Tuina manipulasjon for å redusere betennelse og brusk tap i kneet slitasjegikt rotter
Summary
Vi presenterer en protokoll for Tuina-manipulasjon utført på gips-immobilisert-induserte kneartroserotter. Basert på de foreløpige resultatene, antydet det at effekten av metoden stod på reduksjon av betennelse og brusktap.
Abstract
Kliniske studier tyder på at Tuina manipulasjon er effektiv i behandling av knet artrose (KOA), mens videre studier er nødvendig for å oppdage mekanismen. Derfor er manipulering av dyremodeller av knet artrose kritisk. Denne protokollen gir en standardprosess for Tuina-manipulering på KOA-rotter og en foreløpig utforskning av Tuina-mekanismen for KOA. Press- og eltemanipulasjonsmetoden (en slags Tuina-manipulasjon som refererer til å trykke og elte det spesifikke området av kroppsoverflaten) påføres på 5 akupunkter rundt kneleddet av rotter. Kraften og frekvensen av manipulasjonen ble standardisert ved fingertrykkopptak, og rottens posisjon under manipulering er beskrevet i detalj i protokollen. Effekten av manipulasjon kan måles ved smerteatferdstester og mikroskopiske funn ved synovial og brusk. KOA-rotter viste signifikant forbedring i smerteadferd. Synovialvevsinfiltrasjonen var redusert i Tuinagruppen, og uttrykket av tumornekrosefaktor (TNF)-α var signifikant lavere. Sammenlignet med kontrollgruppen var kondrocyttapoptose mindre i Tuinagruppen. Denne studien gir en standardisert protokoll for Tuina-manipulering på KOA-rotter og foreløpig bevis på at de terapeutiske effektene av Tuina kan være relatert til å redusere synovial betennelse og forsinket kondrocyttapoptose.
Introduction
Knet artrose (KOA) er en degenerativ sykdom hovedsakelig manifestert i leddsmerter. Fibrose, sprekker, sårdannelse og tap av leddbrusk er hovedårsakene til denne sykdommen1. KOA har høy prevalens og kan resultere i en dyp innvirkning på pasientens daglige liv, forårsaker funksjonshemming i alvorlige tilfeller. Blant personer i alderen 45-84 år øker forekomsten av KOA med alderen, og forekomsten blant personer i alderen 85 år og over er 15%, med en overvekt hos kvinner 2,3. I tillegg kan KOA medføre en alvorlig økonomisk belastning for både individet og samfunnet. En undersøkelse viste at direkte helsekostnader på KOA per innbygger nådde opp til $ 8,858 ± $ 5,120 per år4. Med aldringen av samfunnet har KOA blitt et verdensomspennende helseproblem og et stort sosialt problem, samt et aktuelt problem for vitenskapelig forskning.
Evidensbaserte studier har vist effektiviteten av Tuina-manipulasjon ved behandling av KOA5. Tuina-manipulasjon kan lindre smerte og forbedre dysfunksjon hos KOA-pasienter, hvis mekanisme er relatert til antiinflammatoriske effekter 6,7. Forskere fant at Tuina-manipulasjon effektivt hemmet uttrykket av inflammatoriske faktorer interleukin (IL) -β og 5-hydroksytryptamin og reduserte degenerasjonen av leddbrusk i en kanin KOA modell8. Det antydet at Tuina kunne fremme blodsirkulasjon og metabolisme på lesjonsstedet, noe som bidro til å fjerne inflammatoriske faktorer som IL-1, IL-6 og tumornekrosefaktor (TNF) -α, og dermed lindre de kliniske symptomene på KOA9. I tillegg kan passiv bevegelse av leddet gjennom Tuina-manipulasjon fremme penetrasjon og diffusjon av synovialvæske i leddbrusk og forbedrer vevets næringsstoffskifte10. Andre studier antydet at Tuina-manipulering effektivt kan forbedre de biomekaniske indeksene hos KOA-pasienter11. Manipulasjoner brukt på bløtvev kan forbedre stressfordelingen over lemmer og forbedre balansefunksjonen12,13. Samtidig, med noen leddjusteringsmanipulasjoner, kan justeringen av underekstremitetene også justeres for å korrigere unormale gangarter14,15.
