Name: Tomurcuklanan mayada hücre döngüsüne bağlı süreçlerin manipülasyonu ve analizi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-26T14:10:00.000+00:00
Duration: 8 min 13 s
Description: Öğrenin, Saccharomyces cerevisiae'de alfa-faktör senkronizasyonu ile hücre döngüsü aşamalarında protein lokalizasyonunu floresan mikroskopiyle analiz etme yöntemini. Bu teknik, mitoz ve kromozom ayrışmasının moleküler mekanizmalarını incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>?-etken</td><td>Utah Üniversitesi Çekirdek Sentez Tesisi</td><td></td><td>Dizili: WHWLQLKPGQPMY</td></tr><tr><td>1.5 mL Eppendorf Tüpleri</td><td>Axygen</td><td>MCT-175-C</td><td></td></tr><tr><td>10mM dNTP karışımı</td><td>Termo Bilimsel</td><td>R0193</td><td></td></tr><tr><td>50 mL konik borular</td><td>Greiner Bio-One</td><td>227 261</td><td></td></tr><tr><td>5x Phusion HF reaksiyon tamponu</td><td>New England BioLabs</td><td>B0518S</td><td></td></tr><tr><td>Asetik Asit, Buzul</td><td>Fisher Chemical</td><td>BP2401C-212</td><td></td></tr><tr><td>Adenin hemisülfat tuzu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9126-100G</td><td></td></tr><tr><td>Agar, Granüllü</td><td>Apex Kimyasalları ve Reaktifleri</td><td>20-275</td><td></td></tr><tr><td>agaroz</td><td>Apex Bioresearch Ürünleri</td><td>20-102GP</td><td></td></tr><tr><td>Otoklav Amsco Yüzyıl Buharlı Sterilizatör</td><td>Steris</td><td>SV-1262</td><td></td></tr><tr><td>otoklavlanmış DI su</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Auxin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Cat#I3750-5G-A; CAS: 87-51-4</td><td></td></tr><tr><td>Cargille Lazer Sıvısı</td><td>Cargille Laboratuvarları</td><td>20130</td><td></td></tr><tr><td>D-Sorbitol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S1876-500G</td><td></td></tr><tr><td>DAPI (40, 6-Diamidino-2-Fenilindol, Dihidroklorür)</td><td>Moleküler Problar</td><td>Cat#D1306</td><td></td></tr><tr><td>Somon testislerinden alınan deoksiribonuklein asit sodyum tuzu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D1626</td><td></td></tr><tr><td>Dekstroz</td><td>Fisher Chemical</td><td>D16-10</td><td></td></tr><tr><td>Disodyum Etilendiamin Tetraasetat</td><td>Fisher Chemical</td><td>S811-10</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Termo Bilimsel</td><td>20688</td><td></td></tr><tr><td>FIJI/ImageJ2 vs 2.14.0/1.54f</td><td>ImageJ2</td><td>https://imagej.net/software/fiji/</td><td></td></tr><tr><td>Sabit Hızlı Vortex Mikser</td><td>VWR</td><td>https://dabos.com/product/vortex-mixers-vwr-fixed-speed-vortex-mixer-00001-24763?srsltid=AfmBOoo5TH0aoExvrrrphDaFt8XAsDqLvkjxtEUj1QWlFbWh7_gwzMObLT4&gQT=2</td><td></td></tr><tr><td>Floresan mikroskop DV Ultra</td><td>Leica</td><td>https://www.leica-microsystems.com/c/am/lsr-w/fluorescence-microscope-wf/?nlc=20250214-SFDC-022570&utm_source=google&utm_medium=cpc&utm_campaign=25-AM-LSR-L3-LSPO-LSWF-SE-Google-Ads-WF-Thunder-Search&utm_content=text_ad&utm_term=fluorescence%20microscopes&gad_source=1&gad_campaignid=170130111&gbraid=0AAAAADrbsAF-dGDbxzgT8m_cvXSlf4BB0&gclid=CjwKCAjwmenCBhA4EiwAtVjzmkMJUGFksaHezZvlBUlbbS1tR8RqXP24dbSRzcRgTT8RmJy7nyeThBoC3yQQAvD_BwE</td><td>Seri #: NV01063. Artık desteklenmiyor</td></tr><tr><td>Formaldehit</td><td>Fisher Chemical</td><td>Cat#F79-500</td><td></td></tr><tr><td>Jel Cihazı</td><td>Termo Bilimsel</td><td>Baykuş Kolay Döküm B1</td><td></td></tr><tr><td>GeneRuler DNA Merdiven Karışımı</td><td>Fermentalar</td><td>SM0333</td><td></td></tr><tr><td>cam boncuklar</td><td>Fisher Scientific</td><td>11312A</td><td></td></tr><tr><td>Cam Kaydıraklar</td><td>VWR</td><td>48300-026</td><td></td></tr><tr><td>Innova 2300 Platform Shaker</td><td>New Brunswick</td><td>NB-2300</td><td></td></tr><tr><td>Kimwipe</td><td>Kimtech</td><td>06-666</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL tüpler için laboratuvar santrifüj</td><td>Eppendorf</td><td>2525</td><td></td></tr><tr><td>50 mL tüpler için laboratuvar santrifüj</td><td>Eppendorf</td><td>5804</td><td></td></tr><tr><td>Lityum asetat dihidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L4158-250G</td><td></td></tr><tr><td>Master cycler nexus X2</td><td>Eppendorf</td><td>https://www.eppendorf.com/us-en/Products/PCR/Thermocyclers/Mastercycler-nexus-X2-p-PF-82586</td><td></td></tr><tr><td>Mikro-pipetler p2, p20, p200 ve p1000 ile ilgili uçlar</td><td>Rainin</td><td>L-2XLS+R, L-20XLS-R, L-200XLS-R, L-1000XLS-R</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop Kapak Camı</td><td>Fisher Scientific</td><td>12541014</td><td></td></tr><tr><td>Nokodazol</td><td>Calbiochem</td><td>Cat#487928; CAS: 31430-18-9; Lot#B35705</td><td></td></tr><tr><td>Turuncu G</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>O7252</td><td></td></tr><tr><td>PİM</td><td>Hampton Araştırmaları</td><td>HR2-591</td><td></td></tr><tr><td>Peptone granüllü&nbsp;</td><td>Fisher Biyoreagentleri</td><td>BP9725-5</td><td></td></tr><tr><td>Füzyon HF DNA Polimeraz</td><td>New England BioLabs</td><td>M0530L</td><td></td></tr><tr><td>Pipet-X</td><td>Rainin</td><td>PX-100R</td><td></td></tr><tr><td>Potasyum fosfat, dibazik</td><td>Termo Bilimsel</td><td>424195000</td><td></td></tr><tr><td>Potasyum fosfat, monobazik</td><td>Termo Bilimsel</td><td>424200025</td><td></td></tr><tr><td>Güç kaynağı</td><td>Bio-Rad</td><td>23786</td><td></td></tr><tr><td>Başlat Ultra 1.2.2 Edin.</td><td>softWoRx Cytiva</td><td>DV Ultra ile Elde Edin</td><td></td></tr><tr><td>Tris Üssü</td><td>Fisher Biyoreagentleri</td><td>BP152-10</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>9002-93-1</td><td></td></tr><tr><td>Tüp rotatörü</td><td>VWR</td><td>10136-084</td><td></td></tr><tr><td>su banyosu</td><td>VWR</td><td>WBE10A11B</td><td></td></tr><tr><td>Su, Ultra Saf</td><td>Apex Bioresearch Ürünleri</td><td>18-194</td><td></td></tr><tr><td>Maya Ekstraktı Granüllenmiş</td><td>Fisher Biyoreagentleri</td><td>BP9727-5</td><td></td></tr></tbody></table>

