成人 果蝇 注射：化合物或标签递送方法

- 用拔针器拉薄壁玻璃毛细管， 准备锥形注射针。在显微镜下握一根针， 打破尖端， 确保开口足够大，足以刺穿成人飞毛病，而不会伤害它超过必要的。 用无菌染料和盐缓冲液将针头加载，然后将其喷射到舞台微米上的一滴矿物油上，测量注射量。使用微米上的尺度测量喷射液滴的直径，可用于计算分配的体积，并校准喷油器相应的设置。

用注射液将针头加载并安装到注射喷嘴上。 用二氧化碳麻醉您的苍蝇，并将它们排列在CO2飞垫上，使其保持麻醉。一旦苍蝇在正确的方向为您的实验，继续注射。在示例协议中，我们将为成年苍蝇注射荧光素标记颗粒，用于体内成像。

- 用针拉器拉薄壁玻璃毛细丝后，使用微米将针头放在显微镜下，并使用五号细点不锈钢钳子将尖端切开至100微米的尖端直径。为了测量将注射到每只苍蝇身上的液体体积，在PBS中加载一个无菌5%食物着色的毛细管针，并将液体排出到0.01毫米级微米的矿物油上。

将10微升每毫升颗粒1.6毫克的微升剂分配到一小块半胶片上，将液体拉入针头。 将针头插入喷油器喷嘴，将麻醉苍蝇沿着它们在飞行垫上的指定区域排列，心室侧向上，头部朝向垫子的正面。 将小瓶放在长凳上的相应区域，用五个100毫秒的液体泵将苍蝇注射到腹部上角总共输送约10纳米升的颗粒。将每只苍蝇在注射时转移到适当的小瓶中，并指出小瓶上的时间。

接下来，用0.4%的Trypan Blue溶液加载新针头，并将气动喷油器设置为"门控"，以便空气不断流动，将液体从针头中推出。初始注射后30分钟，给每只苍蝇腹部注射Trypan蓝色，直到腹部饱满和扩张。 将苍蝇放在显微镜滑梯上，用电胶带向下喷射侧，将翅膀推到苍蝇的一侧，以确保它们固定在胶带上。然后轻轻地将头部推入胶带中，以确保苍蝇不会移动。