Medicine
This content is Open Access.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
عملية زرع الكلى التلقائية في نموذج بورسين باستخدام 24 ساعة لحفظ الأعضاء والقياس المستمر عن بعد
Chapters
Summary August 21st, 2020
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
نماذج الحيوانات الكبيرة تلعب دورا أساسيا في بحوث زرع قبل الإكلينيكية. نظرا لتشابهه مع الإعداد السريري، فإن نموذج porcine لزرع الكلى التلقائي في العظام الموصوفة في هذه المقالة يوفر ممتازة في بيئة الجسم الحي لاختبار تقنيات الحفاظ على الأعضاء والتدخلات العلاجية.
Transcript
يصف هذا البروتوكول جميع الخطوات الرئيسية لإنشاء نموذج زرع الكلى التلقائي في العظام المسامية بنجاح باستخدام وقت الحفاظ على الأعضاء لمدة 24 ساعة والرصد عن بعد التشغيل. والميزة الرئيسية لهذا النموذج الحيواني الكبير لصناعة السيارات على دراسات الزرع في الجسم السابق على نماذج الحيوانات الصغيرة هي التشريحية الجراحية وأوجه التشابه الفيزيولوجية المرضية مع الإعداد السريري. سيقوم فريقنا في المستشفى الجامعي RWTH Aachen بإظهار الإجراءات.
بعد التأكد من المستوى المناسب من التخوم في خنزير أنثى أنثى بالغة صامية بين عشية وضحاها ، قم بعمل شق من ثلاثة إلى خمسة سنتيمترات في الفخذ وتشريح الشريان الفخذي بطريقة 360 درجة. استخدم مشرطًا رقم 11 لإجراء عملية استئصال الشرايين وإدخال مستشعر الشرايين لجهاز القياس عن بعد. بعد جعل الحقيبة تحت الجلد في الجناح الأيسر، نفق جهاز الإرسال والاستقبال عن بعد في الجناح وإصلاح جهاز الإرسال والاستقبال إلى اللفافة العضلات مع خياطة عقدة واحدة 3-O البولي بروبلين.
المقبل، وجعل اثنين من شقوق صغيرة على الجانب الأيسر والأيمين من الصدر ونفق أقطاب ECG الأحمر والأبيض إلى موقعها المعين. عندما يتم تأمين الأقطاب الكهربائية، ابدأ تسجيل بيانات القياس عن بعد. عند الحصول على إشارة مستقرة، إغلاق شق الفخذ مع الغرز ورذاذ فيلم خلع الملابس ووضع سترة porcine الحجم مناسبة على الحيوان.
بعد 14 يومًا من الجراحة الأولى ، قم بعمل شق من أربعة إلى خمسة سنتيمترات في الأخدود الوداجي على الجانب الأيمن من الحيوان المُخدَّر وتشريح الأنسجة تحت الجلد والعضلات لفضح الوريد المشعوذ. استخدم مقدمة ورقة قشر بعيدا أو طريقة Seldinger لإدخال القسطرة الوداجي. تأمين القسطرة مع خياطة البولي بروبلين 5-0 وإغلاق شق في طبقتين.
بعد التطهير الجراحي واللف العقيم، قم بإجراء عملية جراحية متوسطة لفتح البطن واستخدام مُناع البطن القياسي لفضح المجال الجراحي. فتح طبقة الصفاق واستخدام الكيكر، ملقط ثنائي القطب، ومقص غرامة لتشريح الكلى اليسرى والكالب من أي الأنسجة الملتصجة. ثم استخدم خياطة بوليجلاكتين 3-0 ل ligate وتقسيم الحالب الأيسر على الأقل 10 سنتيمترات إلى الكلى.
لاسترداد الكلى غير المشروع، استخدم المشابك الوعائية لإغلاق الشريان الكلوي والوريد بالقرب من الشريان الأورطي و vena cava. وقطع السفن فوق المحار. ثم تعطي الكلى لفريق الطاولة الخلفية لإعداد إضافية واستخدام خياطة البولي بروبلين 5-0 لإغلاق جذع الشريان الكلوي والوريد الكلوي.
