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JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

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En Vivo Electroporación

 
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En Vivo Electroporación: un método específico del sitio para transfectar el pez cebra

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- En primer lugar, coloque un pez anestesiado con el lado dorsal mirando hacia arriba en una esponja pre-mojada. Antes de la electroporación, inyectar material genético en el tejido objetivo, en este caso, una parte del antebrazo llamada telencéfalo.

Ahora, presione los electrodos suavemente contra la cabeza y administre varios pulsos de corriente eléctrica. La corriente crea poros temporales en la membrana plasmática de las células electroporadas y las hace permeables. La corriente también facilita el movimiento de partículas cargadas negativamente, como plásmidos de expresión de ADN o oligonucleótidos RNAi presentes en los alrededores, en las células.

- Cubrir el telencéfalo de pescado con una pequeña cantidad de gel de ultrasonido. Para la electroporación del animal inyectado con plásmido, retire la esponja de la eyección configurada y sumerja el lado interno de las puntas del electrodo en gel de ultrasonido. Coloque la cabeza de pez entre los electrodos, con el electrodo positivo en el lado ventral de la cabeza y el electrodo negativo en el lado dorsal. están acabados.

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