Yalıtım ve nötrofil kaynaklı Microparticles karakterizasyonu için fonksiyonel çalışmalar

Bu protokolün genel amacı, fonksiyonel çalışmalar için nötrofil türevi mikropartikülleri izole etmek ve karakterize etmektir. Bu yöntem, kanser, iltihaplanma ve yara iyileşmesi dahil olmak üzere farklı fizyolojik süreçlerde hücre-hücre iletişiminde ekzo-hücre veziküllerinin veya mikropartiküllerin rolü hakkındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajları, nispeten hızlı, uygun maliyetli olması ve fonksiyonel varlıklardaki mikropartiküllerin veya mikro veziküllerin p'henotipik bileşiminin değerlemesine izin vermesidir.

Prosedürü göstermek, laboratuvarımda doktora sonrası bir araştırmacı olan Ariel Finkielsztein ve laboratuvarımda bir lisans öğrencisi olan Joseph Lee olacak. Murin kemik iliği polimorfonüberkül veya PMN hücrelerinin yoğunluk gradyanlı ayrılması için, önce üç mililitre taze hazırlanmış, oda sıcaklığında, mililitre başına 1.077 gram, üç mililitre taze hazırlanmış, oda sıcaklığında, mililitre başına 1.119 gram yoğunluk çözeltisi üzerinde yavaşça katmanlayın kemik iliği hücresi numuneleri başına 15 mililitrelik konik tüpte. Daha sonra, buz gibi soğuk PBS'de bir mililitre taze izole edilmiş kemik iliği hücresini her tüpün en üst yoğunluk gradyan katmanına yerleştirin ve hücreleri yoğunluk gradyan santrifüjlemesi ile ayırın.