tomurcuklanan mayada hücre döngüsüne bağlı süreçlerin manipülasyonu ve analizi

Manipulation and Analysis of Cell Cycle-Dependent Processes in Budding Yeast

Tomurcuklanan mayada hücre döngüsüne bağlı süreçlerin manipülasyonu ve analizi

Eukaryotic cells follow a conserved cell cycle that regulates diverse processes, including DNA maintenance and organelle homeostasis. Studying cellular ...

manipulation-analysis-cell-cycle-dependent-processes-budding

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Gen silme ve protein aşırı ekspresyonu proteinlerin işlevleri çalışmak için sık kullanılan yöntemlerdir. Bu makalede, bir nüfus protein konsantrasyonu fonksiyonu ve tek hücreli düzeylerde fenotip gelişimi analiz için bir...

Geliştirici Maya Protein Konsantrasyonu bir işlev olarak Morfolojik Fenotip Kalkınma Analizi

, Hücrelerden oluşan bir nüfus hücre döngüsü konumunun belirlenmesi, ya da sinyalleri çoğalması nasıl etkilediğini anlamak, bu protokolü kullanarak flow sitometri ile kolayca ölçülebilir. Biz hücreleri boyama ve hücre döngüsü konumlarını miktarının belirlenmesi için basit bir deneysel yaklaşım raporu.

