Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- एक कवर किए गए क्षेत्र का उपयोग करें - उदाहरण के लिए, स्पष्ट सिलिकॉन से भरा पेट्री डिश -- यह सुनिश्चित करने के लिए कि मक्खियां स्वतंत्र रूप से चल सकती हैं, लेकिन जब यह कवर की जाती है तो अखाड़े के अंदर उड़ने में असमर्थ होते हैं। पकवान को सफेद प्रबुद्ध सतह पर रखें और सीधे ऊपर एक कैमरा रखें।
ढक्कन खुले होने के साथ, एनेस्थेटाइज्ड मक्खियों को पकवान में स्थानांतरित करें, इसे कवर करें, और विषयों को ठीक होने दें। परीक्षण के दौरान मक्खियां स्वतंत्र रूप से क्षेत्र के चारों ओर जाएंगी। लोकोमोशन का आकलन करने के लिए, समय के साथ प्रत्येक फ्लाई की स्थिति को ट्रैक करें और प्रत्येक फ्लाई द्वारा कूच की गई दूरी जैसे मापदंडों की गणना करें। इस उदाहरण प्रोटोकॉल में, हम वीडियो ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर का उपयोग करके परख सेटअप और विश्लेषण का प्रदर्शन देखेंगे।
- पेट्री डिश में फ्लाई मूवमेंट को ट्रैक करने के लिए सबसे पहले, ट्रैकिंग एरिना बनाने के लिए पारदर्शी सिलिकॉन इलास्टोमर के साथ 6 सेंटीमीटर डिश भरें। सिलिकॉन और ढक्कन के बीच 3 मिलीमीटर का गैप छोड़ दें, ताकि मक्खियां गैप में खुलकर चल सकें, लेकिन फ्लाइट न लें। ट्रैकिंग एरिना के नीचे सफेद बैकग्राउंड होता है ।
इसके बाद, एक ही उपचार समूह से चार मक्खियों को एनेस्थेटाइज करें और उन्हें अखाड़े में रखें। मक्खियों को एक घंटे के लिए अखाड़े में ले जाएं, जिसे पूरी तरह से जलाया जाना चाहिए और लगभग 22 डिग्री सेल्सियस पर, कमरे के तापमान से अधिक गर्म नहीं होना चाहिए । एक घंटे के बाद, 5 मिनट के लिए मक्खी की गतिविधि रिकॉर्ड करने के लिए अखाड़े के ऊपर तैनात एक चार्ज-युग्मित डिवाइस कैमरे का उपयोग करें ।
5 मिनट की रिकॉर्डिंग के बाद, आसनीय क्षेत्र में मक्खियों को एनेस्थेटाइज करें और उन्हें एक नई घर की शीशी में वापस कर दें। फिर, अखाड़े का निपटान करें। बाद में, स्वतंत्र रूप से उपलब्ध सीटीट्रैक्स सॉफ्टवेयर का उपयोग करके रिकॉर्डिंग का विश्लेषण करें। यह सॉफ्टवेयर ट्रैकिंग डेटा उत्पन्न करता है, जिसे प्रोग्राम-भाषा-संगत प्रारूप में निर्यात किया जा सकता है, जैसे मैटलैब प्रारूप।
आंकड़ों से, प्रति फ्रेम यात्रा की गई दूरी की गणना करें, प्रत्येक फ्लाई के लिए औसत पैदल दूरी, और औसत दूरी प्रति फ्लाई की यात्रा की। सांख्यिकीय महत्व के लिए, प्रति उपचार समूह लगभग 100 मक्खियों का परीक्षण करने की उम्मीद है।
