الإنسان Circadian Phenotyping واختبار الأداء اليومي في العالم الحقيقي

هناك مصطلحات ومنهجية غير متناسقة عند قياس الاختلافات الفردية في التوقيت الإيقاعي ، والتفضيل ، والسلوك. يجمع هذا البروتوكول بين تقنيات معيار الذهب لتصنيف الأنماط الظاهرية الإيقاعية وإجراء اختبارات الأداء اليومي. حسنا، الميزة الرئيسية لهذا البروتوكول هو أننا يمكن أن نقيّم بدقة الأنماط الظاهرية الإيقاعية من خلال النظر في كل من الطور circadian وسلوك النوم، وهذا يمكن القيام به مع الأفراد في بيئتهم المنزلية.

وإظهار عملية المشاركين ستكون شيريل آشروود من جامعة ساري. دعوة المشاركين الذين يستوفون معايير الاشتمال لحضور اجتماع أولي. والحصول على موافقة خطية من جميع المشاركين المهتمين بالمشاركة في التجربة.

اطلب من المشاركين إكمال استبيان ميونخ ChronoType، الذي يقيم الاختلافات الفردية في النوم، ومتغيرات الاستيقاظ والتعرض للضوء في العمل والأيام المجانية. بالنسبة لجمع العينات الفسيولوجية، قبل التسمية سبعة أنابيب جمع البولي بروبلين مليلتر مع رقم هوية المشارك، صباح أو مساء، ومن ثم عدد أخذ العينات الفردية. ويمكن أيضا أن تستخدم تسميات ملونة مختلفة لأنابيب أخذ العينات الصباح والمساء للمساعدة في التمييز بين العينات.

إعداد سجل عينة لجمع سجل لكل من الصباح والمساء بروتوكولات للسماح للمشاركين الطابع الزمني للعينات بعد أخذها، بما في ذلك رقم هوية المشارك، وتاريخ للمعلومات الموسمية، والموقع لحساب فترة الصورة. ومن الأهمية بمكان أن يستخدم الزمن العالمي لضمان عدم وجود أي مشاكل تتعلق بـ .m و .m.

رموز الوقت. قم بإثبات كيفية جمع عينات اللعاب، وإعلام المشاركين بأنه من الضروري الحصول على عينات الصباح فور الاستيقاظ قبل الخروج من السرير، وأنه يجب الحصول على عينات المساء في ضوء خافت، ويفضل أن يكون الضوء الأحمر. وينبغي للباحثين قياس هذا، إذا كان ذلك ممكنا.

إرشاد المشارك لجمع العينات في يوم حر عندما تكون قادرة على الذهاب إلى الفراش والإيقاظ في الأوقات المفضلة، دون الحاجة إلى إنذار. امنح كل مشارك جهاز مراقبة نشاط المعصم، أو الـ actigraph، ليتم ارتداؤها لمدة أسبوعين على الأقل لجمع أنماط الراحة والنشاط، وبيانات خفيفة طوال فترة الدراسة. تعيين كل actigraph لجمع بيانات actigraphy لتحليلات الراحة والنشاط، وتعيين المعلمات وفقا لما هو مطلوب.

إرشاد المشاركين إلى كيفية استخدام الـ actigraphs، وضمان ارتدائه على معصمهم غير المهيمن، ومنع الأكمام من تغطية الجهاز للسماح بجمع البيانات الخفيفة. في تركيبة مع actigraphy، وتسهيل النوم، وتحليل إيقاظ المستمدة من البيانات actigraphic، وإعطاء كل مشارك يوميات النوم التي يتعين الانتهاء منها على أساس يومي. لجمع عينة الصباح استجابة استجابة صحوة الكورتيزول، يكون المشاركين جمع العينات عند الاستيقاظ في حين لا يزال في السرير في أنابيب عينة المسمى بشكل مناسب، كل 15 دقيقة للساعة الأولى، والتقييم كل 30 دقيقة للساعة القادمة إلى ساعتين.

عندما يتم جمع جميع العينات، يجب على المشاركين تخزين عيناتهم في الفريزر عند ناقص 20 درجة مئوية حتى جمعها من قبل فريق البحث. بالنسبة للميلاتون الخفيف الخافت، يجب على المشارك الجلوس في الداخل تحت ضوء خافت، وجمع عينات اللعاب في القارورة المناسبة كل 30 دقيقة من ثلاث إلى أربع ساعات قبل وقت النوم المعتاد حتى ساعة إلى ساعتين بعد وقت النوم المعتاد. يجب على المشارك أيضا تسجيل الوقت الذي يتم أخذ كل عينة.

وينبغي للباحثين، حيثما أمكن، قياس ظروف الضوء من أجل رصد الكثافة والتركيب الطيفي. بالنسبة لأخذ العينات المسائية، من الضروري أن يفهم المشاركون أهمية الجلوس في الداخل في ظل ظروف الإضاءة الخافتة. يمكن للمشاركين استخدام المرحاض، أو تناول مشروب غير مشربين بالكافين بين العينات، طالما أنهم يجلسون مرة أخرى لمدة 15 دقيقة قبل أن يتم جمع العينة التالية.

