Journal
/
/
/
Mısır Yaprağı Primordiasının Enine Kesitlerinin Görüntülenmesi
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Imaging Transverse Sections of Maize Leaf Primordia

Mısır Yaprağı Primordiasının Enine Kesitlerinin Görüntülenmesi

418 Views

02:19 min

September 22, 2023

DOI:

02:19 min
September 22, 2023

12 Views
, , , , , ,

Transcript

Automatically generated

İstenilen yaşlı mısır fidesini mezokotil dokusunda küçük bir bıçak veya makas kullanarak keserek başlayın. Fideyi bir boya fırçası ile temizleyin. Ardından tel sıyırıcıyı çeneleri oluğa bakacak şekilde tutun.

Oluğu seçilen deliğe yerleştirin ve sıyırıcı tutamaçlarını birlikte sıkın. Yaprakların üst kısmını kesmek için striptizciyi oluktan uzağa kaydırın. Primordiumun ucundan oluğun tabanına kadar olan uzunluğu ölçmek için bir cetvel kullanın.

Yaprak primordyum görüntülemeye başlamak için, oluğu stereo mikroskop altında pürüzsüz bir yüzeyde yaklaşık 0.8x büyütmede sabit tutun. Bir tıraş bıçağı veya neşter kullanarak, oluğun distal kısmını atmak için hedef bölgenin biraz üzerinde bir ilk kesim yapın. Daha sonra, primordyumun uzunluğu boyunca istenen noktalarda yaklaşık 0.25 ila 0.8 milimetre ince kesitler elde edin.

İşiniz bittiğinde, yaprak bölümünü temiz bir cam slayta monte edin. Bir pipet kullanarak doğrudan bölüme birkaç damla su uygulayın. Ve üstüne bir kapak fişi yerleştirin.

Gerekirse kapak fişinin kenarlarından birkaç damla daha uygulayın. Slaytı epifloresan mikroskobunun aşamasına yerleştirin ve floroforu görselleştirmek için ayarları yapın. Bu yöntem kullanılarak, kesitlemeden önce primordia ölçülerek şans rezeksiyonu örneklemesi standartlaştırıldı.

Kaybolan püskül ikilisinin normalden daha geniş bir primordiaya ve daha fazla damara sahip olduğunu gösteren bir eğilim keşfedildi, bu da mutanttaki kusurun yaprak gelişiminin erken dönemlerinde başladığını gösteriyor. Bu yöntem aynı zamanda yaprak primordiasında hormon yanıtı floresan protein muhabirlerinin ekspresyon kalıplarının sistematik olarak incelenmesini sağlamıştır.

Read Article