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Ein standardisiertes Protokoll für Präferenztests zur Bewertung des Wohlbefindens von Fischen
Chapters
Summary February 22nd, 2020
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Ein grundlegender Aspekt bei der Beurteilung des Wohlergehens von Tieren in Gefangenschaft ist die Frage, ob die Tiere haben, was sie wollen. Hier stellen wir ein Protokoll zur Bestimmung der Haltungspräferenz im Zebrafisch (Danio rerio) in Bezug auf das Vorhandensein/Fehlen von Umweltanreicherung und Zugang zum Fließen von Wasser vor.
Transcript
Dieses Protokoll gibt uns ein besseres Verständnis dafür, was Fische wollen, indem es sich die Entscheidungen ansieht, die sie in Bezug auf Habitatpräferenzen treffen, was für ihr Wohlergehen von grundlegender Bedeutung ist. Dieses Protokoll kann leicht angepasst werden, um eine Vielzahl von verschiedenen Umweltfaktoren zu betrachten, einschließlich Kies versus sandigem Substrat, lebende oder kunststoffige Pflanzen oder sogar über verschiedene Wasserarten hinweg. Um ein Präferenzgerät einzurichten, verwenden Sie einen Versuchstank aus undurchsichtigem weißen Kunststoff, aufgeteilt in vier Zonen mit Wänden aus Acryl, an Ort und Stelle mit Silikondichtmasse befestigt.
Legen Sie die geeigneten Anreicherungsmaterialien gemäß den zu prüfenden spezifischen Lebensraumparametern in jede Zone. Zum Beispiel, gehören sandige versus felsige Substrate, künstliche Pflanzen im Vergleich zu Schutz, oder Fluss von Wasser im Vergleich zu künstlichen Pflanzen. Wenn der Wasserfluss als Parameter von Interesse verwendet werden soll, legen Sie kleine Pumpen, um Wasserstrahlen in den Tank zu liefern und stellen Sie die Pumpen auf eine bestimmte Geschwindigkeit, so dass sie einen konstanten und gerichteten Fluss von Wasser auf der Grundlage der Arten von Interesse Ökologie und Lebensgeschichte bieten.
In der Mitte des experimentellen Panzers, haben eine Central Arena, wo das Essen geliefert wird. Der Zugang zur Central Arena von jeder Zone sollte durch eine kleine Öffnung in den Trennwänden erfolgen, die groß genug ist, für die Arten von Interesse, um sich zwischen den Zonen ungehindert zu bewegen, aber klein genug, um alle visuellen Hinweise zu reduzieren, die die Fische aus anderen Zonen erleben könnten. Legen Sie einen Biofilter und eine Heizung in jede Ecke des Tanks außerhalb des Versuchsbereichs, um den Wasserfluss nicht zu stören und eine konstante Wassertemperatur über alle Zonen hinweg zu gewährleisten.
Richten Sie zusätzliche Versuchstanks ein, wie es der Weltraum vorschreibt, und stellen Sie sicher, dass alle Replizientanks einheitliche Bedingungen haben. Platzieren Sie Kameras auf Stativen, direkt über jedem Versuchsbehälter, so dass alle Zonen sichtbar sind. Nachdem Sie bestätigt haben, dass die Speicherkarten genügend Platz für die Aufnahme haben, stellen Sie die Raumbeleuchtung auf einen allmählichen 12-Stunden-Zyklus, hell/dunkel, um Sonnenaufgang und Sonnenuntergang zu simulieren.
Und stellen Sie die Wassertemperatur auf 25, plus oder minus ein Grad Celsius. Bewahren Sie die Fische in heimischen Tanks auf, wenn sie nicht getestet werden. Verwenden Sie am Tag des Experiments zwei Netze, um alle Testfische schnell aus ihren heimischen Tanks zu fangen und innerhalb von 30 Sekunden nach der Aufnahme in die Central Arena des Versuchstanks zu bringen.
