JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 5:13 dk. • May 29th, 2025
Spinal motor nöronlarda bir floresan proteini ifade eden anestezi uygulanmış bir transgenik zebra balığı larvası içeren önceden ısıtılmış bir agaroz çözeltisi alın.
Larvaları agaroz halkalı bir cam kaba aktarın.
Bir mikroskop kullanarak larvaları yan tarafına çevirin. Ardından, larvaları hareketsiz hale getirerek agarozun katılaşmasına izin verin.
Anesteziyi sürdürmek için anestezik içeren tampon ekleyin.
Çanağı konfokal mikroskop aşamasına yerleştirin ve dorsal omurilik bölgesini bulmak için parlak alan görüntülemeyi kullanın.
Floresan motor nöronları görselleştirmek için floresan moduna geçin.
Hassas ablasyon hedeflemesi için hücre soma'sının merkezi z düzlemini belirleyin.
Foto hasarı en aza indirirken yüksek çözünürlüklü çekim için görüntüleme parametrelerini yapılandırın.
İstenen z düzlemi odaklandığında, odaklanmış bir ultraviyole lazer kullanarak hedef nöron bölgesinde ablasyon gerçekleştirin.
Lazer enerjisi hücresel yapıları bozarak floresan kaybına ve hücre ölümüne neden olur. Geri dönüşümsüz floresan kaybı, çevredeki hücreleri etkilemeden hassas ablasyonu doğrular.
Bir larva çekmek için ayarlanabilir bir pipet kullanın ve ucun dibine batmasına izin verin. Larvaları minimum mi
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin