실험실 기본 관리

주택/Caging

쥐와 쥐는 주로 침구 재료를 포함하는 단단한 바닥으로 신발 상자 형 caging에 보관됩니다. 일반적인 신발 상자 마우스 케이지는 75 평방 인치의 바닥 공간을 제공하며 성인 마우스 5 마리에 적합합니다. 그러나, 실험설계는 4개의 마우스의 군을 요구할 수 있다. 이 경우, 마우스는 실험이 시작될 때 사회 집단의 혼란을 피하기 위해 4개의 그룹으로 수신시 보관되어야 합니다. 일반적으로 쥐 를 조장하면 완전히 자란 성인 동물 2 마리의 최대 가 가능합니다. 쥐가 장기 적으로 보관되어야하는 경우, 그들은 쌍 주택에 설립되어야한다.

케이지는 정적이거나 개별적으로 환기(IVC)일 수 있습니다. 정적 케이지는 와이어 바 뚜껑으로 덮여 있거나 선반 아래 선반에 정착되어 케이지 의 상단입니다. 필터 재질은 와이어 바 뚜껑 위에 보닛으로 케이지 상단 또는 랙 선반 위에 필터 용지 시트로 추가됩니다. IVC는 케이지, 와이어 바 뚜껑 및 보닛으로 설정되어 케이지로 공기 흐름을 제공합니다. IVC를 사용하면 정적 케이지가 변경되는 경우가 자주 케이지를 변경할 필요가 없습니다.

표준 케이지 시스템은 물의 원천과 식량 분배 를 위한 영역을 제공합니다. 물은 케이지 의 상단에 배치 물 병을 통해 또는 동물 케이지의 내장 된 sipper 튜브를 통해 제공 할 수 있습니다. 케이지가 랙에 종사하면 동물 시설 전체의 동물의 요구를 충족하도록 설계된 자동 급수 시스템을 위해 물을 시퍼 튜브로 운반합니다. Caging는 동물에 대한 적절한 치료를 제공하기 위해 적절하게 준비해야합니다. 동물 케이지 내에 피더가 배치되거나 와이어 바 뚜껑의 일부가 식품 저장에 사용됩니다. 동물에 의해 더럽히지 않도록 음식을 배치해야합니다.

실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 가이드² ("가이드") 모든 caging 구현은 적어도 2 주마다 소독되어야한다고 명시하고 있습니다. 일부 케이지 및 액세서리는 인클로저의 냄새와 암모니아 수준에 따라 더 자주 변경해야 할 수 있습니다. 일반적으로, IVC는 4 개 이상의 남성 또는 쓰레기와 여성이없는 한 2 주마다 변경 될 예정이다; 이러한 인클로저는 매주 변경해야 할 수 있습니다. 케이지 가 변경은 마우스가 병원체에 노출될 수 있는 기회이기 때문에 면역 결핍 마우스를 위한 caging의 변화는 가능한 한 드물게 수행되어야 합니다.

다이어트

단백질, 탄수화물 및 지방 수준의 변화와 함께 사용할 수있는 다이어트의 많은 구성이 있습니다. 전형적으로, 사료는 15-19% 단백질, 44% 탄수화물 및 4-9%의 지방으로 구성되어야 합니다. 지방 함량이 증가한 음식은 종종 번식을 향상시키기 위해 식민지를 사육하는 데 사용됩니다. 식품은 면역 손상 된 쥐에 대 한 오염의 소스 수 있습니다., 그것은 증기 살균 또는 조사 해야 합니다. 오토클레이브 공정을 받는 식품은 공정을 견딜 수 있도록 특별히 제조되어야 합니다. 그러나 조사 과정은 식품 내용을 변경하지 않습니다.

물은 면역 결핍 동물에 대한 오염의 또 다른 잠재적 인 소스입니다. 물은 UV 필터를 통과하는 물을 포함하는 오토클레이브 또는 여과를 통해 처리되어야 합니다. 오토클레이브에서 물을 살균하기 위해 개별 물 병은 알루미늄 호일로 덮여 있습니다. 시퍼 튜브가 있는 병 뚜껑은 오토클레이브 백에 별도로 멸균됩니다. 2.5-3의 pH에 물의 산성화는 물병에 있는 성장 세균성 유기체를 통제하는 것을 돕습니다. 물은 12개의 두더지(M) 염산(HCl)을 8리터의 역전된 osmolality(RO) 물에 첨가하여 산성화된다. 자동 급수 시스템은 미립자 필터와 자외선 필터를 포함하는 시스템 전반에 걸쳐 일련의 여과와 함께 사용할 수 있습니다.

환경

동물 보호 시설 내의 환경 조건은 엄격하게 통제되어야 합니다. 연방 규정 및 지침은 일반적으로 사용되는 동물의 치료 및 취급에 대한 표준을 수립했습니다. 조명, 주변 온도, 습도 및 공기 흐름이 제공되어 동물의 생리적 요구를 충족시킵니다. 약간 증가한 실온에 대한 필요성을 제외하고, 면역 손상된 동물의 매개 변수는 종래의 동물과 동일합니다. 아티믹 누드 동물은 또한 열 조절을 돕기 위해 케이지에 추가 침구와 파쇄 된 종이 형 중첩 재료가 필요합니다.

동물실은 습도가 40~60%인 68-72°F 사이의 온도에서 유지관리해야 합니다. ² 40% 미만의 습도 수준은 꼬리의 피부가 꼬리 주위로 수축되는 지점까지 건조하게 만드는 쥐와 쥐의 링테일을 초래할 수 있으며, 이는 꼬리 슬라우핑으로 이어질 수 있습니다. 조명 주기는 부적절한 광기간 이나 광강도로 인한 동물에 대한 스트레스를 피하기 위해 설정해야합니다. 일반적으로, 광기간은 12 시간 및 12 시간 꺼져 있습니다. 조명 강도는 실내의 활동에 따라 달라져야 합니다. 기술자가 동물실에서 작업할 때 더 높은 조명 레벨을 사용할 수 있습니다. 그러나 모든 활동이 끝나면 조명을 약 325 럭스로 낮춥아야 합니다. ² 조명은 타이머에 있어야 하며 모니터링 시스템을 통해 확인된 사이클입니다. 가이드의 지시에 따라 동물실은 시간당 100% 신선한 공기를 최소 10~15개까지 변경해야 합니다. ² 공기 변화는 동물방에서 미생물과 냄새를 감소시다. 인구밀도가 높은 동물실에서는 시간당 공기 변화의 수를 늘려야 할 수도 있습니다.

케이지 레벨의 환경적 요인으로는 코이징 타입, 케이지 내에서 사용되는 기판, 물 전달 시스템 및 식이요법이 포함됩니다. 사회 주택은 과학적으로 정당화되지 않는 한 필수, 또는 동물은 다른 모든 사람과 호환되지 않습니다. 종이 오두막과 중첩 재료와 같은 환경 농축 의 조항은 동물이 종별 행동을 나타낼 수 있게하여 스트레스 수준을 감소시키고 동물의 전반적인 웰빙을 증가시킵니다. 중첩 물질은 또한 같은 케이지에 있는 다중 남성 마우스의 하우징을 돕는 진정 페로몬에 포화된 수면 공간을 제공합니다. 중첩 영역은 새로운 환경에 도입될 때 남성의 침략을 방지하기 위해 케이지가 바뀌면 깨끗한 케이지로 이동합니다. ³

1. 면역 능력 (종래) 마우스 처리

그것은 쥐의 면역 장애는 인간에 있는 것과 매우 유사하다는 것을 입증되었습니다. ² 이러한 동물들은 면역학적 능력이 제한되어 있기 때문에 이러한 동물의 취급 및 관리 절차는 엔지니어링 제어, 동물 관리 직원을 위한 개인 보호 장비 및 표준 운영 절차를 통해 전염병의 위험을 최소화하도록 설계되었습니다. 이러한 오염은 동물이 접촉하는 caging 및 기타 장비의 오염을 완화합니다.

1. 선적 컨테이너에서 포장 풀기: 다른 기관이나 동물 공급 업체에서 동물을 받는 것은 이미 동물 시설 내에 보관 된 동물에게 위험을 초래합니다. 운송 중에 동물 운송 상자가 병원성 제제와 접촉할 수 있습니다. 따라서 선적 컨테이너를 풀 때 적절한 절차를 수행해야 합니다.
   1. 최소한의 개인 보호 장비(PPE) 요구 사항은 동물을 취급할 때 장갑, 깨끗한 실험실 코트 또는 스크럽, 미립자 마스크 및 안전 안경입니다.
   2. 와이어 바 뚜껑과 배리어 탑을 포함하여 적절한 케이지를 선택합니다. 케이지에는 적절한 침구와 중첩 재료가 구비되어 있어야 합니다. 모든 caging는 동물이 도착하기 전에 수령 구역에 준비되고 배치되어야합니다.
   3. 도착 시 교통 상자는 안전하고 온도 조절된 방에 배치됩니다. 그런 다음 컨테이너를 검사하여 손상을 검사합니다.
   4. 선적 용기의 외부 표면을 콜린 이산화물질로 소독하여 유해한 병원균을 파괴합니다. 소독제가 제조업체 권장 사항에 따라 일반적으로 15-30분 동안 상자와 접촉하고 있는지 확인하십시오.
   5. 동물 이송 스테이션(ATS)에 컨테이너를 배치합니다. ATS는 사용자와 작업 영역 사이의 진공 공기 장벽을 만들어 알레르겐 보호를 제공하는 후드 내에서 HEPA 필터링 된 공기 흐름을 제공합니다. 이를 통해 동물 털/dander 및 케이지 침구 소재에 최소한의 노출이 가능합니다. 단방향 공기는 또한 주변 실내 공기로부터 동물을 보호하여 오염 가능성을 최소화합니다.
   6. 선적 컨테이너가 열리면 동물의 전반적인 상태를 평가합니다. 부상또는 아픈 동물을 기록하십시오.
   7. 동물을 조립된 케이지에 적절한 그룹 크기로 배치합니다. 그룹화는 공간 규정및 할당될 실험 프로토콜에 따라야 합니다.
   8. 와이어 바 뚜껑으로 케이지를 덮습니다. 와이어 바 뚜껑의 디바이더를 고정하여 뚜껑에 두 개의 영역을 만듭니다.
   9. 적절한 음식을 선택하고 음식을 와이어 바 뚜껑의 한쪽에 놓습니다. 공기의 더 나은 순환을 허용하기 위해 두 번째 면을 열어 둡니다.
   10. 물은 물병 이나 자동 급수 시스템을 통해 제공 될 것입니다. 물병은 새로 젖을 짜는 마우스가 수분 수준을 유지할 수 있도록 하는 데 사용됩니다. 자동 급수로 Caging IVC의 경우 랙에 넣기 전에 급수 튜브를 충전하십시오.
   11. 케이지를 랙에 놓습니다. IvC를 사용하는 경우 케이지가 랙에 완전히 관여하고 시퍼 튜브가 급수 시스템에 고정되어 있는지 확인합니다.
2. 종래의 마우스를 바꾸는 케이지
   1. 동물 케이지는 ATS에서 변경됩니다. ATS는 각 세션의 끝에 disind입니다.
   2. 한 번에 하나의 케이지만 열 수 있습니다.
   3. 적절한 침구와 중첩 재료로 준비된 코징은 동물실로 가져온다. 소수의 케이지가 ATS에 배치됩니다.
   4. 내부 시퍼 튜브가있는 IVC 케이지는 시퍼 튜브의 죽은 공기를 제거하기 위해 물을 시퍼로 강제로 충전해야합니다. 제대로 충전되지 않은 경우, 마우스는 그것에서 공기를 제거하기 위해 시퍼 튜브에 충분한 압력을 제공하지 못할 수 있습니다.
   5. 최소한의 개인 보호 장비(PPE) 요구 사항은 동물을 취급할 때 장갑, 깨끗한 실험실 코트 또는 스크럽, 미립자 마스크 및 안전 안경입니다.
   6. 변경될 동물 케이지가 새 케이지에 넣은 다음 ATS에 배치됩니다.
   7. 동물은 손으로 또는 패딩 된 집게를 사용하여 전송됩니다. 장갑은 케이지 사이 또는 마우스의 단 사이에서 변경됩니다. 장갑은 또한 케이지 사이의 무독성 화학 물질로 소독 될 수 있습니다.
   8. 그것은 깨끗한 케이지로 마우스의 둥지 영역을 전송하는 것은 깨끗한 케이지로의 전환을 지원, 특히 그룹 보관 남성에 대한 입증되었습니다. 다른 농축 아이템도 새 케이지로 전송됩니다.
   9. 케이지 상단이나 피더가 새 케이지에 배치되면 음식이 추가됩니다.
   10. 장벽 상단은 새 케이지에 배치되고 케이지가 랙으로 반환됩니다.
   11. IVC 케이지는 공기 와 물 밸브가 관여되도록 랙에 적절하게 도킹되어야 합니다.

