Journal
/
Biochemistry
/
Att skapa mycket specifika kemiskt inducerad Proteindimeriseringssystem genom stegvis val av ett kombinatoriskt Endomänsantikroppsbibliotek
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Creating Highly Specific Chemically Induced Protein Dimerization Systems by Stepwise Phage Selection of a Combinatorial Single-Domain Antibody Library
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Att skapa mycket specifika kemiskt inducerad Proteindimeriseringssystem genom stegvis val av ett kombinatoriskt Endomänsantikroppsbibliotek

DOI:
10.3791/60738-v

•

10:17 min

•

January 14, 2020

•

, , , ,
1Department of Biochemistry and Institute for Protein Design,University of Washington

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:47TG1 Cell and Negative Selection Bead Preparation
  • 02:15Positive Selection Bead Preparation
  • 03:33Phage-displayed Nanobody Elution and Input/Output Titrations and Infection
  • 05:15Single Clone Isolation
  • 06:22Anchor Binder Validation
  • 08:13Results: Representative Anchor and Dimerization Binder Characterization
  • 09:39Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Skapa kemiskt inducerad proteindimerization system med önskad tillhörighet och specificitet för en given liten molekyl ligand skulle ha många biologiska avkänning och aktiverings applikationer. Här beskriver vi en effektiv, generaliserbar metod för de Novo Engineering av kemiskt inducerade dimeriseringssystem via det stegvisa urvalet av ett fag-visat kombinatoriskt endomänsantikroppsbibliotek.

Tags

Protein DimerizationBiosensorPhage DisplaySingle-domain AntibodySmall MoleculeCell BehaviorCell Metabolite MonitoringStreptavidin BeadsBiotinylated LigandNegative And Positive Selection

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Bakteriell Inner-membran Display för screening av ett bibliotek av antikroppsfragment

Effektiv och Platsspecifik antikropp märkning av stam-främjade azid-alkyn Cykloaddition

Mätning av proteinbindning till F-aktin genom sam-sedimentering

Protein Film infraröd elektrokemi visat för studie av H2 Oxidation av en [NiFe] Hydrogenase

Mycket känslig och kvantitativa påvisande av proteiner och deras isoformer av kapillär isoelektrisk fokusering metod

Fånga interaktion kineticsen av en jonkanal Protein med små molekyler av Bio-lager interferometri analysen

Immunisering av alpackor (Lama pacos) med proteinantigener och produktion av Antigen-specifika enda domän antikroppar

Hög känslighet mätning av transkription faktorn-DNA bindande samhörighet genom konkurrenskraftiga titrering med fluorescensmikroskopi

Analys av proteinveckning, Transport och nedbrytning i levande celler av radioaktiva puls Chase

Detektion av protein ubiquitination platser av peptidanrikning och masspektrometri

Read Article