¹⁷. עם זאת, עדיין קיימים קשיים בסטנדרטיזציה של מניפולציה של טווינה. ישנם מספר סוגים של מניפולציה Tuina¹⁸. הבחירה במניפולציה הספציפית תלויה בעיקר במחלה שיש לטפל בה ובתיאוריות הטיפוליות שהמבצע מעדיף. במחקר של Tuina for KOA, תשומת לב רבה יותר הוקדשה למניפולציה של לחיצה נקודתית (לחיצה על נקודות הדיקור הספציפיות עם האגודל או המרפק), מניפולציית דחיפת Yizhichan (מניפולציית דחיפה על ידי נענוע האגודל), ומניפולציית לחיצה ולישה (המתייחסת ללחיצה ולישה של האזור הספציפי של משטח הגוף באמצעות אצבע או כף יד)¹⁹. מניפולציה של לחיצה ולישה היא אחת המניפולציות הנפוצות ביותר של טווינה, המשלבת לחיצה ולישה כדי להזיז את הרקמה התת עורית²⁰. מניפולציה של לחיצה ולישה המיושמת על נקודות דיקור יכולה לקדם את זרימת הדם ולהקל על הכאב ומייצגת את ההשפעה הטיפולית של טווינה על KOA¹⁹.

בפרוטוקול זה יתוארו בפירוט פעולות המניפולציה של לחיצה ולישה על חולדות KOA, כולל נקודות דיקור נבחרות, עוצמת ותדירות המניפולציה ותנוחת הגוף של החולדה, כדי לספק התייחסות למחקר עתידי.

Protocol

מחקר זה עבר את סקירת האתיקה של בעלי חיים שנערכה על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים ניסיוניים של בית החולים Yueyang של רפואה סינית מסורתית ומערבית משולבת המסונפת לאוניברסיטת שנגחאי לרפואה סינית מסורתית (YYLAC-2022-166). 1. הכנה וקיבוץ ניסיוניים של בעלי חיים הכנת בעלי חיים<…

Representative Results

מבחני התנהגות כאבתוצאות MWT הראו כי MWT של הגפה האחורית הימנית לאחר הדוגמנות היה נמוך משמעותית מבעבר (עמ ‘<0.05). בהשוואה לקבוצת הביקורת, MWT של חולדות היה גבוה באופן משמעותי לאחר Tuina (p<0.05; איור 5 וטבלה 2). <img alt="Figure 5" class="xfigimg"…

Discussion

מחקר זה מספק פרוטוקול למניפולציה של Tuina על חולדות KOA. באמצעות בדיקות התנהגות כאב וממצאים היסטומורפולוגיים, הוא הציע כי סדרה כזו של מניפולציה Tuina המיושמת על חולדות KOA יכולה להפחית דלקת סינוביאלית ואפופטוזיס סחוס, אשר יכול להיות התייחסות של מניפולציה Tuina על מודלים בעלי חיים של KOA.

<p class="jove_cont…

Materials

absolute ethanol	Supelco	PHR1070	For making specimen
ALMEMO admeasuring apparatus	ahlborn	2450-1	For Mechanical Withdrawal Threshold test
Anti-Digoxin antibody	Sigma-Aldrich	SAB4200669	For HE stain IHC or TUNEL
Anti-IL-1 beta	abcam	ab283818	For HE stain IHC or TUNEL
DAB Substrate kit	Solarbio	DA1010	For HE stain IHC or TUNEL
Denture base materials	Shanghai New Century	20000356	For model making
eosin	bioswamp	PAB180016	For HE stain IHC or TUNEL
Finger pressure recordings	Suzhou Changxian Optoelectronic Technology	CX1003w	For Tuina manipulation
formic acid solution	Sigma-Aldrich	695076	For decalcification
H2O2	Sigma-Aldrich	386790-M	For HE stain IHC or TUNEL
hematoxylin	bioswamp	PAB180015	For HE stain IHC or TUNEL
Isoflurane	Shanghai Yuyan Scientific Instrument Company	S10010533	For gas anesthesia
neutral resins	bioswamp	PAB180017	For HE stain IHC or TUNEL
Paraformaldehyde Fix Solution	Sigma-Aldrich	100496	For histology
PBS	Sigma-Aldrich	P3813	For HE stain IHC or TUNEL
Plantar Test Apparatus	IITC Life Science	/	For Paw Withdrawal Latency test
plaster of Paris bandage	WANDE	20150023	For model making
Proteinase K	Sigma-Aldrich	124568	For HE stain IHC or TUNEL
TNF Alpha Monoclonal antibody	Proteintech	60291-1-Ig	For HE stain IHC or TUNEL
TUNEL	Servicebio	GDP1042	For HE stain IHC or TUNEL
Wax	Sigma-Aldrich	327204	For making specimen
xylene	Shanghai Sinopharm Group	100092	For making specimen