Memeli Hücreler, Hücre Döngüsü Pozisyon Analizi

Biz floresan büyüyen maya hücreleri mikroskop film ve tek hücreli zaman serisi veri ayıklamak için bir GUI tabanlı yazılım paketi elde etmek için basit protokol mevcut. Analizi otomatik soy ve görsel denetim ve izlenen verileri manuel küratörlüğü ile entegre bölümü zaman atama içerir.

Tomurcuklanma Maya Floresan Time-lapse Filmler Kazanılması ve GREFTLERİ kullanarak Tek hücreli Dynamics analiz

Fisyon maya, Schizosaccharomyces pombe sitokinezi incelemek için mükemmel bir model sistemi, hücre bölünmesi son aşamasıdır. Burada canlı fisyon maya hücreleri farklı cytokinetic olayları analiz etmek için bir mikroskop yaklaşım açıklar.

Fisyon Maya Cytokinetic Olayların zamanmekansal Analizi

Maya tomurcuklanan nedeniyle güçlü genetik ve mikrotübül hücre iskeletinin basitliği için in vivo olarak mikrotübül dinamiklerinin çalışmak için avantajlı bir modeldir. Aşağıdaki protokol dönüşümü ve kültür maya hücreleri eş odaklı mikroskopi görüntü elde ve kantitatif maya hücrelerini canlı mikrotübül dinamiklerini analiz etmek açıklamaktadır.

Yüksek çözünürlüklü görüntüleme ve Bireysel Astral Mikrotubul Dynamics Analizi Budding Maya

Inherent Dynamics Visualizer, gelişmiş, kolaylaştırılmış işlevsel ağ modelleri üretimi için gen düzenleyici ağ çıkarım aracına bağlanan etkileşimli bir görselleştirme paketidir. Görselleştirici, çıkarım aracını parametrelendirmek için daha bilinçli kararlar vermek ve böylece ortaya çıkan modellere olan güveni artırmak için kullanılabilir.

Doğal Dinamikler Görselleştiricisi, Gen Düzenleyici Ağ Çıkarım Ardışık Düzeninden Çıktıları Değerlendirmek ve Görselleştirmek için etkileşimli bir uygulama

Hızlandırılmış mikroskopi, tomurcuklanan mayadaki mayozu incelemek için değerli bir araçtır. Bu protokol, mayotik kromozom ayrışması sırasında belirli bir proteinin işlevinin nasıl çalışılacağını göstermek için hücre döngüsü senkronizasyonunu, hızlandırılmış mikroskopiyi ve bir hedef proteinin koşullu tükenmesini birleştiren bir yöntemi açıklar.

S. cerevisiae'de Mayozu İncelemek için Hızlandırılmış Mikroskopi ve Proteinlerin Aşamaya Özgü Nükleer Tükenmesinin Kullanılması

Senkronize zaman serisi deneylerini analiz etmenin bir zorluğu, deneylerin genellikle senkronizasyondan ve hücre döngüsü periyodundan kurtarma uzunluğunda farklılık göstermesidir. Bu nedenle, farklı deneylerden elde edilen ölçümler toplu olarak analiz edilemez veya kolayca karşılaştırılamaz. Burada, faza özgü karşılaştırmalara izin vermek için deneyleri hizalamak için bir yöntem açıklanmaktadır.

Çapraz deney karşılaştırmaları için hücre döngüsü senkron modelinin karakterizleştirici kaybı kullanılarak senkronize zaman serisi verilerinin hizalanması

Bu yazıda, maya anne hücreleri replikatif ömrü ölçümü için genel bir protokol mevcut.

Geliştirici Maya replikatif Ömrü Ölçüm

Fisyon Maya Kantitatif Canlı Hücre Floresan mikroskopi Analizi

Öğrenin, Saccharomyces cerevisiae'de alfa-faktör senkronizasyonu ile hücre döngüsü aşamalarında protein lokalizasyonunu floresan mikroskopiyle analiz etme yöntemini. Bu teknik, mitoz ve kromozom ayrışmasının moleküler mekanizmalarını incelemek için kullanılır.

Tomurcuklanan mayada hücre döngüsüne bağlı süreçlerin manipülasyonu ve analizi

Daha fazla video keşfet