October 29th, 2014
Ileokolische Resektion wird häufig bei verschiedenen menschlichen Krankheiten durchgeführt; es ist jedoch wenig über den Einfluss der Darmresektion auf chirurgische Erkrankungen bekannt. Dieser Artikel enthält Anweisungen zur Durchführung des Verfahrens bei Mäusen mit hohem Erfolg und bietet ein Mittel, um die Auswirkungen der ileokolischen Resektion in Krankheitsmodellen zu untersuchen.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, das terminale Ileum und den Blinddarm zu resezieren und eine IOC-Kolikanastomose durchzuführen. Dies wird durch die erste Ligation, die ileozökale Blutversorgung, erreicht. Der zweite Schritt besteht darin, den ischämischen Teil des Darms zu entfernen.
Als nächstes wird die IOC-Kolikanastomose konstruiert. Der letzte Schritt besteht darin, die Anastomose auf Integrität und Durchgängigkeit zu untersuchen. Letztendlich die Auswirkungen der IOC-Koliken.
Die Resektion kann in verschiedenen Krankheitsmodellen bestimmt werden. Daher ist die visuelle Demonstration dieser Methode von entscheidender Bedeutung, da die Resektion und die Anastomose ein hohes Maß an anatomischer Detailgenauigkeit erfordern. Zu Beginn der Übergabe der Tiere in einen neuen, sauberen Käfig, in dem 24 Stunden lang keine feste Nahrung vorhanden ist, haben Sie bis zum Zeitpunkt des Eingriffs freien Zugang zu Wasser und flüssigem Futter.
Autoklavieren Sie alle für den Eingriff erforderlichen Instrumente im Voraus und reinigen Sie die Operationsfläche und den Narkose-Nasenkonus mit 70 % Ethanol. Ordnen Sie als Nächstes ein Operationsmikroskop, ein Anästhesiegerät und chirurgisches Zubehör bequem im Arbeitsbereich an. Instrumente, Nähte, Wattestäbchen und eine 10-Milliliter-Spritze sollten an einer Stelle platziert werden, die während der Arbeit einen einfachen Zugang ermöglicht.
Stellen Sie eine Wärmelampe über dem Kopf auf, um während des Eingriffs Wärme und Licht für die Operationsfläche bereitzustellen. Zum Schluss ein konisches 50-Milliliter-Röhrchen mit 0,9 % Kochsalzlösung und ein 1,5-Milliliter-Röhrchen mit Vaseline füllen und in der Nähe der Arbeitsfläche platzieren. Wenn Sie bereit sind zu beginnen, bestätigen Sie die Tiefe der Sedierung bei einer anästhesierten Maus.
Sobald Sie vollständig betäubt sind, verringern Sie die isof-Fluor- und Sauerstoff-Durchflussrate. Überprüfen Sie regelmäßig die Schmerzreaktion während des Eingriffs und passen Sie die isof-Fluorflussrate entsprechend an. Nachdem Sie Vaseline auf die Augen aufgetragen haben, immobilisieren Sie die Maus in Rückenlage, wobei die Gliedmaßen mit transparentem Klebeband gesichert sind.
Reinigen Sie anschließend den Bauch mit Povidon-Jodlösung. Ziehen Sie anschließend neue sterile Handschuhe an. Machen Sie einen 1,5 Zentimeter langen Schnitt in der oberen Mittellinie des Bauches, um die Faszie und das Bauchfell freizulegen Sobald sie freigelegt sind, schneiden Sie durch die lineare Alba, um den Bauchfellinhalt freizulegen.
Im Gegensatz zum Menschen befindet sich das Mausseum typischerweise im linken oberen Quadranten des Abdomens. Sobald es identifiziert ist, fassen Sie den Blinddarm vorsichtig mit einer Pinzette und führen Sie ihn durch den Schnitt ein. Legen Sie sterile Gaze auf die Bauchoberfläche und fächern Sie mit angefeuchteten Wattestäbchen etwa drei Zentimeter des terminalen Ileums auf, das sich vom Blinddarm erstreckt.
Stellen Sie sicher, dass der freiliegende Darm während des gesamten Eingriffs mit 0,9 % Kochsalzlösung feucht gehalten wird. Identifizieren Sie mit einem Operationsmikroskop die Ileozökalarterie, die von der Arteria mesenterica superior entlang des Dickdarms abzweigt. Präpariere das avaskuläre Gewebe, das an die Ileozökalarterie angrenzt.