2. 면역 손상 된 마우스 처리

1. 선적 컨테이너에서 포장 풀기
   1. 면역 손상 된 동물은 멸균 조건에서 포장을 풀어야합니다. 면역 결핍 마우스를 취급하는 모든 개별은 증기 살균 가운, 마스크, 머리 보닛 및 멸균 장갑을 착용해야합니다. 무균 기술은 이 동물을 건네줄 때 항상 사용되어야 합니다.
   2. 모든 장비와 파징은 증기, UV 방사선, 또는 적어도 30 분 동안 70 % 에탄올에 담그고 화학적으로 살균되어야합니다 멸균 세이징에 대한 두 가지 옵션이 있습니다 : 포장 및 증기 살균 된 표준 caging, 또는 일반적으로 조사를 통해 살균되는 caging. 이 케이지는 일회용 장치 중 하나입니다.
   3. 라미나르 플로우 후드 하에서 마우스를 조작하기 전에, 후드는 블로어 작동과 함께 70 % 에탄올로 분무된다. 후드 송풍기는 멸균 환경을 유지하기 위해 항상 켜야합니다. 사용 후, 후드는 소독제로 분무되고 모든 파편을 닦아 내고 다시 70 %의 에탄올로 분사됩니다.
   4. 최적으로, 면역 손상 된 마우스의 적절 한 수신에 대 한 두 사람이 필요: 무균 기술을 사용 하 여 동물을 처리 하는 하나 (멸 균 기술자), 오염 된 항목을 처리 하는 하나 (비 살균 기술자). 무균 인은 여전히 깨끗하고 긴 소매 가운을 착용해야합니다. 실험실 코트 또는 스모크; 마스크; 보닛; 그리고 멸균 장갑은 후드에 도달해야하는 경우 멸균 내부의 오염을 방지하기 위해.
   5. 미리 나 흐름 후드는 이전에 설명 한 대로 준비합니다. 면역 손상된 동물을 위한 후드를 갖는 것이 바람직하다. 후드에는 후드의 내부를 사용 하 여 살균하는 데 사용할 수 있는 자외선(UV) 살균 조명이 장착되어 있는 것이 좋습니다. 타이머는 후드의 표면이 UV 광선에 적절한 노출을 가지고 있는지 확인하기 위해 활용된다.
   6. 후드에 넣은 모든 소모품의 외관은 음식, 물 및 파징의 외부 포장을 포함하여 70 % 알코올로 분무됩니다.
   7. 선적 컨테이너는 후드에 놓이기 전에 이산화염소 용액으로 분사됩니다. 후드에 놓으면 15-30 분 동안 열리지 않은 상태로 유지됩니다.
   8. 지정된 동물 취급자는 후드 아래에 멸균 식품과 물을 엽니다.
   9. 비멸 기술자는 후드 아래에 배송 상자를 엽니 다. 후드의 내부 표면과 배송 상자의 내부 표면과의 접촉을 피하기 위해 비살균 기술자가 주의해야 합니다.
