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Biology

Separazione elettroforetica delle proteine

doi: 10.3791/758 Published: June 12, 2008

Summary

In questo video, si dimostra un metodo per la separazione elettroforetica di proteine ​​mediante poli-acrylimide elettroforesi su gel (PAG).

Abstract

Elettroforesi viene utilizzata per separare miscele complesse di proteine ​​(per esempio, dalle cellule, frazioni subcellulari, frazioni colonna o immunoprecipitati), per indagare composizioni subunità, e per verificare l'omogeneità dei campioni di proteine. Può anche servire a purificare le proteine ​​per l'uso in altre applicazioni. Elettroforesi in gel di poliacrilamide, proteine ​​migrano in risposta ad un campo elettrico attraverso i pori in una matrice di gel di poliacrilammide; dimensione dei pori diminuisce con l'aumentare la concentrazione di acrilamide. La combinazione di dimensione dei pori e la carica di proteine, le dimensioni e la forma determina il tasso di migrazione della proteina. In questa unità, il metodo standard Laemmli è descritto per elettroforesi su gel discontinuo in condizioni di denaturazione, cioè, in presenza di sodio dodecil solfato (SDS).

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Il protocollo testo completo di questo approccio sperimentale è disponibile in protocolli di corrente in Biologia Molecolare .

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Separazione elettroforetica delle proteine
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Chakavarti, B., Chakavarti, D. Electrophoretic Separation of Proteins. J. Vis. Exp. (16), e758, doi:10.3791/758 (2008).More

Chakavarti, B., Chakavarti, D. Electrophoretic Separation of Proteins. J. Vis. Exp. (16), e758, doi:10.3791/758 (2008).

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