Virkningsmekanismen for Tuina-manipulasjon ved behandling av KOA gjenstår å bli utforsket, og derfor er det nødvendig med en eksperimentell studie. Nøkkelen til anvendelsen av Tuina i forsøksdyr er standardisering av modellering, dyrefiksering og intervensjonsmetoder16. Modelleringsmetoden bestemmer om forsøksdyret kan utvise sykdommens egenskaper. I mellomtiden kan passende fikseringsmetoder lette inngrepet av Tuina-manipulasjonen og bedre reflektere effekten av Tuina. Standardiseringen av intervensjonsmetoder er den vanskeligste delen av Tuina-manipulasjon. I 2010 nevnte det grunnleggende systemet med kinesiske akupunkturstandarder akupunkturpunktstandardene for forsøksdyr, noe som gir mulighet for akupunktur- og Tuina-operasjoner i dyreforsøk17. Imidlertid er det fortsatt vanskeligheter med å standardisere Tuina-manipulasjon. Det finnes flere typer Tuina-manipulasjon18. Valget av den spesifikke manipulasjonen avhenger hovedsakelig av sykdommen som skal behandles og de terapeutiske teoriene utøveren foretrekker. I studien av Tuina for KOA har mer oppmerksomhet blitt gitt til punkttrykkmanipulasjonen (trykke på de spesifikke akupunktene med tommelen eller albuen), Yizhichan skyve manipulasjon (en skyvemanipulasjon ved å vri på tommelen), og trykk og eltemanipulasjon (som refererer til å trykke og elte det spesifikke området av kroppsoverflaten med finger eller håndflate)19. Presse- og eltemanipulasjon er en av de mest brukte Tuina-manipulasjonene, som kombinerer pressing og æltning for å bevege det subkutane vevet20. Presse- og eltemanipulasjon brukt på akupunkter kan fremme blodsirkulasjonen og lindre smerte og representerer den terapeutiske effekten av Tuina på KOA19.
I denne protokollen vil operasjonen av presse- og eltemanipulasjon på KOA-rotter bli beskrevet i detalj, inkludert utvalgte akupunkter, intensitet og hyppighet av manipulasjonen og rottens kroppsposisjon, for å gi en referanse for fremtidig forskning.
Protocol
Representative Results
Discussion
Denne studien gir en protokoll for Tuina-manipulering på KOA-rotter. Gjennom smerteadferdstester og histomorfologiske funn foreslo det at en slik serie Tuina-manipulasjon brukt på KOA-rotter kunne redusere synovial betennelse og bruskaboptose, noe som kunne være en referanse til Tuina-manipulasjon på dyremodeller av KOA.
Det er flere kritiske prosedyrer under protokollen. For det første er det viktig å velge en passende metode for å indusere KOA-modellen. Det finnes ulike metoder for å…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dette arbeidet ble støttet av Shanghai Critical Clinical Specialties Construction Project (tilskuddsnummer: Shslczdzk04001); seilingsprogrammet til Shanghai Science and Technology Commission (tilskuddsnummer: 22YF1444300); Prosjekter innenfor budsjettet til Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (Grant Number: 2021LK091).
Materials
| absolute ethanol | Supelco | PHR1070 | For making specimen |
| ALMEMO admeasuring apparatus | ahlborn | 2450-1 | For Mechanical Withdrawal Threshold test |
| Anti-Digoxin antibody | Sigma-Aldrich | SAB4200669 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Anti-IL-1 beta | abcam | ab283818 | For HE stain IHC or TUNEL |
| DAB Substrate kit | Solarbio | DA1010 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Denture base materials | Shanghai New Century | 20000356 | For model making |
| eosin | bioswamp | PAB180016 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Finger pressure recordings | Suzhou Changxian Optoelectronic Technology | CX1003w | For Tuina manipulation |
| formic acid solution | Sigma-Aldrich | 695076 | For decalcification |
| H2O2 | Sigma-Aldrich | 386790-M | For HE stain IHC or TUNEL |
| hematoxylin | bioswamp | PAB180015 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Isoflurane | Shanghai Yuyan Scientific Instrument Company | S10010533 | For gas anesthesia |
| neutral resins | bioswamp | PAB180017 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Paraformaldehyde Fix Solution | Sigma-Aldrich | 100496 | For histology |
| PBS | Sigma-Aldrich | P3813 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Plantar Test Apparatus | IITC Life Science | / | For Paw Withdrawal Latency test |
| plaster of Paris bandage | WANDE | 20150023 | For model making |
| Proteinase K | Sigma-Aldrich | 124568 | For HE stain IHC or TUNEL |
| TNF Alpha Monoclonal antibody | Proteintech | 60291-1-Ig | For HE stain IHC or TUNEL |
| TUNEL | Servicebio | GDP1042 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Wax | Sigma-Aldrich | 327204 | For making specimen |
| xylene | Shanghai Sinopharm Group | 100092 | For making specimen |
References
- Joint Surgery Group of Chinese Orthopaedic Association, Chinese Association of Orthopaedic Surgeons, National Clinical Research Center for Geriatric Diseases, Chinese Journal of Orthopaedics. Chinese Osteoarthritis Treatment Guidelines (2021 Edition). Chinese Journal of Orthopaedics. 41 (18), 24 (2021).