   10. 동물 처리기는 멸균 케이지를 열고 음식과 물을 케이지 상단에 배치하여 케이지를 준비합니다. 마우스는 그 때 발송 상자에서 제거하고 멸균 케이지에 놓습니다.
   11. 동물 상태는 멸균 동물 처리기에 의해 지적된다. 아프거나 명백한 부상을 입은 동물은 분리됩니다. 수의학적 주의가 필요한 동물로 표시된 모든 케이지는 다른 동물의 잠재적 오염을 줄이기 위해 마지막으로 취급, 케이지 변경 또는 실험 조작을 위해 배치됩니다.
   12. 비살균자는 후드에서 채워진 케이지를 제거합니다. 케이지는 표준 랙에 정적 케이지또는 IC로 통풍이 잘 되는 랙에 배치할 수 있습니다. IvC에서 마우스는 열 조절을 지원하기 위해 추가 중첩 재료를 제공해야 합니다.
   13. 동물 처리기는 동물의 그룹의 가능한 교차 오염을 방지하기 위해 각 선적 컨테이너 후 장갑을 변경해야합니다. 선적 컨테이너 번호는 질병발생 시 동물의 기원을 추적하기 위해 케이지 카드에 기록됩니다.
   14. 원래 컨테이너를 다시 밀봉할 수 있는 경우 사용하지 않은 소모품을 나중에 사용할 수 있습니다. 사용하지 않은 음식은 방에서 제거됩니다.
   15. 마우스는 실험용으로 사용하기 전에 최소 1주일의 적응 기간을 거쳐야 합니다.
2. 면역 손상 된 쥐에 대 한 케이지 변경
   1. 마우스 케이지는 적어도 매주 한 번 또는 필요하다고 판단되는 경우 더 자주 변경됩니다.
   2. 후드 준비, 케이지 준비 및 인력 PPE를 위한 단계는 동물의 포장을 풀기위한 것과 동일합니다.
   3. 동물은 손으로 또는 패딩 집게를 사용하여 전송됩니다. 지정된 동물 처리기는 장갑이 찢어지거나 오염된 경우 또는 동물이 아픈 것처럼 보이는 경우 5-10 케이지마다 다시 장갑을 끼워야 합니다.
   4. 아픈 것처럼 보이는 동물을 가진 모든 케이지는 병원체 또는 오염 물질에 건강한 동물의 노출을 피하기 위해 케이지 변경 순서의 끝에 배치됩니다.
   5. 다음 예정된 케이지가 변경되기 전에 음식 및/또는 물을 케이지에 추가해야 하는 경우 준비된 후드 아래에서 무균적으로 수행해야 합니다.

생물 의학 연구에 사용되는 동물의 적절한 관리 및 취급은 실험의 결과에 매우 중요합니다. 규정 및 확립된 지침은 사용되는 많은 관행을 규정합니다. 그러나, 기회 병원체에 우발적인 노출을 완화하기 위하여 면역 결핍이 있는 마우스와 쥐를 위한 추가 측정이 요구됩니다. 관행이 확립 된 절차를 준수 할 때, 실험 동물의 건강과 웰빙이 향상되고, 더 나은 실험 결과 달성된다.