Inizia dividendo 18 cuccioli maschi di ratto Sprague-Dawley sette giorni dopo la nascita in tre gruppi: finzione, modello e massaggio. Applicare un unguento per gli occhi e colliri ai cuccioli anestetizzati per prevenire la secchezza degli occhi. Disinfettare la pelle del collo dei ratti con iodoforo, seguito da etanolo al 75%, quindi praticare un’incisione longitudinale lunga circa 0,5 centimetri al centro del collo del ratto giovane.
Separare con cura il tessuto sottocutaneo destro, esponendo l’arteria carotide comune. Nei gruppi modello e massaggio, separare l’arteria carotide comune e il nervo vago. Coagulare l’arteria carotide comune, utilizzando una pistola elettrica per la coagulazione.
Dopo aver confermato l’assenza di sanguinamento, suturare la pelle strato per strato e disinfettare nuovamente l’incisione chirurgica. Per il gruppo fittizio, separare l’arteria carotide comune senza trattamento. Suturare la pelle strato per strato, quindi disinfettare l’incisione chirurgica.
Una volta che il giovane ratto striscia senza restrizioni, mettilo accanto a sua madre. Dopo aver disinfettato i ratti del modello operato e del gruppo di massaggio, alloggiarli su un cuscinetto isolante a 37 gradi Celsius e monitorare costantemente eventuali segni di sanguinamento dalla ferita o infiammazione dell’occhio. Metti i giovani ratti in una camera di ipossia aperta e osserva per un’ora fino a quando non riprendono conoscenza.
Dopo il recupero dall’anestesia, spostare i giovani ratti in un dispositivo anossico chiuso per un periodo di ipossia di tre ore. Dopo il trattamento ipossico, riportare il giovane ratto sveglio alla madre, quindi disinfettare gli strumenti chirurgici e pulire la camera ipossica con alcool. Dopo l’intervento chirurgico, pulire il giovane ratto con iodoforo per prevenire l’infezione.
Monitorare quotidianamente la ferita per segni di infezione e utilizzare un’imbottitura sterile secondo necessità. Una volta che il modello è stato stabilito con successo, mantenere il gruppo modello in condizioni normali e applicare l’intervento manuale al gruppo di massaggio. Successivamente, posizionare ogni gruppo di ratti accanto ai ratti madre su lettiera sterile e ad alta temperatura e monitorarli per una o due ore fino a quando i ratti madri non nutrono la prole.
Eseguire osservazioni quotidiane per verificare la presenza di sanguinamento nel sito della ferita e di eventuali segni di infiammazione oculare fino a quando la ferita non guarisce completamente.