Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Først skal du placere et mikroskop dias mellem to andre dias med tape. Disse giver støtte og afstandsstykke til agarose pad forberedelse. Næste, placere en dråbe smeltet agarose på diaset. Straks tryk ned på den med et andet dias.
Når agarose størkner, skal du forsigtigt adskille lysbillederne, så agarose forbliver på et dias. Brug altid frisklavede puder, da udtørrede puder kan dehydrere dyrene. Sørg for, at der ikke er revner eller bobler, som kan forstyrre pad integritet.
Derefter tilsættes en dråbe bedøvelsesmiddel til padcentret og overfører 10 til 15 dyr til det, hvilket bringer så lidt bakterier med dem som muligt. Overskydende bakterier kan forstyrre billeddannelsen. Hvis bedøvelsesopløsningen tørrer ud, tilsæt en anden dråbe på dyrene.
Placer forsigtigt en coverlip over puden. Undgå at danne bobler eller lægge for meget pres på den for at forhindre at beskadige dyrene.
- Start med at forberede lysbilleder. Placer en dråbe smeltet agarose på et mikroskop dias og straks trykke ned dråben med en anden mikroskop dias forsigtigt udfladning agarose Har brug for agarose til tørre i et minut.
Derefter forsigtigt adskille de to dias og lad størknet pad på en af de dias. Placer dias på mikroskop scenen og tilføje en 5- til 10-microliter dråbe bedøvelsesmiddel til midten af agras pad.
Brug en varmesteriliseret pick til hurtigt at overføre 10 til 15 dyr fra lagerpladen til bedøvelsesdråben, før opløsningen tørrer ud. Derefter påføres en coverslip ved at placere den lige over agarosepuden og forsigtigt droppe den ned.
