Summary
En este video y ensayo se ha demostrado que las pruebas de la tolerancia de la nicotina a dos tipos de pulgones que infesta las plantas de tabaco en el campo y que no lo hace.
Abstract
Las plantas pueden regular al alza la producción de muchos metabolitos seconday diferentes en respuesta a la alimentación de los insectos. Uno de estos metabolitos, la nicotina, es bien sabido que tiene propiedades insecticidas. Una de las respuestas de las plantas de tabaco a la herbivoría, o se mordían a los insectos, es aumentar la producción de este alcaloide neurotóxico. Aquí, vamos a demostrar cómo configurar un experimento para responder a esta pregunta de si un tabaco adaptado cepa del áfido verde del duraznero, Myzus persicae, pueden tolerar niveles más altos de nicotina que la cepa A de este insecto que no tabaco infestan en el campo.
Protocol
En este experimento, 4 pulgones adultos están encerrados en un pequeño vaso de plástico. Se alimentan de una dieta líquida pipeta entre dos capas de parafina se extendía sobre la parte superior de la copa. Después de 3 días de alimentación, la toxicidad de las dietas que contienen diferentes concentraciones de nicotina en comparación con el control de las dietas, contando adultos y larvas de áfidos en cada taza.
- Que las soluciones que contienen sacarosa y 20 aminoácidos. Los áfidos pueden subsistir en esta dieta, a reproducirse a los niveles normales, por lo menos durante una semana. Por favor, vea el archivo adjunto para la alimentación artificial.
- Alícuota de 1 ml de esta dieta en 6 diferentes tubos Eppendorf que contienen nicotina. Etiqueta con respecto a varias concentraciones de nicotina utilizados, que van desde 0-500μM.
- Seleccione 4 pulgones, ya sea rojo o verde, y puso en estas copas experimental.
- Al seleccionar los áfidos, es importante que sean de edad consistente. Por lo general, buscar áfidos de similar tamaño y color (los pulgones rojos se oscurecen cuando son mayores).
- Cubra el recipiente con un trozo de parafilm. Incluya la dieta entre 2 piezas de parafina. Parcialmente estirar el nivel de parafina segundo alrededor de los bordes de la copa. Alícuota de la dieta de líquidos entre las capas, y sellar la capa de arriba hacia abajo.
- Mantener estos vasos en la sala de insectos bajo las luces en un fotoperíodo de día largo por 3 días, tras lo cual los datos del experimento se pueden recoger.
Por favor, visite las revisiones anuales de Biología Vegetal para obtener más información acerca de este protocolo y la inmunidad de plantas a la herbivoría de insectos.
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