Name: E15 Fare Embriyolar Utero İntraventriküler Enjeksiyon ve Elektroporasyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 26 min 17 s
Description: Keşfedin E15 fare embriyolarına uterus içi enjeksiyon ve elektroporasyon tekniklerini. Plazmid DNA enjeksiyonu ile gelişen beyin dokularında gen manipülasyonu yaparak nörogelişim araştırmalarında kullanın.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarların beyan edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

e15 fare embriyolar utero İntraventriküler enjeksiyon ve elektroporasyon

In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E15 Mouse Embryos

In-vivo-utero embriyonik fare neokorteks enjeksiyon ve elektroporasyon lateral ventrikül duvarlarıyla bireysel atalarıdır manipülasyon için güçlü bir araç sağlar. Bu teknik, şu anda yaygın olarak aşırı eksprese veya genlerin aşağı vurma ve hücresel proliferasyon, göç, ve farklılaşması üzerine etkileri gözlemlemek corticogenesis yer süreçlerini incelemek için kullanılır. Geleneksel nakavt stratejileri ile karşılaştırıldığında, in-utero elektroporasyon belirli bir zaman penceresi sırasında hücre bir nüfus işlemek için hızlı bir yöntem sağlar. Bu video protokolü, fareler ameliyat için hazırlanıyor laporatomy yoluyla rahim boynuzları açığa, gelişmekte olan embriyonun lateral ventriküller içine DNA enjekte lateral duvarını kaplayan atalarıdır içine DNA electroporating ve hayvanlar ameliyat sonrası bakım için deneysel bir metodoloji . Bu videoda gösterildiği gibi laboratuvar E13-E16 fareler üzerinde ameliyatları için bu protokolü kullanır, ancak, en sık, E15 yapılır.

E15 Fare Embriyolar Utero İntraventriküler Enjeksiyon ve Elektroporasyon

Embriyonik fare neokorteksinin in-utero in-vivo enjeksiyonu ve elektroporasyonu, bireysel progenitorlerin manipülasyonu için güçlü bir araç sağlar...

Merhaba, ben Krete Laboratuvarı'ndan William Tis. Bugün, ben ve diğer arkadaşlarımla birlikte size E 15 fare embriyolarına yapılan intrauterin enjeksiyonları göstereceğiz. Merhaba, benim adım Laura Elias.Bugün size, gerçekleştireceğimiz intraventriküler enjeksiyonlar ve elektroporasyon için mikroenjeksiyon pipetlerinin nasıl hazırlanacağını ve yükleneceğini göstereceğim. Benim adım David Castaneda ve bugün fare embriyolarına yapılacak in vivo in utero enjeksiyonlarda yardımcı olacağım. Gelişmekte olan fare embriyolarının lateral ventrikülüne plazmid DNA enjekte edeceğiz.Gelişimin ilerleyen aşamalarında nöronlara dönüşecek olan glial hücreler tarafından farklı moleküllerin ekspresyonunu elde etmek amacıyla, bu embriyoların CE korteksini hedefliyoruz. Bu intrauterin enjeksiyonları yaparken kullanmanız gereken birkaç önemli araç bulunmaktadır ve bunları şimdi size göstereceğim. Bir freer ve bir çift ince uçlu pens kullanıyoruz.Biri tırtıklı, diğeri ise ucunda küçük bir diş bulunan iki çift makas. Bir çift hemostat kullanıyoruz. Bu ise bir makas çiftidir.Ardından bu iki zımbayı kullanıyoruz. Büyük olanı sıçanlar için, küçük olanı ise fareler için kullanmaktayız.Yedi numara zımba kullan

in-utero-intraventricular-injection-electroporation-e15-mouse

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

E16 Rat Embriyolar Utero İntraventriküler Enjeksiyon ve Elektroporasyon

Utero sağkalım cerrahisinde farelerde gen ekspresyonu gelişimi sırasında moleküler manipülasyon izin verir. Burada, yüksek frekanslı ultrason görüntüleme embriyonik gün fare beyin (E) 9.5 retroviral vektörlerin enjeksiyon kılavuzunu kullanımı açıklanmaktadır.

