Topo Epidermal cresta neurale delle cellule staminali (EPI-NCSC) Culture
Summary
Qui mostriamo il nostro metodo per isolare il mouse epidermiche cresta neurale delle cellule staminali (EPI-NCSC). Tecnica prevede micro-dissezione follicoli baffi, isolando il rigonfiamento e placeing in colture di tessuti. EPI-NCSC iniziano a emigrare da espianti rigonfiamento sul substrato entro 3 – 4 giorni.
Abstract
EPI-NCSC sono i resti della cresta neurale embrionale in una posizione adulta, il rigonfiamento dei follicoli piliferi. Si tratta di cellule staminali multipotenti che hanno la proprietà fisiologiche di generare una vasta gamma di tipi di cellule differenziate, tra i neuroni, cellule nervose di supporto, le cellule muscolari lisce, osso / le cellule della cartilagine e melanociti. EPI-NCSC sono facilmente accessibili nella pelle pelosa e può essere isolato come una popolazione altamente pura di cellule staminali. Questo video fornisce un protocollo dettagliato per la preparazione del mouse EPI-NCSC culture dai follicoli dei baffi. Il pad baffi di un topo adulto viene rimosso, e follicoli baffi sezionato. I follicoli vengono quindi tagliati longitudinalmente e poi trasversalmente sopra e sotto la regione di rigonfiamento. Il rigonfiamento viene rimosso dalla capsula collagene e posto in una piastra di coltura. EPI-NCSC cominciano a emigrare dal espianti rigonfiamento 3 o 4 giorni dopo.
Protocol
Discussion
In virtù della loro capacità migratorie, l'EPI-NCSC può essere isolata come una popolazione altamente pura di cellule staminali, che possono essere espanse in vitro. Come resti embrionale in una posizione adulta, l'EPI-NCSC sono candidati potenzialmente interessanti per future terapie di sostituzione cellulare, ingegneria biomedica e / o medicina rigenerativa. Abbiamo testato EPI-NCSC in un modello murino di lesioni del midollo spinale, dove si mostrano i tratti desiderabili. Attraverso profili di espressione genica LongSAGE (www…
Acknowledgements
Supportato da: USPHS concedere NS38500, Istituto nazionale dei disordini neurologici e colpo, NIH, USA; Alleanza Tecnologie Biomediche del Sudest Wisconsin, Milwauke, WI, USA; Bryon Riesch Paralisi Fondazione, Milwaukee, WI, USA; confraternita delle aquile, Midwest capitolo , USA; Nazionale Spinal Cord Injury Association, Milwaukee capitolo, Stati Uniti, North East England Stem Cell Institute di Newcastle University, UK.
References
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