Monositlerin Lökosit Proliferasyonu Üzerindeki İmmünomodülatör Etkisini Değerlendirmek İçin Bir İn Vitro Test

0 views • 2:46 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yapışık mezenkimal kök hücre veya MSC kültürü ile çok kuyulu bir plaka alın.

Periferik kan mononükleer hücreleri veya PBMC'leri ekleyin ve inkübe edin.

MSC'ler hepatosit büyüme faktörü salgılar, monositlerin immünomodülatör bir fenotip kazanmasına neden olur ve interlökin-10 veya IL-10 üretir.

PBMC içeren süpernatanı bir tüpe aktarın.

Monosit yüzey işaretleyicisi CD14'e bağlanan antikor kaplı manyetik boncuklar ekleyin.

CD14+ monositlerini izole etmek için manyetik bir ayırıcı kullanın ve bunları artan konsantrasyonlarda çok kuyulu plaka kuyularına ekleyin.

Floresan boya CFSE etiketli efektör CD4 + T hücrelerini tanıtın.

Hücreleri aktive ederek özellikle T hücresi yüzey belirteçleri CD3 ve CD28'e bağlanan antikor konjuge mikro boncuklar ekleyin.

Kontrol kuyusu eksik monositlerde, aktive edilmiş T hücreleri çoğalır ve her hücre bölünmesi yavru hücrelerde CFSE floresan yoğunluğunu azaltır.

Bununla birlikte, ko-kültürlerde, MSC ile indüklenen monositler, efektör T hücresi proliferasyonunu baskılayarak IL-10 salgılar.

Akış sitometrisi kullanarak, artan monosit konsantrasyonları ile azalmış CFSE floresan yoğunlukları sergileyen daha az T hücresi gözlemleyin, bu da MSC'nin neden olduğu monositler tarafından efektör T hücresi proliferasyonunun baskılandığını gösterir.

Bir efektör baskılama testi gerçekleştirmek için, alt popülasyon seçimi için yeterli MSC ko-kültürlenmiş PBMC'leri sağlamak için 250.000 MSC ile birlikte kültürlenmiş 2,5 x 106 PBMC ile bir MSC-PBMC ko-kültürü kurarak başlayın.

37 santigrat derecede 48 ila 72 saat sonra, uygun manyetik boncuklarla ilgilenilen MSC'nin neden olduğu immünomodülatör lökositleri seçin. Daha sonra, çeşitli deneysel oranlarda oyuk başına 1 mililitre tam lökosit ortamında CFSE etiketli allojenik CD4 pozitif T hücreleri ekleyin.

Daha sonra, CD4 pozitif T hücrelerini uyarmak için 1'e 1 boncuk-hücre oranında anti-CD3 / 28-konjuge mikro boncuklar ekleyin. Ko-kültürün üçüncü gününde, CFSE etiketli CD4 pozitif T hücrelerinin proliferasyonunu akış sitometrisi ile değerlendirin.

11:05

Xeno-ücretsiz Koşullarda 3-D Kültürler Üretim ve Tedavi Mezenkimal Kök Yönetim / Stromal Cell (MSC) küremsi Astarlı

Related Videos

0 Views

12:04

Sitotoksik değerlendirilmesi ve insan hassas kesim akciğer dilimleri maddelerin etkileri Immunomodulatory

Related Videos

0 Views

12:42

Paramyxovirusler Immunomodulation tümör hedefli için: tasarım ve değerlendirme Ex Vivo

Related Videos

0 Views

05:16

Lenfosit Proliferasyonunu İndüklemek için Aşı Darbeli Dendritik Hücre Bazlı İn Vitro Test

Related Videos

0 Views

07:42

Bir In vitro Model

Related Videos

0 Views

09:26

Vitro Testi HIV-spesifik CD4 T hücre efektör işlevi üzerinde immünoregülatör yolları etkisini değerlendirmek için

Related Videos

0 Views

06:20

İnsan Mezenkimal Kök Hücre İmmünomodüler Properties (MKH) değerlendirilmesi

Related Videos

0 Views

08:13

Bağışıklık ilaçlarının tanımlanmasında T lenfositlerinde mitojen kaynaklı blastojenez hızlı bir şekilde belirlenmesini

Related Videos

0 Views

08:38

İnsan monosit kemotaksisi Vitro ve In Vivo kaçakçılığı fare lenfosit miktarının

Related Videos

0 Views

09:41

Miktar monosit hicret ve köpük hücre oluşumu kronik inflamatuar koşullara sahip bireylerden

Related Videos

0 Views

Last updated: 27 June 2026