Fare önbeyin içine Ultrason Rehberliğinde Mikroenjeksiyon In Utero E9.5 az

Utero elektroporasyon gelişmekte olan merkezi sinir sistemi (MSS) bir mekansal ve zamansal olarak kontrollü bir şekilde hızlı bir gen teslimat için izin verir. Burada son derece uyarlanabilir tarif telencephalon diensefalon ve retina da dahil olmak üzere birden fazla embriyonik MSS etki alanı ifade yapıları sunmak için kullanılabilir utero elektroporasyon protokol.

Verimli kullanarak birden çok CNS Topraklar&#39;da Gen Teslimat In Utero Elektroporasyon

Gelişmekte olan fare beyninin içine bir gen transferi yöntemi eşsiz bir cerrahi yöntem ve elektrotlar özel şekli ile tarif edilir. Bu benzersiz tekniği, beyin gelişimi okuyan birçok Nörobilimadamları yardımcı olacak zamansal ve mekansal plazmid DNA transfeksiyon sağlar.

Fare Utero Elektroporasyon: Kontrollü Spatiotemporal Gen Transfeksiyon

Somatik kök hücre genişleme kontrolü kendi çalışma ve tedavide kullanımı engelleyen önemli bir faktördür. Burada geçici olarak fare beyin üretilen nöron sayısını artırmak için kullanılabilir geliştirme ve yetişkinlik döneminde nöral kök hücrelerinin genişlemesi, kontrol etmek için bir sistemi tanımlamak.

Tarafından Embriyonik ve Erişkin Nöral Kök Hücre Genişletme<em&gt; In Utero</em&gt; Elektroporasyon veya Viral Stereotaksik Enjeksiyon

Bu video, plazmid DNA'nın in utero elektroporasyon kullanılarak murin embriyolarının serebellar nöronal hücrelerine verilmesini göstermektedir. Bu yöntem, normal beyin gelişiminde genlerin in vivo fonksiyonunu ve tümör ilerlemesi sırasında nöron hücrelerinin gen ekspresyonundaki değişiklikleri anlamak için yararlıdır.

In Utero Elektroporasyona Dayalı Gen Dağıtımı: Murin Embriyolarının Embriyonik Serebellar Hücrelerine Plazmid DNA Enjekte Etme Tekniği

Hipotalamusun fonksiyonel ve tıbbi önemine...

Fare Genetik Manipülasyon yoluyla Hipotalamus geliştirilmesi<em&gt; Utero olarak</em&gt; Elektroporasyon

Bu protokol, in utero elektroporasyon yoluyla C57BL/6 merkezi sinir sistemindeki farklı bölgelerin spesifik olarak nasıl transfekte edileceğini ayrıntılı olarak açıklar. Bu protokolde korteks, hipokampus, talamus, hipotalamus, lateral septal çekirdek ve striatuma dönüşen bölgelerin transfeksiyonları için ayrıntılı talimatlar bulunmaktadır.

Korteks, Hippocampus-, Thalamus-, Hypothalamus-, Lateral Septal Nucleus- ve Striatum özgü<em&gt; In Utero</em&gt; C57BL / 6 Fare Elektroporasyon

Uteros elektroporasyonda çift mekansal ve zamansal olarak ayrılmış hücre popülasyonları hedefleme sağlar. Bu teknik, bu hücre popülasyonları arasındaki etkileşimleri normal koşullarda floresan proteinler ihsallaştırmak için değil, aynı zamanda fonksiyonel deneylerden sonra ilgi genlerini tedirgin etmek için görselleştirmek için yararlıdır.

Geçici ve Mekansal Olarak Ayrılmış Hücre Popülasyonlarını Hedef lemek için Utero Elektroporasyonunda Çift

Bu protokolde, E7.5'teki fare amniyotik boşluğunun lentivirüs ile nasıl enjekte edileceğini açıklıyoruz, bu da tüm sinir plakasının düzgün bir şekilde transdüksiyonuna yol açarak, hayatta kalma veya embriyonik gelişim üzerinde minimum zararlı etkiye sahiptir.

Embriyonik Gün 7.5'te In Utero Nano-Enjeksiyon (NEPTÜN) ile Murin Nöral Plaka Hedefleme

Keşfedin E15 fare embriyolarına uterus içi enjeksiyon ve elektroporasyon tekniklerini. Plazmid DNA enjeksiyonu ile gelişen beyin dokularında gen manipülasyonu yaparak nörogelişim araştırmalarında kullanın.

E15 Fare Embriyolar Utero İntraventriküler Enjeksiyon ve Elektroporasyon

Daha fazla video keşfet