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마이크로피펫터 소개

Overview

마이크로 파이프는 액체 용액의 마이크로 볼륨을 전송하는 데 사용되는 일반적인 실험실 기기입니다. 마이크로파이프는 0.5~5000μl 사이의 정확한 체적 이동을 위해 다양한 크기로 제공되며 각 계측기는 세 가지 크기의 일회용 팁 중 하나를 필요로 합니다. 마이크로피펫토르는 파이펫 샤프트에서 공기를 대체하여 액체를 생성된 진공으로 끌어들이도록 합니다. 그들의 사용은 다양한 세포 기반 분석법에 대한 세포 현탁액을 전송하고, 다른 분석 기술에 대한 샘플을 적재하고, 조직을 단일 세포 현탁액으로 기계적으로 방해하는 것을 포함합니다. 마이크로 파이프토르는 약간의 지시와 연습으로 사용하기 쉬운 매우 유용한 실험실 도구입니다. 이 비디오에서 JoVE는 처음 사용자에게 실험실에서 마이크로 파이프를 사용하는 모든 팁, 트릭 및 사용 및 아웃을 보여줍니다.

Procedure

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마이크로 파이프는 소량의 액체를 정확하게 측정하는 데 사용되는 중요한 기기입니다. 전 세계 수많은 연구 실험실에서 찾을 수 있는 이 연구 도구는 여러 모양과 크기로 제공됩니다. 그러나 마이크로 파이프터 간의 변화에도 불구하고 모든 액체는 마이크로 리터 양의 액체를 정확하게 측정하는 유사한 방식으로 작동합니다. 마이크로 파이프는 일회용 팁과 함께 사용되며, 마이크로 파이프토르와 같은 다양한 크기로 제공됩니다.

모든 마이크로 파이프는 액체를 흡입하고 분배하기 위한 동일한 기본 구성 요소를 공유합니다. 플런저는 파이펫터 의 상단에서 발견되며 우울하거나 방출되는 위치에 따라 액체를 끌어들이거나 추방하는 데 사용됩니다.

볼륨 조정 다이얼은 전송할 액체의 부피로 변경하는 데 사용됩니다.

볼륨 판독 디스플레이는 위에서 아래로 읽습니다. 사용되는 마이크로 파이프에 따라 숫자는 볼륨 측정의 다양한 크기의 순서를 반영합니다. 여기에서 370 마이크로리터에 대한 측정값을 볼 수 있습니다.

일회용 팁은 마이크로파이프터 의 바닥에 로드됩니다.

팁 꺼내기 버튼과 팁 배출 샤프트는 함께 작동하여 버려야 할 때 파이펫 팁을 배출합니다.

마이크로파이프터 제품군에는 정확한 볼륨 범위를 전송하는 다양한 크기의 여러 구성원이 포함됩니다.

여기에서 가족이 각각 전송할 수 있는 볼륨 범위에 따라 줄지어 있는 것을 볼 수 있습니다. 예를 들어, 파파 P-1000은 200-1000 μl 사이를 제공하며, 무리의 아기인 P-2는 0.2-2 μl 사이를 전달합니다.

각 가족 구성원은 플런저 상단의 숫자와 색상으로 인식할 수 있으며, 이는 그들이 누구인지, 얼마나 많은 볼륨을 편안하게 옮길 수 있는지를 분명하게 합니다.

때때로, 다른 마이크로 파이프 친척은 삼촌 P5000, 아줌마 P100, 사촌 P10과 같은 실험을 위해 나타납니다. 이 확장 제품군은 함께 0.2-5000 μl 의 부피에서 액체를 이동하는 데 도움을 줄 수 있습니다.

액체의 정확하고 정확한 전송을 보장하기 위해, 피펫 팁의 다른 크기, 종종, 항상, 인식의 용이성을 위해 색상 코딩및 피페토의 다른 크기에 사용된다. 전송된 볼륨과 관련하여 흰색 마이크로파이프터 팁은 일반적으로 0.5-2.5 μl 사이를 전송하며 노란색 팁은 1-200 μl, 파란색 팁은 200에서 1000 μl로 전송됩니다.

마이크로 파이프를 사용하는 경우 먼저 전송하려는 볼륨에 적합한 범위의 계측기를 선택합니다. pipettor의 올바른 선택은 성공하거나 실패한 실험의 차이를 의미할 수 있습니다.

먼저 다이얼을 원하는 볼륨으로 조정합니다. 포부 볼륨을 늘리려면 다이얼을 시계 반대 방향으로 돌려 원하는 볼륨을 1/3 회전으로 전달한 다음 최종 마크로 천천히 감소합니다. 볼륨을 줄이려면 다이얼을 시계 방향으로 돌립니다.