- David, S., et al. Epidemiology of knee osteoarthritis in general practice: a registry-based study. BMJ Open. 10 (1), 031734 (2020).
- Callahan, L. F., Cleveland, R. J., Allen, K. D., Golightly, Y. Racial/Ethnic, Socioeconomic, and Geographic Disparities in the Epidemiology of Knee and Hip Osteoarthritis. Rheumatic Disease Clinics of North America. 47 (1), 1-20 (2021).
- Wang, K., Dong, X., Lin, J. H. Investigation of Medical Costs of Disease In Patients With Osteoarthritis of the Knee Joint. National Medical Journal of China. 97 (1), 4 (2017).
- Perlman, A., et al. Efficacy and Safety of Massage for Osteoarthritis of the Knee: a Randomized Clinical Trial. Journal of General Internal Medicine. 34 (3), 379-386 (2019).
- Xing, H., et al. Therapeutic massage for knee osteoarthritis: a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Journal of Acupuncture and Tuina Science. 19 (5), 354-363 (2021).
- Seo, B. R., et al. Skeletal muscle regeneration with robotic actuation-mediated clearance of neutrophils. Science translational medicine. 13 (614), (2021).
- Wu, J. H., Zhang, C., Dong, S. J., Yin, H. Effects of Massage with #34;Relaxing Tendons" Technique on the Interleukin-1B and 5-hydroxytryptamine Levels in the Joint Fluid of a Rabbit Knee Osteoarthritis Model. Chinese General Practice. 21 (6), 688-693 (2018).
- Luo, R. The effects of IL-1B,IL-6,IL-13,IL-26,TNF-a by patellar manipulations on rabbit knee osteoarthritis model. Guangxi University of Traditional Chinese Medicine. , (2017).
- Qiu, F., Li, C., Wu, X., Liu, Y., Zhang, X. Effect of Massage on the Function of Foot-Yangming Meridian-Muscle in Patients with Knee Osteoarthritis. Acta Chinese Medicine. 36 (3), 649-655 (2021).
- Yang, B., Li, S. Research Progress of Massage in Improving Biomechanical Indexes of Knee Osteoarthritis. Acta Chinese Medicine. 37 (12), 2571-2576 (2022).
- Li, C., Qiu, F., Ding, J., Hu, G., Zhang, X. Curative Observation of Retaining of Heated Needle at Trigger Points Combined with Manipulation for Muscles along Meridians in Treating Knee Osteoarthritis. Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine. 37 (11), 2157-2162 (2020).
- Ding, X., Zhang, X., Hou, Y., Zhao, Z., Ye, X. Effect of massage manipulation on joint stiffness of knee osteoarthritis patients based on "spine-pelvis-knee" holistic diagnosis and treatment pattern. Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine. 55 (08), 54-57 (2021).
- Fu, Y., Gong, L., Li, Y. The clinical studies of Rolling combined with Pulling Manipulation on Early and Middle-term. Jilin Journal of Chinese Medicine. 40 (07), 958-962 (2020).
- Jiang, J., Hu, X., Tang, R., Qiu, F., Huang, L. Change of lower limb force line in treating knee osteoarthritis with manipulation. Journal of Changchun University of Chinese Medicine. 34 (01), 129-132 (2018).
- Liang, Y., et al. Some issues on animal experiments standardization of acupuncture and moxibustion. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research. 25 (09), 2299-2300 (2014).
- Guo, Y., Liu, Y., Liu, Q., Chen, Z., Zhao, X. Basic System of Chinese Acupuncture Standard. Chinese Acupuncture & Moxibustion. 31 (6), 549-550 (2011).
- YAN, X., Yan, J. Study on the Standardization of Classification of Tuina Manipulation. Acta Chinese Medicine. 32 (5), 875-878 (2017).
- Aikebaier, G., Lu, X., Liu, J., Liu, l., Wang, S. Analysis on Manipulation and Acupoint Selection Laws of Massage for Treatment of Knee Osteoarthritis Based on Data Mining Technology. Chinese Journal of Information on Traditional Chinese Medicine. 29 (5), 23-29 (2022).
