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원심분리기 소개

Overview

원심분리기는 전 세계 거의 모든 연구실에서 사용되는 기기입니다. 원심분리는 원심분리기가 복잡한 혼합물의 성분을 분리하는 데 사용되는 과정이다. 매우 빠른 속도로 실험실 샘플을 회전시킴으로써, 주어진 혼합물의 구성 요소는 원심력을 적용하여 더 조밀한 입자가 회전축에서 멀리 이동하고 이를 향해 이동합니다. 이러한 입자는 튜브 의 바닥에 있는 퇴적물을 펠릿으로 알려져 있으며, 이 격리된 표본 또는 나머지 용액인 상체는 추가 처리 또는 분석될 수 있다. 이 비디오는 원심 분리의 기본 원칙과 악기의 기본 작동에 학생을 소개하기위한 것입니다. 예를 들어 분당 회전에서 원심분리 속도 또는 RPM은 로터 크기와 무관한 원심분리의 크기를 측정하기 때문에 상대적인 원심력 또는 RCF와 대조된다. 개념과 기본 사용 외에도 원심분리와 관련된 안전 예방 조치뿐만 아니라 존재하는 원심분리기 및 원심분리기 로터의 유형에 대해 논의됩니다.

Procedure

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원심분리기는 전 세계 거의 모든 생물의학 연구실에서 사용되는 기기입니다.

원심분리는 원심분리기가 복잡한 혼합물의 성분을 분리하는 데 사용되는 과정이다.

매우 빠른 속도로 실험실 샘플을 회전시킴으로써, 주어진 혼합물의 구성 요소는 원심력을 적용하여 더 조밀한 입자가 회전축에서 멀리 이동하고 이를 향해 이동합니다. 이러한 입자는 튜브 의 바닥에 있는 퇴적물을 펠릿으로 알려져 있으며, 이 격리된 표본 또는 나머지 용액인 상체는 추가 처리 또는 분석될 수 있다.

원심분리기의 원리 성분은 고속으로 회전하는 움직이는 부품인 로터입니다.

로터는 위치에 고정될 수 있거나 원심분리기는 스핀들(spindle)이라고 불리는 부품 위에 고정된 여러 로터를 사용할 수 있습니다.

일반적으로 원심분리기 로터는 샘플이 날아가는 것을 방지하기 위해 단단히 나사로 고정된 뚜껑을 갖습니다.

많은 원심분리기는 스핀 중에 내부 온도를 제어할 수 있는 냉장 장치를 갖습니다.

또한 각 실행에 대한 매개 변수를 입력하기 위한 노브 또는 버튼이 있으며, 여기에는 스핀의 지속 시간, 온도 및 속도 또는 상대력 측면에서 스핀의 크기가 포함될 수 있습니다.

회전 속도는 RPM 또는 분당 회전으로 측정됩니다. RPM은 입자를 혼합물에서 분리시키는 원심분리기의 속도가 아니라 이러한 입자에 작용하는 힘이기 때문에 까다로운 값입니다.

입자에서 작용하는 힘은 원심분리기 로터의 반경과 관련이 있으며, 상이한 원심분리기는 서로 다른 로터 크기를 가지므로 동일한 속도 또는 RPM으로 다른 힘을 적용할 수 있습니다.

원심분리 강도는 상대원심력 또는 RCF로 정량화될 수도 있다. RCF는 일반적으로 지구의 중력 가속의 배수로 제시된다.

RCF는 로터 반경의 산물과 각 속도의 제곱을 지구의 중력 가속으로 나눈 값으로 표현된다.

RCF는 센티미터로 측정된 원심분리기의 반경을 의미하는 다음 방정식에 의해 RPM과 관련이 있을 수 있다.

이 방정식을 사용하면 실패한 실험이나 성공적인 실험간의 차이를 의미할 수 있지만 모든 새 절차에 대해 이 계산을 적용할 필요는 없습니다. 원심분리기는 종종 RCF를 RPM으로 아주 쉽게 변환하는 데 도움이 되는 노모그램이 함께 제공됩니다. 눈금자를 사용하여 RCF를 얻기 위해 원심분리기의 반지름과 지정된 RPM 값을 연결합니다.

