Yüksek-Kalite Dijital Video Edinme Drosophila Bir Yanal Perspektifinden Larva ve Yetişkin Davranışları

Mevcut bilimsel yayıncılık modları, dijital video medya dosyalarının bir makaleye ek materyal olarak sunulmasını desteklemektedir. Bu video medya dosyaları genellikle okuyucuya metinde veya tek bir fotoğrafta anlatılandan daha kolay gözlemlenen nitel bilgileri iletmek için kullanılır. Burada, drosophila mutant fenotiplerinin yanal bir perspektiften yüksek kaliteli dijital videosunu elde etmek için basit bir metodolojinin ana hatlarını çiziyoruz, Bu protokol, bir dijital kameraya bağlı hemen hemen her stereo mikroskop sistemine kolayca uyarlanabilmesine rağmen, video elde etme özelliği ile, laboratuvarımızda kullandığımız sistem hakkında ayrıntılar verilmektedir.

Videomuzu, ticari bir Canon G 61 dijital kameraya bağlı bir Olympus SZ 10 oküler stereo mikroskop kullanarak elde ediyoruz. Stereo mikroskobun fotoğraf tüpü portunun yarım XC montajı, bir XC montajı ile yeniden yapılandırıldı. Bir XC yuvasına bir dijital kamera kuplörü monte edildi.

Kamera kuplörüne 58 milimetre ila 48 milimetre ve 48 milimetre ila 43 milimetre arasında iki düşürme halkası monte edildi. Canon G 10 fotoğraf makinesi için bir adaptör kiti monte edildi. Canon G 10 fotoğraf makinesiyle bağlantı kurma Görüntüye.

Üçüncüsü Yanal perspektiften yıldız larvalarında, stereo mikroskobun sahnesine kalıcı bir işaretleyici bantlayın. İşaretleyici kapağı, kamera LCD ekranında gözlemlenen dikey alanın yaklaşık dörtte birini kaplamalıdır. İşaretleyicileri alternatif bir aşama olarak kullanıyoruz çünkü bunlar, işaretleyici kapağında görüntülenen larva genotiplerini renk kodlamasına ve ayırt etmemize izin veren çeşitli renklere sahip olduklarından.

Kamera LCD ekranında gözlemlenen görüş alanının sol ve sağ sınırlarını işaretleyin. Görüntülemek için üçüncü bir instar larvası seçin. Larvayı suda iyice yıkayarak temiz olduğundan emin olun.

Mikroskobu işaretleyici kapağın kenarına odaklayın ve dijital video almaya başlayın. Larvaları, görüş alanının hemen dışında, işaretleyici kapağının yan tarafına yerleştirin. Larvaların işaretleyici başlığın yan tarafına yerleştirilmesi, kameranın larvaların hareketini kaydetmesine olanak tanır Yanal bir perspektiften bakıldığında, larvaların suyla nemli kalmasına yardımcı olur, böylece işaretleyici kapağın yanından düşmezler.

Ancak çok fazla su kullanmamaya dikkat edin. Larvaları nazikçe dürtün ve dürtün Görüş alanı boyunca sürünmeye zorlamak için bir boya fırçası ile. Sabırlı olun.

Larvalar nadiren işbirliği yapar ve genellikle tarlada düz bir şekilde sürünene kadar birçok kez başlangıç noktasına geri döndürülmelidir. Genellikle 10 ila 15 dakikalık kesintisiz dijital video çekimi kaydederiz ve gereksiz tüm görüntüleri kırpıp kaldırırız. Yetişkin Ultra sophala'yı görüntülemek için dijital video düzenleme Yazılımı ile satın alma sonrası.

Yanal perspektiften bakıldığında, sinekleri tutmak için kafes olarak tek kullanımlık 1,5 mililitrelik spektroskopik polistiren küvetler kullanıyoruz. Daha küçük hacimli qve'yi tercih ediyoruz çünkü azaltılmış Hacim kapasitesi sineğin hareketini kısıtlıyor. Yetişkin Drosophila'yı qve'ye yerleştirin ve ucunu küçük bir pamuk top ile tıkayın.

Pamuk topunun geniş kapak alanını kaplayacak kadar sıkı paketlendiğinden emin olun. Qve'yi mikroskop tablasına yerleştirin ve kameradaki LCD monitörle düzgün bir şekilde hizalayın. Mikroskobu odaklayın ve dijital video almaya başlayın.

Genellikle 30 ila 45 dakikalık kesintisiz dijital film çekimi kaydederiz ve dijital video düzenleme Yazılımı ile çekim sonrası tüm gereksiz görüntüleri kırpıp kaldırırız. Anormal tarama fenotiplerine sahip Drosophila üçüncü instar larvalarını görselleştirmek için bu tekniği başarıyla kullandık. Bu tekniği, yetişkin mutant fenotiplerinin yanı sıra yetişkin tımar davranışlarını görselleştirmek için de kullandık.

Yetişkinlerde drosophila larvalarının yüksek kaliteli dijital videosunu elde etmek için çok basit ve erişilebilir bir teknik gösterdik. Bu yaklaşımın yararı, videonun yanal bir perspektiften elde edilmesi ve anormal lokomotif davranışlarının daha bilgilendirici yan görünümden doğrudan gözlemlenmesine ve analizine izin vermesidir. İzlediğiniz için teşekkürler ve deneylerinizde iyi şanslar.