An den Ersten bis vier Tagen werden die Fische Zeit damit verbringen, sich zu akklimatisieren und die verschiedenen Zonen zu erkunden. Sammeln Sie an diesen Tagen keine Daten. Führen Sie während der Akklimatisierung regelmäßige Wasserqualitätstests durch und ersetzen Sie das Wasser, wenn Probleme festgestellt werden.
Um die Fische zu füttern, verwenden Sie einen schwimmenden Futterring, der an der Wand der Central Arena an der Wasseroberfläche befestigt ist, um flockenfischfutter an die Fische zu liefern. Nach 30 Minuten ad libitum Zugang, verwenden Sie ein Tauchnetz, um die übrig gebliebenen Lebensmittel aus dem Tank zu entfernen. Schalten Sie an den Tagen fünf bis sieben die Kameras ein und zeichnen Sie das Fischverhalten für zwei Stunden nach jeder geplanten Morgen- und Nachmittagsfütterung auf.
Verwenden Sie am achten Tag das Tauchnetz, um alle Fische wieder in ihre heimischen Tanks zu bringen. Je nachdem, wie viel Sumpfwasser zur Verfügung steht, ersetzen Sie mindestens ein Drittel des Wassers im Versuchstank durch frisches Sumpfwasser, um die Auswirkungen von Stresshormonen auf die Fische und die anschließenden Replikationen zu reduzieren. Richten Sie dann die Versuchstanks gemäß dem Zonenrotationszeitplan für diese Woche ein und beginnen Sie den Testprozess mit einer neuen Charge Fisch.
Laden Sie die Videos am Ende jedes Aufnahmetages auf einen Computer herunter. Und verwenden Sie Video-Software, um manuell die Anzahl der Fische in jeder Zone zu zählen, in Fünf-Minuten-Intervallen, in jedem zweistündigen Aufnahmezeitraum. Um die Habitatpräferenzen zu analysieren, berechnen Sie die durchschnittliche Anzahl der Fische pro Zone für jeden Replikationsbecken.
Um eine Präferenzbewertung für die Strukturverwendung zu erhalten, berechnen Sie den Jacobs'preference-Index mit der angegebenen Formel. Betrachten Sie einen Fisch, der in eine Zone eingedrungen ist, wenn der ganze Körper des Fisches durch die Öffnung zwischen den Zonen kreuzt. Um festzustellen, ob sich die Geschwindigkeit, mit der die Fische während eines Beobachtungszeitraums zwischen den Zonen wechseln, ändert, berechnen Sie, wie oft ein Fisch aus der Central Arena in jede Zone eindringt, dividiert durch die Gesamtzahl der Fische in den ersten und letzten fünf Minuten jedes Beobachtungszeitraums.
Und berechnen Sie eine Start- und eine Endwert-Schaltrate für jeden Replikationstank. Führen Sie mithilfe statistischer Software relevante statistische Analysen durch, z. B. eine einseitige ANOVA mit einem Präferenzindex als abhängiger Variable und der Zone als Prädiktorvariable und einem gekoppelten t-Test auf dem Anfangs- und Endwertwechselfürstrate für jeden Tank. Um jede Zone mit der anderen Zone zu vergleichen, wenden Sie Tukeys Multiple-Vergleichstest nach dem Hoc-Test an.
In diesem repräsentativen Experiment demonstrierten die Zebrafische die höchste Präferenz für die Enriched and Flow Zone und mieden die Zonen Nur fließen und plain, wo er mehr Zeit in der Central Arena verbrachte. Darüber hinaus bewegten sich Zebrafische zu Beginn der Beobachtungsperiode häufiger zwischen den verschiedenen Lebensraumzonen als am Ende. Es ist wichtig, dass einheitliche Bedingungen wie externes Rauschen oder Bewegung, Wasserchemie oder Lichtpegel über Replizierbare Tanks hinweg beibehalten werden.
Präferenztests reichen bis zu dem Versuch zu verstehen, wie verschiedene Aspekte der Umweltanreicherung die Entscheidungen eines Einzelnen beeinflussen. Aber auch für vergleichende Umweltanreicherungsstudien nützlich.
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