Sobald sie isoliert ist, umkreisen und ligieren Sie die Arterie mit einer 5.0 Seidenkrawatte. Lokalisieren Sie als Nächstes die regionale Blutversorgung zum terminalen Ileum und wählen Sie eine Transsektion 0,1 0,5 bis zwei Zentimeter proximal des ileozökalen Übergangs. Lizieren Sie die Äste wie zuvor gezeigt zu diesem Abschnitt des Ileums und teilen Sie die Arterien mit einer Mikropräparierschere.
Entfernen Sie die ischämischen Anteile des Ileums und des Dickdarms und stellen Sie sicher, dass die durchtrennten Enden ausreichend durchblutet sind. Es ist oft hilfreich, das Ileum zu spateln, indem man es in einem 30-Grad-Winkel teilt, um den Durchmesser des Lumens zu vergrößern, damit es dem Dickdarm besser entspricht. Richten Sie als Nächstes die durchtrennten Enden von Ileum und Dickdarm auf der Gaze aus und stellen Sie sicher, dass die mesenterialen Ränder jeweils ausgerichtet sind.
Konstruieren Sie die Anastomose, indem Sie das durchtrennte Ende des Ileums an das durchtrennte Ende des Dickdarms annähern. Mit unterbrochenen acht oh-Polypropylen-Nähten sollte der erste Stich an der mesenterialen Grenze platziert werden, gefolgt von den folgenden Nähten, die alle 0,5 Millimeter bis zur IOC-Kolik platziert werden. Die Anastomose ist wasserdicht.
Wenn Sie die Nahtnadel durch das Ileum und den Dickdarm führen, achten Sie darauf, dass die Schnittkante nicht gerollt ist und dass die Nadel 0,5 Millimeter von den Schnittkanten des Darms entfernt ist. Eine typische Anastomose erfordert 14 bis 16 unterbrochene Nähte. Testen Sie die Integrität und Durchgängigkeit der Anastomose nach Abschluss, indem Sie ein Wattestäbchen proximal zu distal über das Ileum rollen.
Um den Inhalt durch den Dünndarm zu pressen, sollte der Inhalt frei in den Dickdarm gelangen, ohne dass Anastomosen austreten. Spülen Sie den freiliegenden Darm mit drei bis vier Millilitern 0,9%iger Kochsalzlösung aus der 10-Milliliter-Spritze, um den Stuhl von der Darmoberfläche zu spülen, bevor Sie den Darm wieder in die Bauchhöhle abgeben. Mit zwei Millilitern 0,9% Kochsalzlösung.
Spülen Sie die Bauchhöhle. Lassen Sie diese Flüssigkeit ab, indem Sie seitlich sanften Druck auf die Bauchdecke ausüben. Verschließen Sie den Schnitt mit einer 3.0 Seidennaht.
Unterbrechen Sie den Fluss von Isofluran und verabreichen Sie ein Analgetikum zur postoperativen Schmerzkontrolle. Beobachten Sie die Tiere unter der Wärmelampe, bis sie beweglich sind, und setzen Sie sie dann in einen ständig beheizten Käfig um. Überwachen Sie die Tiere in einem ständig beheizten Käfig auf Anzeichen von Stress.
Für den Rest des Tages bringen Sie die Tiere zurück in die Tierpflegeeinrichtung in einen neuen sterilen Käfig mit Zugang zu flüssigem Futter und Wasser und fügen Sie die Libido hinzu. Kontrollieren Sie die Tiere am Morgen des ersten postoperativen Tages. Wenn sie unangenehm erscheinen, verabreichen Sie bis zum zweiten postoperativen Tag eine weitere Dosis Buprenorphin.
Sie sollten vollständig genesen erscheinen. Stuhlgang und Nahrungsaufnahme sind positive Zeichen der Erholung. Wenn dies beobachtet wird, können sie wieder eine solide Chow-Diät aufnehmen.
Auch hier unterschied sich das Körpergewicht nicht signifikant zwischen den Gruppen, wenn man den Ausgangswert mit dem postoperativen Tag 14 und 28 vergleicht. Die h- und d-gefärbten h- und d-Abschnitte des Ileums und des Dickdarms sind aufgereiht, um die Flugbahn der Nahtnadel durch das Gewebe von Punkt A bis Punkt B zu demonstrieren. Der Knoten sollte an Punkt C gebunden werden. Sobald diese Technik gemeistert ist, kann sie bei richtiger Durchführung in etwa 45 Minuten durchgeführt werden.
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Dieser Artikel bietet ein detailliertes Verfahren zur Durchführung einer ileokolen Resektion bei Mäusen, eine Technik, die für die Untersuchung der Auswirkungen einer Darmresektion bei verschiedenen Krankheiten unerlässlich ist. Die Methode zielt darauf ab, das Verständnis chirurgischer Erkrankungen im Zusammenhang mit Darmresektion zu verbessern.