January 4th, 2013
이 프로토콜에서 향기 차별의 새로운 응용 프로그램이 설명되어 있습니다. 해봐 작업은 뇌 손상에 따라 frontally로 인한인지를 평가하는 데 사용할 수있는 합리적 저렴한 작업입니다.
이 절차의 전반적인 목표는 쥐에서 두 가지 선택 전송 차별 작업의 결함을 감지하는 것입니다. 이것은 먼저 쥐가 훈련 및 테스트 재료에 익숙해짐으로써 달성됩니다. 두 번째 단계는 쥐가 무향 놀이 모래에 묻혀 있는 강화재를 발견하고 섭취하도록 훈련시키는 것입니다.
다음으로, 쥐는 모래에 섞인 두 가지 다른 냄새를 구별하도록 훈련을 받습니다. 마지막 단계는 일련의 두 가지 선택 냄새 구별에 대해 쥐를 테스트하는 것입니다. 궁극적으로 Dig Scent Discrimination Task는 부상당한 쥐의 각 냄새 쌍에서 성능 저하를 보여주는 데 사용할 수 있습니다.
뇌 손상에 대한 다른 행동 평가 조치에 비해 굴착 작업의 주요 장점은 기존 배터리에 쉽게 통합할 수 있는 간단하고 경제적인 작업이라는 것입니다. 이 과제의 함의는 뇌 손상 다음으로 가장 만연한 결손 중 하나인 인지 기능 장애를 평가하기 때문에 외상성 뇌 손상 치료로 확장됩니다. 테스트 장치를 설정하는 것으로 시작합니다.
챔버는 여기에서 볼 수 있듯이 한 마리의 동물과 두 개의 향기 컵을 수용할 수 있을 만큼 충분히 커야 합니다. 향기 컵은 땅을 파낼 수 있을 만큼 충분히 넓고 깊어야 하며 안정화할 수 있는 홀더가 있어야 합니다. 반응 편향을 보이지 않도록 미리 확립된 향을 선택하고 냄새 1g과 깨끗한 무향 놀이터 모래 110g의 비율로 혼합하십시오. 여기.
과일 루프 시리얼 조각은 강화제로 사용됩니다. 동물은 훈련 3-5일 전에 집 우리에서 강화제에 노출시키는 것이 좋습니다. 동물이 작업을 수행하도록 동기를 부여하기 위해 음식 제한이 필요하며 훈련과 테스트 모두 최소 3일 전에 시작해야 합니다.
그리고 첫 번째 세션의 경우 격일로 동물의 체중을 점검하고, 향기 컵에 강화제를 완전히 채우고, 쥐를 챔버에 넣고, 챔버를 탐색하고 습관화할 수 있도록 해야 합니다. 30분 동안 동물이 강화제를 자유롭게 섭취할 수 있도록 해야 합니다. 다음 단계는 향기 컵에 강화제를 완전히 채우고 각 컵에 소량의 무향 모래를 부어 컵의 절반 이상을 채우지 않도록 하여 강화제가 부분적으로만 덮이도록 하는 것입니다.
동물을 장치에 30 분 더 넣고 표면 파기를 촉진하기 위해 모래에 익숙해지도록하십시오. 향기 컵에 강화제와 무향 모래를 균일하게 혼합하여 채우고 여러 강화제를 노출시킵니다. 동물을 장치에 30분 동안 넣습니다.
노출된 강화제를 섭취하는 과정에서 동물들은 모래 표면 아래에서 추가 강화제를 발견해야 합니다. Scent Cups에 1 부분의 보강재와 3 부분의 무향 모래의 혼합물을 채우고 1-2 개의 보강재를 노출시켜 추가 파기를 장려합니다. 동물을 30분 동안 방에 넣습니다.
동물은 네 발로 땅을 파서 추가 보강재를 발견하고 모래에서 제거해야 합니다. 다음으로, Scent Cups에 한 부분의 보강재와 세 부분의 무향 모래의 혼합물을 채워 강화제가 노출되지 않도록 하여 전체 굴착을 촉진합니다. 동물을 장치에 30분 동안 넣습니다.
동물이 5분에서 10분 이내에 강화제를 발견하고 섭취하지 않으면 하나의 강화제를 발견하고 동물이 그것을 섭취할 시간을 주어 도움을 줍니다. 일부 동물은 완전한 파기 행동을 보여주기 위해 이 세션의 여러 인스턴스가 필요할 수 있습니다. 굴착 행동이 확립되면 모래의 깊은, 중간 및 얕은 위치에 세 개의 보강재를 배치합니다.
각 향기 컵에 동물을 방에 넣고, 각 컵에서 세 개를 모두 회수할 때까지 필요에 따라 도움을 줍니다. 모든 강화제를 회수하면 동물을 15-30초 동안 유지 장치에 넣고 냄새 컵을 재설정합니다. 다음으로, 동물을 챔버에 다시 넣고 동물이 총 4번의 시도를 완료할 때까지 이 과정을 반복합니다.