مباشرة بعد استرجاع, استخدام معيار 14 قياس قسطرة الطرفية ل cannulate الشريان الكلوي وتدفق الكلى مع ما لا يقل عن 500 ملليلتر من الجليد الباردة الجهاز الحفاظ على الحل. بعد تدفق، التفاف الكسب غير المشروع في أكياس الأعضاء العقيمة لتخزين في حل الحفاظ على الجهاز مع وقت نقص تروية الباردة المستهدفة من 24 ساعة في أربع درجات مئوية باستخدام دائرة التبريد الكمبيوتر تسيطر عليها. قبل دقيقتين إلى خمس دقائق من لقط الأوعية الدموية، تحقن عن طريق الوريد 100 وحدة دولية لكل كيلوغرام من الهيبارين الناتيوم، ثم تزيل بعد ذلك الكلى اليمنى المقابلة كما هو موضح وإعادة فتح استئصال البطن المتوسط.
قبل دقيقتين إلى خمس دقائق من لقط الأوعية الدموية، وحقن الوريدي 100 وحدة دولية لكل كيلوغرام من الهيبارين الناتيوم وإزالة بعد ذلك الكلى اليمنى المقابلة كما هو موضح. ضع الكلى المحفوظة في المجال الجراحي وابدأ في إدارة 0.1 إلى 1 ميكروغرام لكل كيلوغرام في الدقيقة من النورادرينالين كضخ مستمر باستخدام متوسط ضغط الدم الشرياني ومعدل ضربات القلب لمراقبة الكفاءة. لالاستئصال من نهاية إلى نهاية من الوريد الكلوي، واستخدام 5-0 البولي بروبلين لوضع اثنين من غرز الزاوية وخياطة الجدار الخلفي بطريقة مستمرة.
بعد الانتهاء من الجدار الخلفي، استخدم أحد طرفي غرزة الزاوية القحفية لخياطة الجدار الأمامي في اتجاه القحف وطرد الوريد مع وحدة دولية 100 لكل ملليلتر من محلول ملحي Heparinized. لالعظم من نهاية إلى نهاية من الشريان الكلوي، واستخدام 6-0 البولي بروبلين غرزة الزاوية القحفية قبل استخدام تقنية المظلة لخياطة الجدار الخلفي بطريقة مستمرة كما هو موضح. خياطة الجدار الأمامي مع الطرف الآخر من خياطة البولي بروبلين مزدوجة المسلحة 6-0 وتدفق الشريان مع 100 وحدة دولية لكل ملليلتر من محلول ملحي Heparinized.
بعد الانتهاء من مرض الورم ، وربط الخيوط اثنين في الزاوية الدامالية وفتح متتابعة المشابك الوعائية والشروية الوريدية للسماح reperfusion من الكلى. بعد reperfusion, تدار موضعيا خمسة ملليلتر من بابافيرين إلى الجدار الخارجي للشريان الكلوي و تدار عن طريق الوريد 250 ملليلتر من 20٪ محلول الجلوكوز في جرعة واحدة 80 مليغرام من فوروسيميد. بعد ذلك، مرر قسطرة بول الأطفال الفرنسية الـ 12 عبر جدار البطن والجلد واستخدم الأربطة لتأمين القسطرة إلى الحالب.
أغلق طبقة الصفاق فوق الكلى لمنع خلع الطعم وصبغ الأوعية الدموية. و أغلق البطن في أربع طبقات كما هو موضح. وأخيرا، استخدام اللون دوبلر الموجات فوق الصوتية لضمان كافية الشريانية وريدي ضخ من الكسب غير المشروع في الكلى قبل العودة الحيوان recumbent تماما إلى مرفق الإسكان.
في هذه المجموعة التمثيلية من خمس تجارب زرع الكلى الذاتية في البورسين، نجحت عمليات زرع الجهاز المرسل والاستبداد وزرعها ذاتياً في كل مع وجود إشارات كافية للمتر عن بعد تم تسجيلها خلال فترة المراقبة. بعد إغلاق البطن، كشفت الأشعة فوق الصوتية دوبلر اللون مرضية الشرياني وريدي في الكلى في جميع الحالات. وصلت قيم البوتاسيوم والكياتين في مصل الدم إلى ذروتها في الأيام التالية للعمل الجراحي من ثلاثة إلى أربعة وأظهرت انتعاشًا تدريجيًا بعد ذلك.
بقي الدم pH ضمن المعدل الطبيعي وخرج البول تعافى إلى القيم الطبيعية خلال الأيام الأربعة الأولى بعد العملية الجراحية. يمكن استخدام هذا البروتوكول للإجابة على أسئلة مختلفة حول آثار تقنيات الحفاظ على الأعضاء أو العلاجات السابقة في الجسم الحي أو في الجسم الحي في نموذج كبير سريرياً.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
