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Biology

Separação eletroforética de proteínas

doi: 10.3791/758 Published: June 12, 2008

Summary

Neste vídeo, demonstramos um método para separação eletroforética de proteínas usando poli-acrylimide eletroforese em gel (PAGE).

Abstract

Eletroforese é usada para separar misturas complexas de proteínas (por exemplo, a partir de células, frações subcelulares, frações da coluna, ou imunoprecipitados), para investigar composições subunidade, e para verificar a homogeneidade das amostras de proteína. Ele também pode servir para purificar proteínas para uso em outras aplicações. Eletroforese em gel de poliacrilamida, as proteínas migram em resposta a um campo elétrico através de poros em uma matriz de gel de poliacrilamida; tamanho dos poros diminui com a concentração de acrilamida crescente. A combinação de tamanho dos poros e carga de proteína, tamanho e forma determina a taxa de migração da proteína. Nesta unidade, o método de Laemmli padrão é descrito por eletroforese em gel descontínua em condições de desnaturação, ou seja, na presença de dodecil sulfato de sódio (SDS).

Protocol

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O protocolo de texto completo para essa abordagem experimental está disponível em protocolos atuais em Biologia Molecular .

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Separação eletroforética de proteínas
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Chakavarti, B., Chakavarti, D. Electrophoretic Separation of Proteins. J. Vis. Exp. (16), e758, doi:10.3791/758 (2008).More

Chakavarti, B., Chakavarti, D. Electrophoretic Separation of Proteins. J. Vis. Exp. (16), e758, doi:10.3791/758 (2008).

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