تأكد من أن جميع الغرف الأخرى لديها نفس ظروف الإضاءة، بحيث يبقى المشارك في ضوء خافت، ويفضل أن يكون أحمر الضوء، لمدة فترة أخذ العينات. إذا تم استهلاك الطعام بين العينات ، يجب على المشاركين غسل أفواههم بالماء قبل 15 دقيقة من جمع العينة التالية. وبمجرد جمع جميع العينات، يجب على المشاركين تخزين عيناتهم في ثلاجة عند ناقص 20 درجة مئوية حتى جمعها من قبل فريق البحث.

ويمكن إجراء اختبارات الأداء النهارية في المنزل أو في المختبر، وينبغي ترتيبها وفقاً لفرضية الدراسة استناداً إلى عدد النقاط الزمنية التي يجري التحقيق فيها في أوقات محددة. عند استرجاع عينات اللعاب ومذكرات النوم ، استخراج وقت النوم اليومي والاستيقاظ مرات من يوميات النوم ، وإدخال هذه البيانات في برنامج الشركة المصنعة للحصول على المتغيرات actigraphic ذات الصلة بالدراسة. لتحديد تركيز الميلاتونين والكورتيزول في عينات المشاركين في كل وقت، قم بإجراء مناعة لاسلكية مع عينات كل مشارك وفقًا للبروتوكولات القياسية.

حساب DLMOs الفردية كنقاط زمنية التي تركيزات الميلاتونين تتجاوز اثنين من الانحرافات القياسية من مجموعات اللعاب الأساسية الثلاثة الأولية. حساب ذروة الكورتيزول كوقت أعلى تركيز الكورتيزول المسجلة خلال استجابة الصحوة الكورتيزول الصباح. يجب تخصيص متغير كـ صفر إذا كان في فئة النمط الظاهري الإيقاعي المبكر، واحد إذا كان في فئة النمط الظاهري circadian المتوسطة، واثنين إذا كان في فئة النمط الظاهري circadian المتأخر.

حساب مجموع مجموع نقاط النمط الظاهري circadian من المتغيرات الخمسة التي تم جمعها. واستناداً إلى هذه النتيجة، يمكن أيضاً تحديد الفئات الفرعية على النحو المبين في الجدول. وكان جميع المشاركين المصنفين على أنها الأنماط الظاهرية الإيقاعية في وقت مبكر درجة بين صفر واحد.

وجميع المشاركين في النمط الظاهري الإيقاعي المتأخر كان لديهم درجات تتراوح بين ثمانية إلى 10. لتأكيد نتائج هذه التجربة التمثيلية، تمت مقارنة متوسطات المجموعة لكل متغير ظاهري circadian. لم تختلف متغيرات النوم الأخرى، بما في ذلك مدة النوم والكفاءة والكمون، بشكل كبير بين المجموعتين.

وكان منتصف النوم تصحيحها في أيام مجانية ترتبط بشكل ملحوظ مع الميلاتونين ضوء خافت بداية, وقت الذروة من استجابة صحوة الكورتيزول, بداية النوم, والاستيقاظ الوقت. وأشارت هذه البيانات إلى أن مختلف مجموعات النمط الظاهري circadian أظهرت اختلافات واضحة في بداية النوم ، وأوقات الإزاحة ، وكذلك في المتغيرات الفسيولوجية. ولوحظت اختلافات نهارية كبيرة على مستوى المجموعة بأكملها بالنسبة لمقياس النعاس في كارولينسكا ومهمة اليقظة الحركية.

عندما تم تحليل كل مجموعة بشكل منفصل ، أظهرت النعاس الذاتي اختلافات نهارية كبيرة ، مع ECPs الإبلاغ عن النعاس العالي في المساء ، وأعلى LCPs’ينام في الصباح. بالنسبة لأداء اليقظة الحركية النفسية ، تم العثور على اختلافات نهارية كبيرة في LCPs ، ولكن ليس في ECPs. من المهم شرح كل خطوة من خطوات البروتوكول بوضوح والتأكد من أن المشارك يفهم خلال مقابلة الإعداد لتحقيق أقصى قدر من الامتثال للدراسة.

بمجرد تصنيف المشاركين إلى أنماط ظاهرية ، يمكن تعديل عنصر اختبار الأداء ، وتغيير التوقيت ، وتوسيع نطاقها عن طريق زيادة النقاط الزمنية ، أو تغييرها ، باستخدام مهام مختلفة ، اعتمادًا على أهداف الدراسة. يمكن استخدام هذا البروتوكول في أي دراسة تتطلب تقييمًا دقيقًا ودقيقًا للنمط الظاهري الإيقاعي كأداة فحص لمعايير التضمين والاستبعاد ، وكذلك التحكم في النمط الظاهري الإيقاعي في الأبحاث الحساسة للوقت. يوفر هذا النهج طريقة مفصلة للجمع بين علامات المرحلة البيولوجية القياسية الذهبية مع أنماط النوم الموضوعية والذاتية لتحديد الأنماط الظاهرية الإيقاعية الفردية.