-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

TR

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

tr_TR

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Immunology and Infection
Adenovirüs ile enfekte Normal İnsan Hücreleri Viral Çoğaltma Bölme zenginleştirilmiş Alt nükleer ...
Adenovirüs ile enfekte Normal İnsan Hücreleri Viral Çoğaltma Bölme zenginleştirilmiş Alt nükleer ...
JoVE Journal
Immunology and Infection
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Immunology and Infection
Isolation of Viral Replication Compartment-enriched Sub-nuclear Fractions from Adenovirus-infected Normal Human Cells

Adenovirüs ile enfekte Normal İnsan Hücreleri Viral Çoğaltma Bölme zenginleştirilmiş Alt nükleer Kesirler izolasyonu

Full Text
9,220 Views
10:22 min
November 12, 2015

DOI: 10.3791/53296-v

Paloma Hidalgo1,2, Ramón A. Gonzalez1

1Centro de Investigación en Dinámica Celular, Instituto de Investigación en Ciencias Básicas y Aplicadas,Universidad Autónoma del Estado de Morelos, 2Instituto de Biotecnologìa,Universidad Nacional Autónoma de México

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a novel strategy to isolate viral replication compartments from adenovirus-infected human cells. The method establishes a cell-free system that aids in understanding the molecular mechanisms of viral genome replication and host interactions.

Key Study Components

Area of Science

  • Virology
  • Cell Biology
  • Molecular Biology

Background

  • Replication compartments are crucial for viral genome replication.
  • Adenovirus serves as a model for studying DNA viruses.
  • Understanding viral-host interactions is essential for virology research.
  • Current methods for studying these compartments are limited.

Purpose of Study

  • To isolate replication compartments from adenovirus-infected cells.
  • To investigate the composition and structure of these compartments.
  • To explore the molecular mechanisms regulating viral replication and expression.

Methods Used

  • Infection of human foreskin fibroblasts with adenovirus type five.
  • Use of a velocity gradient to isolate nonnuclear fractions.
  • Analysis of the isolated compartments for structure and activity.
  • Study of viral-host interactions at the replication compartments.

Main Results

  • Successful isolation of replication compartments from infected cells.
  • Characterization of the composition and ultrastructure of these compartments.
  • Insights into the mechanisms of viral genome replication.
  • Enhanced understanding of viral-host cell interactions.

Conclusions

  • The method provides a simple approach for studying viral replication.
  • It opens avenues for further research in DNA virology.
  • Understanding these mechanisms could lead to better antiviral strategies.

Frequently Asked Questions

What is the main goal of this study?
The main goal is to isolate viral replication compartments from adenovirus-infected cells for detailed study.
Why is it important to study replication compartments?
Studying replication compartments helps elucidate the mechanisms of viral genome replication and host interactions.
What type of cells are used in this study?
Human foreskin fibroblasts are used for adenovirus infection in this study.
What method is employed to isolate the compartments?
A velocity gradient method is used to isolate nonnuclear fractions enriched with replication compartments.
What are the potential applications of this research?
This research could lead to advancements in understanding DNA virology and developing antiviral therapies.

Adenovirüs (Ad) ile enfekte olmuş insan hücrelerinden viral replikasyon kompartmanlarını (RC) izole etmek için yeni bir strateji sunuyoruz. Bu yaklaşım, viral genom replikasyonunu ve ekspresyonunu düzenleyen moleküler mekanizmaların yanı sıra RC'de kurulan viral-konak etkileşimlerinin düzenlenmesine yardımcı olabilecek hücresiz bir sistemi temsil eder.

Bu prosedürün genel amacı, adenovirüs ile enfekte olmuş hücrelerde oluşan replikasyon bölmeleri ile zenginleştirilmiş, bileşimlerinin, ultra yapılarının ve ilgili aktivitelerinin ayrıntılı olarak incelenmesi için nükleer olmayan bir fraksiyon elde etmektir. Bu yöntem, DNA virolojisi alanında, viral genom replikasyonunu kontrol eden moleküler mekanizmaların ve virüsün konak hücre etkileşimlerinin düzenlenmesi için replikasyon bölmelerine bağlı olan ekspresyonun incelenmesi gibi temel soruların ele alınmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, nükleer replikasyon yapan DNA virüslerinin enfekte hücreyi kontrol altına almasına izin veren mekanizmaların incelenmesine uygun hücresiz bir sistem kurmak için hız gradyanına dayalı basit bir prosedür olmasıdır.

