Behavior
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Automatiseret rotte single-pellet nå med 3-dimensionel rekonstruktion af pote og ciffer Forløbskurver
Summary July 10th, 2019
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Gnaver faglært nå er almindeligt anvendt til at studere behændige færdigheder, men kræver betydelig tid og kræfter til at gennemføre opgaven og analysere adfærd. Vi beskriver en automatiseret version af dygtige nå med motion tracking og tre-dimensionelle rekonstruktion af rækkevidde forløbskurver.
Transcript
Denne metode bygger på etablerede rotte dygtige nå protokoller til at automatisere uddannelse og test giver et effektivt middel til at erhverve store datasæt relativt hurtigt. Det minimerer eksperimentatorindsats og tillader tredimensionel rekonstruktion af forelimb kinematik. Kinematik kan bruges til at vurdere virkningerne af præcist timet interventioner eller korreleret med fysiologiske optagelser.
Med nogle justeringer kan denne teknik også anvendes i mus. Begynd med at tænde lyset og placere rotten i en dygtig nå kammer. Brug vicess til at holde en pellet gennem den nå slot på forsiden af kassen.
Lad rotten spise tre piller fra forrænker. Træk pellet tilbage næste gang rotten forsøger at spise pellet fra snævler og gentag indtil rotten når til pellet med en pote mest ud af 11 når angiver pote præference. Dernæst justere pellet levering stang med den side af at nå slot kontralaterale til rottens foretrukne pote.
Placer en pellet på leveringsstangen. Brug derefter hændekraft til at lokke rotten med pellet, men direkte rotten mod leveringsstangen, så dens pote rammer pellet på stangen. Efter rotten har forsøgt 10 når til leveringsstangen uden at blive lokket, fremme rotten til næste fase.
Dernæst placere pellet levering stang baseret på rottens pote præference og sæt den til position to. Indstil pelletdredangens højdeposition ved hjælp af aktuatorfjernbetjeningen. Når leverstangen er i den korrekte højde, skal du holde det ønskede tal nede, indtil lyset blinker rødt for at indstille.
Derefter placere rotte i kammeret og agn rotten til bagsiden med en pellet. Når rotten bevæger sig langt nok til bagsiden af kammeret, at det ville bryde den infrarøde stråle, hvis den automatiserede version kørte, skal du flytte pellet leveringsstangen til position tre. Endelig skal du vente på, at rotten rækker ud efter pellet og derefter flytte pelletleveringsstangen tilbage til position to.
Placer en ny pellet på levering stangen, hvis slået ud. Gentag disse trin gradvist lokkemad rotten mindre og mindre, indtil rotten begynder at en, flytte til bagsiden for at anmode om en pellet uden at blive lokkemad, og to, straks flytte til fronten efter at have anmodet om en pellet i ryggen. Når rotten har gjort dette 10 gange, begynde uddannelse på den automatiserede opgave.
For at opsætte det automatiske system skal du tænde lyset i kammeret og genopfylde pelletbeholderen. Placer pellet leveringsstangen i henhold til rottens pote præference. Kontroller, at aktuatorpositionerne er indstillet korrekt.
Tænd derefter for computeren, og åbn det kvalificerede program. Indtast rotte ID-nummeret under emnet, og vælg potepræferencen i rullemenuen med hånden. Angiv gem stien til videoerne.
Indstil derefter sessionstiden og antallet af maksimale videoer. Indstil pellet lift varighed så godt og muliggøre tidlig rækkevidde straf. Dernæst for at tage kalibreringsbilleder, skal du placere den hjælpende hånd inde i det nånde kammer og stikke alligatorclipsen gennem det nå slot.
Hold terningen foran åbningen med alligatorclipsen. Placer derefter terningen, så den røde side vises i det øverste spejl, den grønne side i venstre spejl og den blå side i højre spejl. I adfærdsprogrammet skal du sikre dig, at roi-tærsklen er angivet til en meget stor værdi.
Klik på knappen Kør, og når kameraets initialiserede knap bliver grøn, skal du trykke på Start for at starte videoopkøb. Klik på Cal Mode og tag derefter et billede ved at klikke på Tag cal-billede. Flyt kuben en smule, og tag et andet billede.
Gentag igen for i alt tre billeder. Endelig skal du stoppe programmet ved at klikke på stop og derefter klikke på stoptegnsknappen. Fjern den hjælpende hånd og terning fra kassen.
Vær forsigtig med ikke at støde noget i adfærdskammeret efter kalibrering billeder er blevet taget den dag. Først skal du placere rotten i det dygtige kammeret. Klik på den hvide pil for at køre programmet.
Indstil derefter roi'ets position til registrering af pote ved at justere x offset, y offset, ROI-bredde og ROI-højde. Placer investeringsafkastet i sidespejlet, der viser potens dorsum direkte foran åbningen, og klik på begynd at starte programmet. Mens rotten ikke når, skal du justere den lave ROI-tærskelværdi, indtil den dynamiske ROI-udløserværdi svinger mellem nul og en.
Angiv derefter roi-tærsklen til at være betydeligt større end den dynamiske roi-udløserværdi under næsehæpper og lavere end den dynamiske roi-udløserværdi, når rotten når. Juster indtil videoer konsekvent udløses, når rotten når, men ikke når den stikker næsen gennem åbningen. Overvåg de første par forsøg for at sikre, at alt fungerer korrekt.
Når en rotte når, før du anmoder om en pellet, observere de tidlige når antallet stigning. Når en rotte når efter at have anmodet om en pellet, observere videonummer stigning, mens en kopi af videoen er gemt som en bin fil. Når sessionstiden eller det maksimale antal videoer er nået, skal du trykke på stoptegnsknappen.
Resultaterne viser, at efter 20 dage, rotter erhverve de dygtige nå opgave. Her vises rækkeviddesforløb fra en enkelt session. Dette repræsenterer kun indledende pote avancement for nem præsentation.
Yderligere, hvis pote detektionsudløseren ikke er præcist indstillet, er der betydelig variation i rammen, hvor poten overtræder det nå slot, som kan føre til variation i, når interventioner udløses under opnålse af bevægelser. Ud over omhyggelig håndtering af dyrene vil der ikke blive taget forholdsregler i denne protokol. Det er meget vigtigt at indstille roi-tærsklen korrekt, så videoer eller andre interventioner udløses på de relevante tidspunkter.
Denne metode kan parres med flere andre teknikker såsom optogenetik, calcium billeddannelse, og genetiske modeller, som kan behandle spørgsmål lige fra grundlæggende motorisk kontrol til bevægelsesforstyrrelse patofysiologi. Denne teknik tillader korrelation af detaljeret rækkevidde og forstå kinematik med fysiologiske optagelser eller interventioner giver forskerne mulighed for at besvare ikke bare hvis, men hvordan bevægelser ændre sig med neurale kredsløb ændringer.
Please enter your institutional email to check if you have access to this content
has access to
BackLogin to access JoVE
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
To receive a free trial, please fill out the form below.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You
Thank You
Thank You