시료를 회전하기 시작하려면 온도를 고려합니다. 냉장 원심분리기를 사용하는 경우, 스핀을 시작하기 전에 기계 내부 온도가 원하는 값에 도달하거나 로터를 냉각하는 다른 방법을 찾을 수 있습니다.

스핀 바로 전에 튜브의 모든 캡이 조여지고 안전합니다.

튜브를 로드할 때 각 샘플이 바로 맞은편에 있는 다른 샘플과 균형을 이루지 않도록 합니다.

튜브가 하나만 있다면 카운터웨이트 역할을 할 수 있는 튜브를 다른 튜브로 만 드십시오.

3개의 튜브가 있는 경우 삼각형으로 배열하여 서로 멀리 떨어져 있습니다.

원심분리기의 가중치 균형은 매우 중요합니다. 원심분리기 로터는 고속으로 도달하며 운동 에너지가 많이 있습니다. 부적절하게 균형을 이루면 원심분리기 전체가 휴게소에서 추진되어 심각한 피해를 입을 수 있습니다.

로터와 뚜껑이 안전하다는 것을 확인한 후 원심분리기를 시작하고 원하는 속도에 도달할 때까지 걸어보습니다. 당신은 문제가 전화와 도움이 와서 실험실의 경험이 풍부한 구성원이 있는 경우.

원심분리가 완료되면 나머지 용액또는 상류체와 분리된 펠릿의 튜브 바닥에 생물학적 표본을 볼 수 있어야 합니다.

상체는 그것을 해독하여 제거 할 수 있습니다 - 그것을 쏟아 붓기위한 멋진 이름, 또는 흡인 될 수 있습니다 - 그것을 제거하기 위해 흡입을 사용하는 멋진 용어.

그런 다음 정제된 시편을 재일시 중단이라는 프로세스를 통해 용액으로 반환할 수 있습니다. 원심 분리 또는 회전 세포의 반복, 세포를 심고 버퍼에서 재중단한 다음, 종종 세포를 세척하는 것으로 지칭된다.

원심분리의 몇 가지 기초를 보았으니, 원심분리기의 일부 유형과 그들과 함께 수행할 수 있는 절차를 살펴볼 시간입니다.

고정 각도 로터 원심분리기는 아마도 실험실에서 발생할 이 계측기의 가장 일반적인 유형일 것입니다. 많은 테이블 상단 원심분리기는 이 범주에 적합합니다.

튜브가 고정및 각진 위치에 있는 이러한 원심분리기는 차동 원심분리 프로토콜에 사용됩니다. 이러한 프로토콜에서, 다른 속도로 원심 분리의 시리즈는 동물 세포 와 같은 생물학적 표본을 정화하는 데 사용할 수 있습니다. 전형적으로, 이러한 프로토콜은 여러 세포 세척 단계를 포함한다.

고정 각도 로터와 는 달리 스윙 로터는 유연한 튜브 홀더를 가지고 있어 샘플이 바깥쪽으로 회전할 수 있습니다. 이 로터는 생물학적 샘플이 그라데이션 미디어의 뚜렷한 층으로 이동하는 밀도 그라데이션 원심분리와 같은 응용 분야에서 유용합니다. 원심분리의 이 모형은 한 세포 모형을 다른 세포에서 빨리 격리하거나 개별 소기관을 격리하는 데 유용합니다.

마지막으로, 초원심분리기는 실험실에서 찾을 수 있는 모든 원심분리기의 큰 형제입니다. 그것은 DNA 또는 바이러스 같이 작은 입자의 격리에 잘 적합하게 70,000 rpm의 초과로 회전할 수 있습니다.

이 원심분리기의 고속으로 인해 하중이 제대로 균형을 이루고 로터와 뚜껑이 모두 안전하도록 주의해야 합니다.

당신은 단지 원심 분리에 JoVE의 소개를 보았다. 이 비디오에서는 원심분리기가 무엇이며 어떻게 작동하는지, 원심분리기를 운영하고 실행하는 방법, 일부 안전 예방 조치 및 원심 분리의 다양한 응용 분야가 검토되었습니다. 시청 주셔서 감사하고 튜브의 균형을 기억하십시오.

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