Bu testi gerçekleştirmek için, ilk olarak, bir mililitre 85 ve DMM'yi 100 milimetre doku kültürü kaplarında enfekte etmeye başlamak için ekteki metin protokolünde açıklandığı gibi adenovirüs tip beş veya D beş ve insan sünnet derisi fibroblastlarını veya HFF'yi hazırlayın, hücre başına 30 odak oluşturan birim veya FFU'luk bir MOI'de hücreleri nemlendirilmiş bir hücre kültürü inkübatöründe iki saat inkübe edin 37 santigrat derece ve% 5 karbondioksitte. Virüs aşısının hücreler üzerinde homojen dağılımını sağlamak için bulaşıkları her 15 dakikada bir dikkatlice sallayın. İnkübasyondan sonra, ortamı çıkarın ve taze dmem ekleyin.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Enfeksiyon Sayı 105 DNA viral replikasyonu Bölmeler adenovirüs virüs-konak etkileşimleri nükleer yeniden düzenleme viral genomun replikasyonu viral gen ekspresyonu viral mikroçevrelerde.

Related Videos

İnfluenza A Viral ribonükleoprotein Kompleksleri saflaştırılması ve Görselleştirme

09:35

İnfluenza A Viral ribonükleoprotein Kompleksleri saflaştırılması ve Görselleştirme

Related Videos

13.5K Views

Konfokal Görüntüleme İzolasyon ve Yetişkin kardiyak miyositler Genetik Manipülasyon

12:15

Konfokal Görüntüleme İzolasyon ve Yetişkin kardiyak miyositler Genetik Manipülasyon

Related Videos

15.1K Views

Nucleocapsids gelen Viral DNA hazırlanması

12:45

Nucleocapsids gelen Viral DNA hazırlanması

Related Videos

21.7K Views

Enfekte Hücre Kromatin gelen Gribi ribonükleoprotein Komplekslerinin Affinity Arıtma

11:20

Enfekte Hücre Kromatin gelen Gribi ribonükleoprotein Komplekslerinin Affinity Arıtma

Related Videos

13.5K Views

Naif CD4 adenoviral İletimi Treg Farklılaşma Eğitim Hücreler T

15:33

Naif CD4 adenoviral İletimi Treg Farklılaşma Eğitim Hücreler T

Related Videos

16.5K Views

İnsan Adenovirüs Tip 5 dayanarak Yüksek Kapasiteli Adenoviral Vektörler klonlanması ve Büyük Ölçekli Üretim

13:17

İnsan Adenovirüs Tip 5 dayanarak Yüksek Kapasiteli Adenoviral Vektörler klonlanması ve Büyük Ölçekli Üretim

Related Videos

15.2K Views

Adenofection: tükenmesi-Kurtarma Experiments Hücresel Morphodynamics Moleküler şaperonlar Rolü incelenmesi için Bir Yöntem

12:34

Adenofection: tükenmesi-Kurtarma Experiments Hücresel Morphodynamics Moleküler şaperonlar Rolü incelenmesi için Bir Yöntem

Related Videos

8.1K Views

Adenovirüs Üretimi İçin Verimli Bir Yöntem

10:06

Adenovirüs Üretimi İçin Verimli Bir Yöntem

Related Videos

15.4K Views

İn Vivo Uygulamalar için İodiksanol Yoğunluk Gradyan Santrifüjü ile Adeno İlişkili Virüsün Süspansiyon Kültürü Üretimi ve Saflaştırılması

03:52

İn Vivo Uygulamalar için İodiksanol Yoğunluk Gradyan Santrifüjü ile Adeno İlişkili Virüsün Süspansiyon Kültürü Üretimi ve Saflaştırılması

Related Videos

4.1K Views

Adeno ile İlişkili Viral Vektörlerin Tek Adımlı ve Yarı Otomatik Heparin Afinite Kromatografisi Protokolü ile İzolasyonu

09:12

Adeno ile İlişkili Viral Vektörlerin Tek Adımlı ve Yarı Otomatik Heparin Afinite Kromatografisi Protokolü ile İzolasyonu

Related Videos

4.7K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code