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Biology

Séparation électrophorétique de protéines

doi: 10.3791/758 Published: June 12, 2008

Summary

Dans cette vidéo, nous démontrons une méthode pour la séparation électrophorétique des protéines par électrophorèse sur gel de poly-acrylimide (PAGE).

Abstract

L'électrophorèse est utilisée pour séparer des mélanges complexes de protéines (par exemple, à partir des cellules, fractions subcellulaires, fractions de colonne, ou immunoprécipités), pour enquêter sur des compositions sous-unité, et de vérifier l'homogénéité des échantillons de protéines. Il peut également servir à purifier des protéines pour des applications supplémentaires. En électrophorèse sur gel de polyacrylamide, les protéines migrent en réponse à un champ électrique à travers les pores dans une matrice de gel de polyacrylamide, la taille des pores décroît avec la concentration d'acrylamide augmente. La combinaison de la taille des pores et chargé en protéines, la taille et la forme détermine le taux de migration de la protéine. Dans cette unité, la méthode standard Laemmli est décrite pour l'électrophorèse sur gel discontinu dans des conditions dénaturantes, c'est à dire, en présence de dodécylsulfate de sodium (SDS).

Protocol

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Le protocole texte complet de cette approche expérimentale est disponible en Current Protocols in Molecular Biology .

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Séparation électrophorétique de protéines
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Chakavarti, B., Chakavarti, D. Electrophoretic Separation of Proteins. J. Vis. Exp. (16), e758, doi:10.3791/758 (2008).More

Chakavarti, B., Chakavarti, D. Electrophoretic Separation of Proteins. J. Vis. Exp. (16), e758, doi:10.3791/758 (2008).

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