볼륨 판독의 이러한 숫자는 마이크로 파이프에 따라 크기가 다릅니다. 예를 들어 왼쪽에는 P1000이 370 μl을 읽는 것을 볼 수 있습니다. 수천 개의 장소에 는 0, 수백 개의 장소에 3, 그리고 수십 개의 장소에 7이 있습니다. 오른쪽에는 P200이 있으며, 159 μl과 수백 개의 장소에 1, 수십 개의 장소에서 5, 9를 표시합니다.

볼륨이 설정되면 팁을 선택합니다.

이제 손의 손바닥에 몸의 좁은 부분과 검지 손가락 위에 돌출이있는 수직 위치에 마이크로 파이프를 잡고,

라이트 압력을 사용하여 플런저를 첫 번째 정류장의 중간쯤에 누르거나 더 많은 저항을 느끼기 시작할 때.

이 동작은 파이펫 끝에서 공기를 대체합니다.

플런저를 우울하게 유지하여 1-3mm 사이의 팁을 샘플에 담급합니다. 플런저를 나머지 위치로 부드럽게 풀어 놓고 액체가 팁으로 이동할 때까지 1초 기다린 다음 샘플에서 파이펫을 제거합니다.

플런저가 나머지 위치로 다시 방출되면 변위 된 공기에 의해 생성된 진공으로 액체가 그려집니다.

팁을 검사하여 원하는 양의 액체가 작성되었으며 팁에 기포가 포함되어 있지 않은지 확인합니다.

시료를 원하는 용기로 옮길 때, 수신 용기의 내부 벽에 대해 10-45° 각도로 마이크로파이프를 고정하십시오. 이렇게 하면 끝에 거품이 형성되는 것을 방지할 수 있습니다. 액체를 1번 정지시로 가볍게 배출하고 액체를 분배하기 시작한 다음, 더 강한 저항을 적용한 다음 플런저를 두 번째 정류장까지 우울하여 끝에서 마지막 액체비트를 "날려버리십시오".

용기에서 팁을 완전히 제거한 다음 플런저를 나머지 위치로 다시 놓습니다.

이제 배출 버튼을 사용하여 파이펫 팁을 적절한 리셉터클에 조심스럽게 버리십시오. 배출 된 팁은 투사체 역할을 할 수 있으며 잠재적으로 동료 실험실 동료를 다치게 할 수 있기 때문에 무엇을하고 있는지에주의를 기울이십시오.

마이크로파이프터가 잘 작동하고 내부 볼륨 조정 메커니즘을 유지하려면 볼륨 다이얼을 마이크로파이프터의 특정 범위 위 또는 아래에 설정하지 마십시오. 계측기를 파손할 수 있습니다.

샘플 간의 교차 오염을 방지하려면 각 볼륨 전송 후 팁을 변경합니다.

마이크로 파이프터로 작업할 때 작업자 일관성이 중요합니다. 매끄러운 플런저 압력은 최적의 실험 결과를 얻을 것이다. 마지막으로, 마이크로 파이프를 최고 성능상태로 유지하려면 사용하지 않을 때항상 장비를 똑바로 세워 두십시오.

이제 마이크로 파이프토르 사용의 기본 작동 및 원칙을 다루었으니, 마이크로 볼륨 전송을 위한 몇 가지 일반적인 실험실 응용 프로그램과 이 기기의 변형에 대해 살펴보겠습니다.

마이크로 파이프는 다양한 실험을 위해 세포 현탁액을 배양 판으로 옮기는 데 자주 사용됩니다.

특수 한 팁과 함께, 마이크로 파이프를 사용 하 고 DNA 젤 전기 포 와 같은 분석 기술에 대 한 샘플을 주의 하 게 로드 하는 데 사용할 수 있습니다.

마이크로 파이프는 또한 단일 세포 현탁액을 얻기 위해 조직을 분해 역학할 수 있습니다.

공기 변위를 기반으로 작동하는 마이크로 파이프터의 변종도 실험실에서 찾을 수 있습니다.

리피터 파이펫을 사용하면 더 큰 양의 솔루션에 대한 초기 포부 후 더 작은 볼륨의 직렬 파이펫팅을 허용합니다. 파이펫은 동일한 양의 샘플을 많은 수의 리셉터클로 전송하는 데 정말 유용합니다.

멀티채널 파이펫은 일반적으로 20-200 μl 볼륨 범위에서 볼륨을 전송하는 데 사용되며 96개의 웰 플레이트의 전체 행을 적재하는 데 유용합니다.

마이크로 파이프토르에 대한 JoVE 소개를 방금 시청했습니다.

이 비디오에서는 마이크로 파이프터가 무엇이며 어떻게 작동하는지, 액체 볼륨 샘플을 흡습하고 분배하는 방법, 일부 안전 예방 조치 및 마이크로 파이프터의 다양한 응용 분야가 검토되었습니다. 보고 주셔서 감사하고 실험에 적합한 파이펫을 선택 기억하십시오.

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