- Gong, L., Wuquan, S., Zhang, H., Chen, Z. Research of Yan Juntao’s Academic Experiences of Differential Treatment and Manipulation for Treating of Knee Osteoarthritis. Chinese Journal of Traditional Medical Traumatology & Orthopedics. 24 (7), 16-19 (2016).
- Qian, J., Xing, X., Liang, J. Two Methods to Establish Rat Model of Osteoarthritis of the Knee. Research and Exploration in Laboratory. 33 (11), 23-27 (2014).
- Liu, J., et al. Experimental study of a modified Videman method for replicating knee osteoarthritis on rabbit. Rehabilitation Medicine. 30 (03), 212-219 (2020).
- Moskowitz, R. W. Osteoarthritis cartilage histopathology: grading and staging. Osteoarthritis and Cartilage. 14 (1), 1-2 (2005).
- Shen, M., Li, Z., Shen, J. Preliminary Exploration of Experiment Teaching on Experiment Acupuncture Science. Chinese Medicine Modern Distance Education of China. 7 (02), 130-131 (2009).
- Jeong, J., et al. Anti-osteoarthritic effects of ChondroT in a rat model of collagenase-induced osteoarthritis. BMC complementary and alternative medicine. 18 (1), 131 (2018).
- Hulth, A., Lindberg, L., Telhag, H. Experimental osteoarthritis in rabbits. Preliminary report. Acta orthopaedica Scandinavica. 41 (5), 522-530 (1970).
- Tawonsawatruk, T., Sriwatananukulkit, O., Himakhun, W., Hemstapat, W. Comparison of pain behaviour and osteoarthritis progression between anterior cruciate ligament transection and osteochondral injury in rat models. Bone & Joint Research. 7 (3), 244-251 (2018).
- Zhou, Q., et al. Cartilage matrix changes in contralateral mobile knees in a rabbit model of osteoarthritis induced by immobilization. BMC musculoskeletal disorders. 16, 224 (2015).
- Zeng, J., et al. Establishment and identification of experimental rabbit model of knee osteoarthritis. Chinese Journal of Clinical Research. 29 (5), 679-682 (2016).
- Shang, P., et al. Comparison with two kind osteoarthritis animal models reduced by plaster immobilization in extend excessive position and bend excessive position respectively. Orthopaedic Biomechanics Materials and Clinical Study. (1), 11-14 (2006).
- He, Y., et al. Evaluation of the effect of improved cast immobilization method on rabbit knee osteoarthritis model. Chinese Imaging Journal of Integrated Traditional and Western Medicine. 18 (2), 198-219 (2020).
- Pengfei, S., et al. Possible mechanism underlying analgesic effect of Tuina in rats may involve piezo mechanosensitive channels within dorsal root ganglia axon. Journal of Traditional Chinese Medicine. 38 (6), 834-841 (2018).
- Wang, Y. Mechanisms of Massage Mediating Chondrocyte Apoptosis in Knee Osteoarthritis Through Piezo 1/JAK2 Signaling Pathway. Shandong University of Traditional Chinese Medicine. , (2019).
- Liu, J. Effect of Massage on TLR4/MyD88 Signal Transduction Pathway in Rat Knee Osteoarthritis Model. Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine. , (2019).
- Yu, S., Zhou, J., Pang, X. Advances in induced animal models of knee osteoarthritis. Journal of Guangxi University of Chinese Medicine. 25 (5), 50-55 (2022).
- Tan, Q., et al. Acupuncture combined with moxibustion regulates the expression of circadian clock protein in the synovium of rats with osteoarthritis. Chinese Journal of Tissue Engineering Research. 26 (11), 1714-1719 (2022).
- Zhang, Z., et al. A Review of Massage Therapy for Knee Osteoarthritis. Henan Traditional Chinese Medicine. 39 (1), 146-149 (2019).
- Gong, L., Sun, W., Zhang, H., Chen, Z. Research of Yan Juntao’s Academic Experiences of Differential Treatment and Manipulation for Treating of Knee Osteoarthritis. Chinese Journal of Traditional Medical Traumatology & Orthopedics. 24 (7), 16-19 (2016).
- Chen, C., Zhang, H. Research on the rules of acupoint selection for the treatment of knee osteoarthritis with massage based on data mining. Hainan Medical Journal. 29 (18), 2617-2619 (2018).