이상적으로는 동물이 방에 넣었을 때 즉시 땅을 파기 시작해야 합니다. 완전한 굴착 행동을 보여주고 향기 컵 바닥에 있는 보강재를 회수합니다. 다음으로 각 컵에 있는 모래 깊이의 절반에 단일 보강재를 놓습니다.
동물을 챔버에 넣고 두 강화제를 모두 회수한 다음 유지 장치에 넣으십시오.30초 동안 냄새 컵을 재설정하고 이 과정을 반복합니다. 총 4번의 시도에서 동물은 더 빨리 땅을 파기 시작해야 하며 연구자의 최소한의 도움이 필요합니다. 다음 단계는 모의 차별 테스트입니다.
마지막 세션에서 설명한 대로 컵을 채우고 동물이 두 강화제를 모두 회수할 수 있도록 30초를 줍니다. 둘 다 회수되었을 때 또는 30초 후에 동물을 방에서 꺼냅니다. 테스트 단계에서 사용할 시도 수에 대해 이 작업을 반복합니다.
동물들은 방에 다시 들어갔을 때 빠르게 땅을 파는 법을 배워야 한다. 동물은 30초 이내에 두 강화제를 모두 회수할 수 없습니다. 더 많은 시간이나 시도를 제공하십시오.
결국 동물은 속도를 높일 것입니다. 그러나 동물이 계속해서 매우 느리게 행동하면 약 5-10분 동안 휴식을 취하기 위해 전체 청소 장치에 넣으십시오. 휴식이 끝나면 동물을 상자에 다시 넣고 다시 시도하십시오.
동물의 수행이 느리거나 전혀 반응하지 않는 경우 하루 동안 포만감을 느끼거나 배부르게 보낼 수 있으므로 테스트를 계속해야 할 수 있습니다. 다음 차별 테스트를 시작하려면 강화제와 쌍을 이룰 상승을 선택하고 앞서 설명한 것처럼 모래를 준비하지 않을 다른 상승을 선택하십시오. 다음으로, 앞에서 본 것처럼 챔버를 설정하고 향이 나는 모래가 들어 있는 컵 중 하나에 보강재를 놓습니다.
각 평가판에 대한 데이터는 수동으로 기록할 수 있으며 올바른 선택 또는 잘못된 선택 지연 시간을 포함해야 합니다. 쥐가 실험을 시작하기 위해 시간을 초과하는 굴착 및 실험을 시작하려면 각 컵에서 뒤쪽 등거리를 향하는 방에 동물을 놓습니다. 동물을 한 컵에 더 가깝게 놓으면 편향이 발생할 가능성이 높아질 수 있습니다.
동물이 올바르게 구별하면 강화제를 회수하여 섭취하도록 한 다음 30초 동안 보관 장치로 옮깁니다. 시간이 초과되거나 잘못 선택한 경우 자체적으로 수정되기 직전에 제거하고 고정 장치에 넣으십시오. 선택한 횟수만큼 이 과정을 반복하여 동물이 미리 결정된 기준을 달성할 때까지 강화자를 재설정하고 각 시도 사이에 위치를 무작위로 지정합니다.
여러 다른 테스트 단계에서 가짜 통제 및 정면 부상 쥐의 일반적인 성능이 여기에 나와 있습니다. 이 예에서 데이터는 각 그룹의 개별 쥐에 대한 데이터 포인트를 나타내는 흰색 점이 있는 막대 그래프로 표시됩니다. 점선은 기회 수준에서의 성능을 나타냅니다.
여기서 동일한 데이터가 선 그래프로 표시됩니다. 부상 전 차별 획득에는 차이가 없었습니다. 그러나 부상 후 가짜 쥐는 부상당한 쥐와 비교할 때 더 정확하게 작업을 수행합니다.
차별을 역전시켰을 때, 부상당한 쥐는 우연한 성능 이하로 떨어졌습니다. 마찬가지로, 새로운 냄새 구별에서 정면에 부상을 입은 쥐는 새로운 짝을 배우는 데 어려움을 겪었고 확률 이하의 성능을 유지했습니다. 이 그래프는 여러 다른 단계에 걸쳐 가짜 대 편측 두정엽 손상 쥐의 일반적인 성능을 보여줍니다.
여기서 데이터는 개별 쥐에 대한 데이터 포인트를 나타내는 흰색 점이 있는 막대 그래프로 표시됩니다. 여기서 각 그룹에서는 동일한 데이터가 선 그래프로 표시됩니다. 일방적으로 부상을 입은 쥐가 수행한 차별에 대해서는 그룹 간에 차이가 없거나 경우에 따라 부상 후 가짜 수준보다 약간 더 높았습니다.
이 작업의 교육 부분은 4시간 이내에 완료할 수 있습니다. 검사는 연구자가 적절하다고 생각하는 만큼 많은 시간이 걸릴 수 있지만, 이 비디오를 시청한 후에는 뇌 손상 후 결손 평가를 위해 단순화된 세트 차별 작업을 관리하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.
이 프로토콜은 쥐의 뇌 손상 후 전두엽 매개 인지를 평가하는 Dig 작업을 사용한 새로운 냄새 식별 응용 프로그램을 설명합니다. 이 작업은 경제적이며 기존 행동 평가에 쉽게 통합할 수 있습니다.