Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- For at isolere æggestokke fra levende Drosophila fluer, skal du begynde med at flytte en bedøvet kvinde til en af tre dissektion brønde fyldt med forvarmet insekt dissektion medium. Mediet vil bidrage til at opretholde væv integritet og levedygtighed.
Under et dissektionsmikroskop skal du adskille maven fra brystkassen. Derefter flyttes maven ind i en ny brønd. For at isolere æggestokkene skal du holde maven i den bageste ende og forsigtigt skrabe de reproduktive organer ud. Til sidst overføres æggestokkene til en frisk brønd. Efter dette trin kan du enten bruge hele æggestokken eller yderligere dissekere den i dens komponentstrukturer.
Hver Drosophila æggestok er sammensat af flere ovarioler, der består af en kæde af ægkamre med stigende modenhed. For at frigøre ovariolerne skal du fastgøre æggestokken i den uigennemsigtige bageste ende og omhyggeligt drille den beskyttende kappe fra omkring æggestokken, indtil ovariolerne er korrekt adskilt.
I eksempelprotokollen viser vi dissektionen af Drosophila-æggestokke til deres brug i levende og fast vævsmikroskopi.
- Efter at have sorteret fem bedøvede kvindelige fluer i henhold til tekstprotokollen, under dissektionsmikroskopet, skal du bruge to par pincet til at afskære brystkassen fra maven. Derefter skal du forsigtigt overføre underlivet til skålens anden brønd. Brug et par pincet til at holde maven i den bageste ende, brug det andet par pincet til langsomt at skubbe æggestokkene ud.
Brug derefter tangen til at holde en individuel æggestok ved den uigennemsigtige bageste ende og forsigtigt flytte den til den tredje brønd i skålen til drilleri eller fiksering.
